摘要:以THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,观察载脂蛋白AⅠ对THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1的影响,以便探讨载脂蛋白AⅠ对动脉粥样硬化发生发展的影响。用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,运用逆转录—多聚酶链反应和Western印迹分别检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA与三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白的表达,采用流式细胞术检测细胞平均三磷酸腺苷结合盒转运体A1荧光强度。实验显示载脂蛋白AⅠ引起THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯呈时间依赖性减少,而三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平、细胞平均三磷酸腺苷结合盒转运体A1荧光强度以及细胞内胆固醇流出呈时间依赖性增加,但三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA没有明显变化。巯基蛋白酶抑制剂(leupeptin和ALLN)增加三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平,而其它蛋白酶抑制剂(pepstatinA、aprotinin及phosphoramiddon)不增加三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平,蛋白体抑制剂(lactacytin)和溶酶体抑制剂(NH4 C1)也不影响三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平。提示巯基蛋白酶可快速分解THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质,而载脂蛋白AⅠ可阻碍巯基蛋白酶快速分解三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质,从而提高THP 1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白质水平,增加细胞内胆固醇流出,降低细胞内胆固醇聚积。