负荷内源性高甘油三酯血症患者血清极低密度和低密度脂蛋白对HepG2细胞载脂蛋白CⅢ受体功能的影响
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    目的 探讨载脂蛋白CⅢ受体在内源性高甘油三酯血症发病机制中的作用。材料与方法 人肝癌细胞系HepG2 (本室保种) ;RPMI 16 40培养基(GIBCO) ;L 谷氨酰胺(EMK进口分装) ;新生小牛血清(成都华西生化制品厂) ;青霉素G钠、硫酸链霉素(华北制药厂) ;胰蛋白酶(1∶2 5 0 ,Difco进口分装) ;Na12 5I(Amersham) ;纯化人载脂蛋白CⅢ,由本室傅强博士制备;低温乙醇法制备人血浆白蛋白组份FⅡ+FⅢ(由成都蜀阳制药厂提供) ;甘油三酯试剂盒和胆固醇试剂盒均购自北京中生公司;人血清白蛋白(Takara) ;血浆密度标准缓冲液(PDB ,含0 .9%NaCl,0 .0 1%NaN3 ,10mmol LTris HCl及1mmol LEDTA ,pH 7.4 ) ;其它试剂均为国产分析纯。人肝癌细胞系HepG2细胞按常规方法培养。取高甘油三酯血症患者[甘油三酯≥5 .93mmol L (35 0mg dL) ,总胆固醇≤6 .74mmol L (2 6 0mg dL) ]及血脂正常者[甘油三酯≤1.7mmol L(15 0mg dL) ,总胆固醇≤6 .74mmol L (2 6 0mg dL) ]空腹血清各2 0mL(均为多人的混合血清) ,按略加修改的张林华和刘秉文等的一次性密度梯度超速离心法操作。甘油三酯和胆固醇含量用北京中生公司酶法试剂盒测定;受体分析以12 5I标记的人载脂蛋白CⅢ为配体,利用放射性配体结合分析法,分别观察负荷高甘油三酯血症患者血清和低密度脂蛋白后HepG2细胞载脂蛋白CⅢ受体功能的变化;5 .数据统计:各组间载脂蛋白CⅢ受体Kd值和Bmax值之间的比较采用样本均数的t检验。结果 负荷高甘油三酯血症—极低密度脂蛋白后,HepG2细胞载脂蛋白CⅢ受体特异结合12 5I 载脂蛋白CⅢ的能力(即kd值)明显增强(4 .16±0 .2 3×10 -9mol L比8.5 7±0 .4 5×10 -9mol L ,P<0 .0 0 1) ,但受体的结合容量(即Bmax值)无明显改变;负荷高甘油三酯血症—低密度脂蛋白对HepG2细胞载脂蛋白CⅢ受体特异结合12 5I 载脂蛋白CⅢ的能力及其结合容量均无影响。结论 高甘油三酯血症 极低密度脂蛋白分子中TG和载脂蛋白CⅢ水平的的升高,可能是导致载脂蛋白CⅢ受体亲和力显著增加的主要因素。

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刘皓,刘秉文.负荷内源性高甘油三酯血症患者血清极低密度和低密度脂蛋白对HepG2细胞载脂蛋白CⅢ受体功能的影响[J].中国动脉硬化杂志,2003,11(6):532.

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