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内皮细胞低氧复氧损伤模型的建立
作者:
作者单位:

(南华大学心血管疾病研究所 动脉硬化学湖南省重点实验室 湖南省动脉硬化性疾病国际科技创新合作基地, 湖南省衡阳市 421001)

作者简介:

胡佳,硕士,研究方向为心血管病病因、发病机制及防治,E-mail为879471434@qq.com。通信作者韦星,博士,副教授,硕士研究生导师,研究方向为心血管病病因、发病机制及防治,E-mail为weijiajun17528@163.com。

基金项目:

湖南省教育厅科学研究重点项目(19A432)


Establishment of hypoxia/reoxygenation injury model of endothelial cells
Author:
  • HU Jia

    HU Jia

    Institute of Cardiovascular Diseases & Key Laboratory for Arteriosclerology of Hunan Province & Hunan International Scientific and Technological Cooperation Base of Arteriosclerotic Disease, University of South China, Hengyang, Hunan 421001, China
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  • XIE Jiaxin

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  • CHENG Jiao

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  • WEI Xing

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Affiliation:

Institute of Cardiovascular Diseases & Key Laboratory for Arteriosclerology of Hunan Province & Hunan International Scientific and Technological Cooperation Base of Arteriosclerotic Disease, University of South China, Hengyang, Hunan 421001, China)

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    摘要:

    目的 构建人血管内皮细胞低氧复氧损伤模型,作为心肌组织慢复流的体外研究模型。方法 设定三气培养箱的混合气中5%O2为低氧培养条件,二氧化碳培养箱(95%空气、5%CO2)中的培养条件为复氧条件。将对数生长期的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)随机分为5组,分别置于三气培养箱(90%N2、5%CO2、5%O2)中处理不同时间(0、4、8、16及32 h)。挑选出最佳低氧处理时间后,再将随机分组的细胞进行不同时间(0、1、2、3、4、5及6 h)的复氧处理。Western blot检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)的蛋白表达；显微镜下观察细胞形态学变化；CCK-8法检测细胞存活率；酶联免疫吸附法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性以反映细胞损伤情况。结果 与对照组相比,实验组HUVEC的HIF-1α蛋白表达随低氧处理时间的延长而增高(P＜0.01)；细胞密度在低氧处理的短时间内会适应性增加,从16 h开始降低；细胞存活率的变化趋势与细胞密度一致(P＜0.01)；LDH活性则在低氧4 h时升高,低氧8 h时回落,低氧16 h时又重新回升(P＜0.01)。复氧后,细胞密度与细胞存活率的变化随时间呈现先降低后升高的趋势(P＜0.05)；LDH活性则随时间呈现先升高后降低的趋势,峰值出现于复氧3 h(P＜0.01)。实验结果表明,低氧16 h为最佳低氧处理时间,复氧3 h为最佳复氧处理时间。结论 本研究建立了稳定可靠的HUVEC低氧复氧损伤模型,为心肌组织缺血再灌注后慢复流的体外实验研究奠定了基础。

    参考文献
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    引证文献
引用本文

胡佳,谢佳欣,成姣,韦星.内皮细胞低氧复氧损伤模型的建立[J].中国动脉硬化杂志,2021,29(6):506~511.

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  • 收稿日期:2021-03-12
  • 最后修改日期:2021-04-16
  • 在线发布日期: 2021-06-11

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