摘要:目的体外获得有生物活性的大鼠血管生成素1(Ang-1)基因修饰的内皮祖细胞(EPC),即Ang-1-EPC,并将其移植入股动脉球囊损伤的大鼠模型中,探讨Ang-1基因修饰的EPC对大鼠急性球囊损伤动脉血管的修复作用。方法大鼠股动脉经球囊损伤后2天,扫描电镜观察其内皮损伤情况。实验分为对照组、单纯损伤组和细胞移植组,其中对照组包含正常对照组、假手术组和PBS移植组(n=16);细胞移植组包括EPC移植组、PNL-EPC移植组和Ang-1-EPC移植组(n=16),并通过血管外膜下直接注射移植基因修饰的EPC。2周时处死部分动物取股动脉组织并取外周血,ELISA检测各组血清Ang-1含量,HE染色检测各组动脉内膜中膜厚度,PCNA免疫组织化学观察平滑肌细胞增殖效应,Real-Time PCR定量分析股动脉组织中Ang-1/Tie-2的mRNA含量;4周时取股动脉组织,荧光显微镜观察EGFP(+)细胞,VⅢ因子免疫荧光观察Ang-1-EPC的分化情况。结果球囊损伤后,电镜观察证实有明显血管内皮剥脱。2周时石腊切片HE染色发现明显的新生内膜增生,血管腔明显变狭窄。经PCNA组织化学染色发现新生内膜有较多PCNA阳性细胞。经移植干预后,损伤血管的新生内膜增生减轻,中膜和新生内膜中PCNA阳性细胞比例减低,内膜/中膜比值减小,其中Ang-1-EPC移植干预的效果最明显,提示移植干预有抑制大鼠球囊损伤血管后新生内膜增生的效果。Ang-1-EPC明显上调股动脉组织中Ang-1 mRNA含量,4周时Ang-1-EPC移植入股动脉后均可在荧光显微镜下被检出,VⅢ因子免疫荧光提示EPC可分化成具有内皮细胞标志的细胞系。结论Ang-1基因修饰的EPC可以减缓球囊损伤动脉血管狭窄。