目的 泡沫化细胞差异表达基因FRG4经生物信息学分析,与人突触相关蛋白基因有很高同源性,经联机检索,有关突触相关蛋白的研究很少,与脂蛋白代谢、泡沫细胞形成和凋亡的关系没有报道。本文在对泡沫化相关基因FRG4分析的基础上,利用计算机软件进行抗原表位分析,制备特异的抗人突触相关蛋白的多克隆抗体,为进一步深入研究其表达和功能提供条件。方法与结果 ①选取抗原多肽:利用ExPASy软件和BioEdit软件对FRG4cDNA序列进行亲水性分析,预测其二级结构;使用Lasergene99软件预测其抗原决定族;根据亲水性、二级结构、偶联难易及实验难度选取抗原13肽PKLVKEEVFWRNY。②多肽合成及交联:采用美国ABI公司的多肽自动合成仪,以固相合成法合成,合成产物经高效液相色谱纯化检测,纯度达到90 %以上;抗原多肽与血兰蛋白用BDB法交联,与不完全弗氏佐剂等体积混合包被。③动物免疫:多点皮下注射抗原免疫新西兰兔,每两周强化免疫一次,第三次免疫后10天取耳血测抗体效价(ELISA法)。④抗血清收获及检测:第四次免疫后第十至十四天经颈动脉放血,分离抗血清,冷冻抽干,- 2 0℃保存。高效液相色谱检测显示抗体纯度达82 .79% ,抗体滴度为1∶16 0 0 0 ,免疫印迹方法检测在4 0kDa处有一条带,与软件分析结果相符合。结论 制备了高效的免抗人突触相关蛋白多克隆抗体。