cDNA文库基础上运用热启动聚合酶链反应末端延伸快速分离全长cDNA序列
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国家自然科学基金 (3 0 2 0 0 10 3 );国家重大基础研究项目 (G2 0 0 0 0 5 690 5 );湖南省自然科学基金 (0 0JJY2 0 2 7);湖南省教育厅课题 (0 0C15 1)资助


Rapid Isolation of Full-Length cDNA Sequence from cDNA Library by Hot-Start Polymerase Chain Reaction
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    建立一种cDNA文库基础上运用热启动聚合酶链反应末端快速扩增分离人类新基因全长cDNA序列的新技术。以文库载体序列与待扩增目的基因片段为模板各设计引物进行热启动聚合酶链反应扩增,从人胎肝cDNA文库中获得氧化型低密度脂蛋白诱导U937细胞泡沫化过程中差异表达序列标签片段(FRG4)的全长cDNA序列,聚合酶链反应产物克隆到pGEMT载体中,并测序鉴定,从而成功获得FRG4的全长cDNA序列。该技术是一种快速有效的分离人类新基因全长cDNA序列的方法

    Abstract:

    Aim To establish a new technique for rapid isolation full length cDNA sequence of human novel gene from cDNA library using hot start PCR. Methods The library vector specific primers and gene specific primers have been designed for performing hot start PCR to attain the full length cDNA of differential expressed sequence tag(FRG4) of U937 foam cell formation induced by ox LDL from human fetal liver cDNA library. The products of PCR are cloned to pGEM T vector and sequenced. Results We have successfully attained the full length cDNA sequence of FRG4. Conclusion This technique is a rapid and efficient method for isolating full length cDNA sequence of human novel gene from cDNA library.

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引用本文

闾宏伟,杨向东,何淑雅,杨永宗. cDNA文库基础上运用热启动聚合酶链反应末端延伸快速分离全长cDNA序列[J].中国动脉硬化杂志,2002,10(5):396~399.

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  • 收稿日期:2002-03-21
  • 最后修改日期:2002-08-24
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