摘要:为了揭示动脉粥样硬化发生发展过程中血管平滑肌细胞增殖与凋亡的关系及其调节机制,采用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法对家兔动脉粥样硬化斑块组织中平滑肌细胞的凋亡情况进行原位检测,并对原癌基因bcl-2、c-myc和P53在斑块组织中的表达活性进行North-ernblot分析。结果发现,在动脉粥样硬化斑块组织中有许多TUNEL染色阳性的平滑肌细胞,提示斑块组织中有平滑肌细胞凋亡发生:其斑块组织的DNA电泳图谱呈梯形状.符合细胞凋亡的特征性改变。Northern印迹分析表明,在动脉粥样硬化斑块组织中,原癌基因bck-2和P53的表达较正常组织增强,C-myc表达减低。提示这些基因的表达对动脉粥样硬化斑块组织中的平滑肌细胞凋亡起着重要的调节作用。

摘要:为探讨氧化型低密度脂蛋白在人外周血单核巨噬细胞中的代谢及其致动脉粥样硬化的机制,使用放射配基法观察了两种低密度脂蛋白在单核巨噬细胞中的代谢情况,并测定了细胞内胆固醇含量的变化。结果发现,人外周血单核巨噬细胞通过受体途径代谢低密度脂蛋白。该受体可饱和,最大结合量(Bmax)为274μg/g细胞蛋白,解离常数为35.7mg/L。低密度脂蛋白经氧化修饰后,人外周血单核巨噬细胞对其结合、摄取和降解均显著增加;与氧化型低密度脂蛋白共同孵育的人外周血单核巨噬细胞内总胆固醇含量明显高于低密度脂蛋白组。以上结果提示,低密度脂蛋白经氧化修饰后在人外周血单核巨噬细胞内的代谢途径发生改变并导致细胞内总胆固醇的堆积,促进了动脉粥样硬化的发生。

摘要:用苏丹Ⅳ染色观察巨噬细胞内脂质聚积的变化;通过酶-荧光法检测巨噬细胞内胆固醇含量并检测125Ⅰ标记氧化型低密度脂蛋白降解量来反映巨噬细胞清道夫受体的活性,以探讨硫酸乙酸肝素蛋白聚糖及肝素对巨噬细胞脂质蓄积的影响及机制。结果发现,氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)组巨噬细胞的胞浆内可见较多苏丹Ⅳ着色红染颗粒,氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)十硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(15.5mg/L)组0及氧化型低密度脂蛋白(100mg/L)十肝素(200mg/L)组巨噬细胞内红色颗粒明显少于氧化型低密度脂蛋白组;氧化型低密度脂蛋白十硫酸乙酰肝素蛋白聚糖组及氧化型低密度脂蛋白十肝素组巨噬细胞内总胆固醇和胆固醇酯的含量明显低于氧化型低密度脂蛋白组(p<0.05,p<0.01);硫酸乙酰肝素蛋白聚糖组及肝素组125Ⅰ标记的氧化型低密度脂蛋白降解量均低于对照组。结果提示,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖和肝素可能是通过下调清道夫受体活性减少了巨噬细胞对氧化型低密度脂蛋白的摄取而抑制脂质在巨噬细胞内的聚集和泡沫细胞的形成。

摘要:在人脐静脉和牛主动脉内皮细胞培养基中加入联胺,引发其脂质过氧化损伤,观察能否诱导内皮细胞表述单核细胞起化蛋白河。用斑点杂交法检测内皮细胞暴露于联胺后其单核细胞趋化蛋白-1mRNA的表达,杂交用的探针为了r32P5’末端标记的寡核苷酸探针。同时,用酶联免疫反应检测内皮细胞暴露于联胺后.其条件培养基中的单核细胞趋化蛋白-1蛋白含量。斑点杂交显示.培养的内皮细胞可表达单核细胞趋化蛋白-1mRNA,暴露于联胺后.其单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达水平明显升高。而且,单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达水平与联胺的作用时间和浓度均呈正相关。酶联免疫反应显示,各组条件培养基中的单核细胞趋化蛋白-1蛋白含量亦与联胺作用的时间和浓度呈正相关。提示内皮细胞的脂质过氧化损伤可诱导其产生单核细胞起化蛋白-1增加,在动脉粥样硬化发生过程中单核细胞的聚集可能起重要作用。

摘要:为探讨血管紧张素转化酶基因插入/缺失多态性与冠心病的关系,用多聚酶链反应方法检测79例冠心病患者和68例健康人血管紧张素转化酶基因第16内含子中长度为287bP碱基片段的插入/缺入情况、按其存在与否将研究对象分为缺失型纯合子、插入型纯合子和杂合子,同时检测血清血管紧张素转化酶活性。结果发现冠心病组中缺失型基因频率显著高于对照组(p<0.05),缺失型等位基因频率较对照组亦明显增高(p<0.05)。对照组与冠心病组间血清血管紧张素转化酶活性比较无明显差别,但两组内不同基因型之间血管紧张素转化酶活性均存在显著差别,缺失型最高,插入型最低。以上结果提示,血管紧张素转化酶基因插入/缺失多态性与冠心病有关,缺失型可能是冠心病发生的危险因素之一,血管紧张素转化酶基因缺失型者冠心病的发生可能与其较高的血清转化酶水平有关。

摘要:为了研究不易感动脉粥样硬化动物北京鸭多种载脂蛋白的基因分子结构,在国内外首次快速构建了鸭肝细胞CDNA文库。采用一步法提取鸭肝细胞总RNA;寡核胸苷酸为吸附介质,柱层析法进一步提取mRNA。以此为模板,利用改良的中CDNA合成方法,反转录合成鸭肝细胞CDNA的第一、二链。经CDNA双链末端修饰,连接含双酶切位点的连接子后重组于噬菌体载体,包装后获得高滴度的鸭肝细胞。CDNA文库,放射自显影显示合成的。CDNA产物大小在400～5000个核苷酸之间,该文库的克隆重组率98.5%以上,随机提取白色噬菌斑DNA,酶切鉴定均有CDNA插入片段。以制备的兔抗鸭aPoAI多抗为探针,从构建的cDNA文库中克隆出鸭aPoAIcDNA核苷酸序列,与常规方法比较,本法简便、快速,易于操作和掌握。本研究还对应用此方法构建CDNA文库的某些环节进行了讨论。

摘要:为鉴定猪肾上腺皮质细胞膜是否存在高密度脂蛋白结合蛋白,并研究其特性,从新鲜猪肾上腺皮质细胞膜提取高密度脂蛋白结合蛋白,应用亲和层析法将其初步纯化。获得的可溶性蛋白经Ligandblot结合分析和Dotblot法测定,结果发现此膜蛋白与高密度脂蛋白有高度亲和力,用Westernblot法测得该蛋白的分子量为80kDa,亲和层析提取得到的结合蛋白分子量为77kDa。应用生物素-亲和素酶联免疫吸附试验测定该蛋白的结合特性:平衡解高常数(kd)=21.6μg/g,最大结合量(Bmax)=678.2mg/L蛋白。结果提示纯化的猪肾上腺皮质细胞膜高密度脂蛋白结合蛋白具有很高的亲和力,证明亲和层析法条件温和。

摘要:为观察实验性高血压所致的颅内大动脉损害的特征.将易卒中型肾血管性高血压大鼠的大脑中动脉和基底动脉进行形态学测量.并观察了用卡托普利抗高血压治疗后这些测量参数的变化。结果发现,高血压大鼠的大脑中动脉和基底动脉均有中层肥厚,但前者主要由平滑肌细胞增殖、肥大引起,后者却主要是血管壁重构的结果。卡托普利抗高血压治疗可控制平滑肌细胞增殖、肥大,但不能改善血管壁重构。以上结果提示,高血压所致的颅内动脉损害主要表现为血管中层肥厚,而且不同血管对高血压和抗高血压治疗的反应有差异。

摘要:为测定动物组织中对预防动脉粥样硬化有效的成分-牛磺酸的含量.利用渗透压原理,以水为溶剂先提取动物组织中牛磺酸,用真空冷冻抽干浓缩后进行柱前衍生处理、进样.经反相高效液相色谱柱内疏水分离后,再用标准曲线法进行定量测定。在选定的试验条件下,牛磺酸保留时间为5.06min,分离效果好,峰形呈正态分布,样品溶液相对标准偏差为1.5%.最低检出量是4.48ng,牛磺酸含量在5.58X103～1.79X105μg/L范围,色谱峰面积与牛磺酸含量间有良好线性关系(r=0.9998),131.2～9682ng牛磺酸的样品加标回收率为97.79/～101.99%。按照此法测得蛞蝓组织中牛磺酸含量为75.4μg/g。此方法简便、准确,抗干扰能力强,是一种测定动物中微量牛磺酸的比较完善的分析方法。

摘要:为了探索肺炎衣原体感染和冠状动脉粥样硬化之间的关系、利用肺炎衣原体主要外膜蛋白基因上的保守序列设计的3条引物,通过多聚酶链反应检测32例冠状动脉左前降支粥样硬化斑块以及7例正常冠状动脉左前降支中肺炎衣原体。结果发现,32例有粥样硬化斑块的冠状动脉左前降支中有14例多聚酶链反应阳性.阳性率为43.75%,7例正常冠状动脉中无一例阳性,阳性率为0%。结果提示肺炎衣原体在有粥样硬化冠状动脉和正常冠状动豚中存在显著差异。

摘要:为研究原发性肾病综合征时大量蛋白尿和低白蛋白血症与脂质代谢异常之间的关系,检测20例住院原发性肾病综合征病人24h尿蛋白排泄量、血白蛋白浓度、血总胆固醇及低密度脂蛋白浓度。结果发现,肾病综合征病人都有明显的脂质代谢异常,尿蛋白量和血总胆固醇浓度呈正相关(r=0.43,p<0.05),和低密度脂蛋白有一定相关,但无统计学意义(r=0.37,p>0.05);血白蛋白浓度和血总胆固醇及低密度脂蛋白均呈明显负相关(分别为r=-0.69,p<0.01及r=-0.51,p<0.01)。提示,肾病综合征时蛋白尿和低白蛋白血症与脂质代谢异常存在明显的相关关系。

摘要:观察30例冠心病高脂血症患者和16例正常人脂过氧化物、L-精氨酸、硝酸根、亚硝酸根、组织型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂水平的变化。结果发现,冠心病高脂血症患者L-精氨酸水平、组织型纤溶酶原激活物和超氧化物歧化酶活性下降(与对照组相比,p<0.05),硝酸根、亚硝酸根及脂过氧化物水平升高(p<0.05)。结果提示冠心病高脂血症患者血浆中L-精氨酸相对缺乏,可能与其一氧化氮需要量增加有关;血清中硝酸根和亚硝酸根的含量增加,可能与一氧化氮的降解增加有关;组织型纤溶酶原激活物活性降低可能与细胞功能障碍有关。

摘要:本文分析了200例老年人胸片,发现头臂干动脉粥样硬化后出现血管扩张、伸长和纤曲,引起右上级隔影增宽,严重者右上纵隔呈突向肺野的肿块样X线形像,同时讨论其病理解剖基础、临床和X线特点及鉴别诊断,从而提高了对老年人头臂干动脉硬化的认识,对鉴别右上纵隔影增宽的肺内、纵隔病变有一定的临床意义。

摘要:本文报道脑梗塞患者212例,平均发病年龄63.4岁,60岁以后发病占61.79%。高血压动脉硬化为主要病因,占52.83%。梗塞部位以基底节区最多见,脑叶次之,小脑、脑干梗塞则少见。结合文献对其病因、发病情况和CT进行探讨,提出脑梗塞将是老年医学的一个重要课题。

摘要:我科于1996年5月～1997年8月使用普乐林治疗冠心病45例,获得了较好的疗效,现予报道。1临床资料1.1病例本组患者男性41例,女性4例,年龄53～78岁,平均64.2岁,按WHO1979年拟订的诊断标准,确诊为冠心病,用药前后常规检查心电图、胸片、肝功能、肾功能和血液流变学指标。用药期间观察血压和心率。①冠心病的临床表现:阵发性心前区闷痛24例,心悸、胸闷12例,无症状9例;②心功能:Ⅰ级30例,Ⅱ级10例,Ⅲ级4例,Ⅳ级1例;③心电图改变:心肌缺....

摘要:单核细胞趋化蛋白-1是由76个氨基酸组成的碱性蛋白质,分子中含有两个二硫键,属于C-C趋化因子亚族,对单核细胞具有趋化和激活作用.也可趋化嗜碱性粒细胞、活化的自然杀伤细胞和记忆T淋巴细胞,同时还调节一些细胞的功能。动脉里细胞能表达和分泌单核细胞趋化蛋白-1,并且可被氧化修饰的脂蛋白、脂多糖和一些细胞因子增强。它是引起单核细胞迁入内膜的主要趋化因子,在动脉粥样硬化的发生发展中具有重要作用。

摘要:动脉粥样硬化是许多心脑血管病的主要病理基础,抗动脉粥样硬化药的应用,对防治心脑血管病具有重要的战略意义。近20年来这类药物的发展很快,出现了许多新型调血脂药,发展了抗氧化剂和ω-3型多烯脂肪酸。由于分子生物学和现代生物技术的运用,在许多病因和病理环节上提供出发展抗动脉粥样硬化药的新苗头,并正在向基因治疗性抗动脉粥样硬化药还进。

摘要:本文就载脂蛋白E多态性分析方法方面的有关文献进行综述。通过以等电聚焦电泳为基础的蛋白水平检测和以多聚酶链反应为工具的分子生物学水平的分型分析.提出了多态性检测的发展趋势,并简述了载脂蛋白E与动脉粥样硬化之间的关系。

摘要:对氧磷酶是存在于高密度脂蛋白分子中的一种酶,它能水解对氮磷类有机磷化合物和高密度脂蛋白上的氧化型磷脂.因其具有抗动脉粥样硬化作用而日益受到重视。本文就对氧磷酶的生物化学性质、生理功能及其在动脉粥样硬化发生中的作用进行综述。