摘要:为观察葛根素诱导兔血管平滑肌细胞凋亡过程中相关基因mRNA的差异表达,探讨葛根素促进血管平滑肌细胞凋亡的分子机制。应用葛根素体外诱导兔血管平滑肌细胞凋亡模型和mRNA差异显示技术观察葛根素诱导与正常细胞间基因差异表达,将葛根素作用后高表达的cDNA片段克隆、测序,与GeneBank进行同源性分析,并用32P标记探针,再与不同浓度葛根素作用的血管平滑肌细胞总RNA进行Northern印迹分析。结果发现,1、差异显示图谱出现一些仅在葛根素组高表达而在对照组无表达的cDNA片断。2、将其序列与GeneBank进行同源性比较,证实其中3个序列均与兔葡萄糖调节蛋白94基因高度同源。3、Northern杂交证实兔葡萄糖调节蛋白94基因在葛根素作用的血管平滑肌细胞中高表达,与差异显示图谱一致。4、灰度扫描分析,兔葡萄糖调节蛋白94基因在血管平滑肌细胞中表达量与葛根素浓度成正比。上述结果提示,葛根素诱导血管平滑肌细胞凋亡过程中上调了兔葡萄糖调节蛋白94基因表达,该基因在此过程中可能起到一定作用