摘要:目的探讨脂欣康胶囊对动脉粥样硬化泡沫化细胞形成的可能调控机制,观察脂欣康胶囊及洛伐他汀干预大鼠血管平滑肌细胞源性泡沫细胞CD36mRNA表达的变化。方法用组织贴块培养法培养血管平滑肌细胞,以氧化型低密度脂蛋白使其泡沫化,并以脂欣康胶囊和洛伐他汀分别干预。采用流式细胞仪和原位杂交技术观察CD36mRNA表达的变化。结果与生理盐水组和空白对照组相比,脂欣康胶囊与洛伐他汀均能降低CD36mRNA的表达(P<0.01),且脂欣康组较洛伐他汀组下降更显著(P<0.05)。结论脂欣康与洛伐他汀均能抑制CD36的表达,并且其作用优于洛伐他汀。其作用机制可能为脂欣康的益气活血、解毒化浊之功使平滑肌细胞内蕴藏的痰浊瘀毒得以疏布排泄于外。这可能是其抑制血管平滑肌细胞增殖和泡沫化细胞形成的机制之一。

摘要:目的构建稳定表达基质细胞衍生因子1α的ECV304细胞系,研究基质细胞衍生因子1α在单核细胞/内皮细胞粘附中的作用。方法将大鼠基质细胞衍生因子1α基因聚合酶链反应产物及质粒载体pcDNA3.1用EcoRⅠ进行酶切,去磷酸化,置于连接反应体系中进行连接,将连接产物氯化钙法转化DH5α菌。氨苄青霉素筛选并扩增阳性菌落,经酶切鉴定插入方向正确后,再用G418筛选、逆转录聚合酶链反应检测基质细胞衍生因子1α浓度,建立稳定转染ECV304细胞系。在6孔板上种植转染基质细胞衍生因子1α基因的ECV304细胞,加THP-1细胞37℃孵育30min,磷酸缓冲液轻洗3遍,去除未粘附细胞,倒置显微镜下计数上、下、左、右、中5个视野,取其平均值得到每个视野粘附单核细胞数。结果经逆转录聚合酶链反应检测证实,稳定表达基质细胞衍生因子1α的ECV304细胞系构建成功,细胞计数表明,转染ECV304细胞系粘附THP-1细胞数是转染空质粒的十几倍,CXCR4单抗基质细胞衍生因子1α多抗均显著减少其粘附力(P<0.01)。结论内源性基质细胞衍生因子1α能促进ECV304细胞与单核细胞的粘附。

摘要:目的观察基质细胞衍生因子1α对氧化型低密度脂蛋白诱导的单核细胞与内皮细胞粘附的影响。方法逆转录聚合酶链反应法和免疫印迹法分别检测内皮细胞基质细胞衍生因子1αmRNA和蛋白的表达,静态粘附实验观察氧化型低密度脂蛋白和基质细胞衍生因子1α抗体干预对内皮细胞与单核细胞粘附的影响。结果基质细胞衍生因子1α在静息状态下的血管内皮细胞上几乎不表达,随着氧化型低密度脂蛋白浓度增加和处理时间延长,基质细胞衍生因子1α的mRNA和蛋白表达水平均明显上调,25mg/L氧化型低密度脂蛋白处理48h时,基质细胞衍生因子1α表达到达峰值。氧化型低密度脂蛋白浓度为1、5、25及125mg/L时,每个视野粘附的单核细胞数分别为190±15、226±23、280±14、253±8,而正常对照组为104±10,差异有显著性意义(P<0.05)。终浓度为0.01、0.1和1μg/L基质细胞衍生因子1α抗体干预后,粘附的单核细胞数分别为202±17、142±6和115±12,明显低于对照组的279±11(P<0.05)。结论基质细胞衍生因子1α参与了内皮细胞与单核细胞的粘附。

摘要:目的观察基质细胞衍生因子1α对体外培养的大鼠骨髓源内皮祖细胞迁移的影响。方法微孔法从大鼠骨髓提取内皮祖细胞。免疫荧光鉴定血管内皮生长因子受体2和CD133,不同浓度基质细胞衍生因子1α处理内皮祖细胞后,采用Transwell迁移系统检测内皮祖细胞迁移能力。结果分离出的大鼠骨髓内皮祖细胞免疫荧光下血管内皮生长因子受体2+和CD133+双阳性,基质细胞衍生因子1α呈浓度依赖性促进内皮祖细胞迁移,对照组与基质细胞衍生因子1α各处理组比较差异均具显著性(P<0.05或P<0.01)。结论基质细胞衍生因子1α呈浓度依赖性促大鼠骨髓源内皮祖细胞迁移。

摘要:目的探讨pcDNA3.1-基质细胞衍生因子1α重组质粒对单核细胞的趋化作用。方法将pcDNA3.1-基质细胞衍生因子1α质粒用脂质体的方法导入人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞中,G418筛选细胞克隆。通过逆转录聚合酶链反应法在转录水平检测基质细胞衍生因子1α在转基因ECV304细胞中的表达。通过Transwell实验研究基质细胞衍生因子1α对单核细胞的趋化作用。结果获得了稳定表达基质细胞衍生因子1α基因的ECV304细胞克隆,pcDNA3.1-基质细胞衍生因子1α重组质粒对单核细胞具有趋化作用。结论重组大鼠基质细胞衍生因子1α对单核细胞具有明显的趋化作用。

摘要:目的为探讨氧化型低密度脂蛋白对大鼠血管平滑肌细胞上基质细胞衍生因子1α表达的影响。方法原代培养的大鼠血管平滑肌细胞,与氧化型低密度脂蛋白共同孵育,用逆转录聚合酶链反应检测基质细胞衍生因子1αmRNA,免疫印迹检测其蛋白表达变化,观察氧化型低密度脂蛋白对大鼠血管平滑肌细胞表达基质细胞衍生因子1α的剂量—时间效应。结果原代培养的大鼠血管平滑肌细胞有基础水平的基质细胞衍生因子1α表达,且在0～50mg/L范围内,基质细胞衍生因子1α表达量随氧化型低密度脂蛋白浓度增加而增加,50mg/L可使基质细胞衍生因子1α上调约5倍;经50mg/L氧化型低密度脂蛋白刺激0～48h,其峰值在12h,随后逐渐下降,但仍维持在基础水平的3倍左右。结论氧化型低密度脂蛋白上调大鼠血管平滑肌细胞的基质细胞衍生因子1α的表达。

摘要:目的研究血管紧张素受体拮抗剂替米沙坦对血管损伤性重塑及其过程中粘着斑激酶表达和活化的影响。方法建立大鼠主动脉内皮剥脱术后再狭窄模型,将雄性大鼠随机分为对照组、模型组和替米沙坦组,每组12只。30天后取损伤部位血管段进行形态学观察,逆转录聚合酶链反应法测定粘着斑激酶mRNA的表达,Westernblot法测定粘着斑激酶蛋白总量和磷酸化蛋白含量。结果术后30天,模型组主动脉内膜明显增厚,粘着斑激酶mRNA水平明显增高,蛋白含量及磷酸化水平均明显增加,而替米沙坦组血管内膜增生程度明显减轻,粘着斑激酶mRNA表达活性明显降低,粘着斑激酶蛋白含量及磷酸化水平明显降低。结论替米沙坦可明显减轻大鼠血管内膜剥脱术后血管内膜增生程度,抑制血管损伤后粘着斑激酶表达与活化。替米沙坦的抗血管损伤性重塑作用可能与抑制粘着斑激酶表达与活化有关。

摘要:目的探讨高血压患者长期服用氨氯地平对动脉弹性及左心室肥大的影响。方法观察76例坚持服用氨氯地平治疗36月高血压病患者,分别在治疗前后用动脉弹性功能测定仪检测动脉弹性,用超声心动图检测左心室质量指数。结果治疗后小动脉弹性指数(3.80±2.09mL/Pa)较治疗前(2.60±0.77mL/Pa)显著增加(P<0.01);治疗后左心室质量指数(131.7±24.3g/m2)较治疗前(147.3±26.8g/m2)明显降低(P<0.01)。结论钙通道阻滞剂氨氯地平在平稳降压的同时,能恢复受损的动脉血管弹性,改善血管功能,减轻甚至逆转左心室肥大。

摘要:目的观察亚莫利治疗12周前后血糖、糖化血红蛋白、血脂、纤溶活性和胰岛素抵抗改善情况。方法初诊2型糖尿病患者33例,于入院后禁食8～12h行口服葡萄糖耐量试验,分别于试验前和口服葡萄糖后2h、用葡萄糖氧化酶法测空腹血糖和餐后2h血糖、以及糖化血红蛋白、酶法测血脂、放射免疫法测胰岛素水平、发色低物法测组织型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂1水平,胰岛素抵抗用Homa-IR表示。结果亚莫利治疗后患者血糖达到良好控制,糖化血红蛋白从治疗前8.6%±3.1%降至7.1%±1.6%(P<0.01),且未见明显低血糖。治疗后血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯均较治疗前明显降低,高密度脂蛋白胆固醇有明显升高(P<0.01)。纤溶活性在治疗后获得显著改善,组织型纤溶酶原激活物从治疗前0.225±0.113kIU/L升高至0.457±0.177kIU/L(P<0.01)。纤溶酶原激活物抑制剂1从治疗前0.898±0.168kAU/L降至0.533±0.215kAU/L(P<0.01)。胰岛素抵抗指标Homa-IR也较治疗前明显降低,治疗前为4.11±0.85,治疗后为2.42±0.91(P<0.05)。结论对初诊2型糖尿病患者,亚莫利具有快速稳定控制血糖、改善脂质代谢和显著减轻胰岛素抵抗的作用,改善组织型纤溶酶原活性的作用。

摘要:目的探讨C型钠尿肽(C-type natriuretic peptide,CNP)在血管钙化中的作用。方法用肌注维生素D3和尼古丁灌胃诱导大鼠血管钙化(VDN组大鼠),背部皮下埋泵CNP[500ng/(kg.h)]持续释药4周。进行Von Kossa染色、钙含量及碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性测定。放射免疫法测定血浆和血管组织CNP含量;半定量RT-PCR方法测定血管CNP、钠尿肽受体(NPR-B、NPR-C)及骨桥蛋白(osteopontin,OPN),基质γ-羧基谷氨酸蛋白(matrix Gla prot....

摘要:目的探讨原发性高血压患者缺血性脑血管病与颈动脉粥样硬化及碱性成纤维细胞生长因子之间的关系及临床意义。方法采用惠普彩色多普勒仪测定颈动脉,观察颈总动脉、颈内动脉和颈动脉分叉部的图像。采用酶联免疫吸附试验方法测定外周血中碱性成纤维细胞生长因子。结果与高血压不伴缺血性脑血管病组比,高血压伴缺血性脑血管病组碱性成纤维细胞生长因子水平(364.5±91.0mg/L比283.4±91.2mg/L)、软斑检出率(92.3%比52.4%)和右侧颈内动脉收缩期峰值流速(57.65±7.34mm/s比52.41±7.97mm/s)均显著升高(P<0.05或0.01);软斑组碱性成纤维细胞生长因子水平比硬斑组明显升高(319.7±93.6mg/L比252.2±77.9mg/L,P<0.05)。结论碱性成纤维细胞生长因子和动脉粥样硬化斑块的形成在高血压缺血性脑血管病的发生发展过程中起重要作用,对判别高血压病变的程度、预防脑梗死提供了重要依据,有利于临床采取正确的干预治疗措施。

摘要:主动脉夹层分离起病急骤,病情凶险,病死率高,一周内死亡率达50%,早期诊断和治疗是降低病死率的关键。1临床诊断线索1.1特征性疼痛是最有意义的症状。90%有疼痛症状,往往为剧烈撕裂样或炸开样痛,难以忍受,吗啡难以止痛,常可波及心前区、胸骨后、腹部、腰部,且有移动趋势。1.2高血压:90%的病人伴有高血压或有高血压病史。有颜面苍白、皮肤湿冷、焦虑不安等休克表现,而血压下降轻微,不降或升高为另一显著特征。1.3低血压或休克时,?...

摘要:目的回顾性分析110例无症状性脑梗死老年患者的诊断及危险因素。方法对280例60岁以上有短暂性脑缺血发作史或有眩晕、头痛而无明确卒中史患者行CT、MRI检查,并做危险因素调查分析。结果190例CT检查查出无症状性脑梗死78例,90例MRI检查出无症状性脑梗死32例,高血压、高血糖、高血液粘稠度、高龄、高脂血症为其重要的危险因素。结论老年无症状性脑梗死患者发病率高,高危因素较多,应引起临床重视。

摘要:目的为了解刺五加注射液治疗脑梗死的临床疗效。方法64例脑梗死患者随机分为治疗组和对照组。治疗组用刺五加注射液静脉点滴,疗程为15天,对照组用丹参静脉点滴,疗程30天,两组同时控制血压、血糖、血脂。结果治疗组32例中,有效30例,总有效率为93.75%,对照组32例中,有效24例,总有效率为75%。两者疗效差异具有显著性(P<0.05)。结论刺五加注射液治疗脑梗死安全、有效,适合于基层单位使用。

摘要:目前认为冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronaryatherosclerotic cardiopathy,CAC)有明显的遗传倾向,发病具有家族聚集性,与家族性高脂血症、有遗传倾向的危险因素和家庭的生活习惯有关。本文通过分析共患严重CAC同胞兄弟3人的发病特点,从分子水平探讨该病的发病机制。1对象与方法以2003北京市安贞医院动脉粥样硬化门诊收治的患CAC的兄弟3人为研究对象,采用下述方法来进行研究:①临床资料收集;②化验血脂、血糖及肝肾功能;③提取DN....

摘要:家族性高胆固醇血症(FH)是一种严重的常染色体单基因显性遗传性疾病,血浆胆固醇大幅增高、皮肤黄色瘤和早发冠心病为其典型临床特征。FH的主要病理基础是低密度脂蛋白受体(LDLR)基因突变。新近发现FH具有遗传异质性,多种基因的变异均可导致FH样临床表型。本研究对一临床诊断为FH但未检测到LDLR和载脂蛋白B基因突变的先证者进行枯草溶菌素转化酶9(PCSK9)基因突变分析,以发现新的致病基因突变。1对象与方法1.1研究对象先证者,女,1....

摘要:家族性高胆固醇血症(FH)是一种严重的常染色体单基因显性遗传性疾病,临床特点为血浆胆固醇大幅增高、特征性黄色瘤和早发冠心病,同时具有阳性家族史。低密度脂蛋白受体(LDLR)基因突变是引起FH最主要的原因。本研究对一临床诊断为纯合子FH先证者及其父母进行基因突变分析,以从分子水平探讨其发病机制。1对象与方法1.1研究对象先证者系女性,肘、膝、踝关节等处有黄色瘤,双眼有明显角膜弓,心绞痛频繁发作。收集先证者及其父母空腹1....

摘要:家族性高胆固醇血症(familial hypercholester-olemia,FH)是一种较为常见的常染色体显性遗传病,其主要特点为血浆胆固醇水平极度增高,多部位皮肤肌腱黄色瘤和过早发生冠心病,严重者青少年时期发生心肌梗死甚至死亡。本研究对临床确诊为纯合型家族性高胆固醇血症两姐妹进行聚合酶链反应—单链构象多态性(PCR-SSCP)结合银染技术、核苷酸序列分析低密度脂蛋白受体(lowdensity li-poproteinrdceptor,LDLR)基因致病突变,以期探讨其分....

摘要:近年来研究发现,急性冠状动脉综合症病人血清中可检测到肺炎衣原体、支原体、巨细胞病毒等病原微生物和C反应蛋白、白细胞介素、选择素、炎症标记物等;动脉粥样硬化(As)具有变质、渗出和增生等炎症性疾病的病理特征;应用他汀类药物治疗可有效减少心血管事件,提示动脉粥样硬化不是单纯的动脉壁脂质堆积的疾病,而是一种进展性炎症性疾病。1免疫机制1.1细胞免疫与动脉粥样硬化研究证实,动脉粥样硬化斑块中有大量炎性细胞浸润,血管?...

摘要:A20 was originally characterized as a TNF-inducible gene in human umbilical vein endothelial cells. As an inhibitor of NF-kappaB signaling, A20 could protect apoptosis, inflammatory and cardiac hypertrophy. We investigated the role of A20 on acute myocardial infarction (MI), ox-LDL-induced apoptosis in macrophage, and vascular remodeling. (1)We investigated the role of constitutive human A....

摘要:C-reactive protein (CRP) is not only a predictor of cardiovascular events but also may be a new potential risk factor for the development of atherosclerosis. More recently, a number of studies using cultured cells showed that CRP can directly induce many cellular changes including the enhancement of cytokine and matrix metalloproteinases (MMP) production, cholesterol uptake by macrophages, ....

摘要:近30年来糖尿病患病率在多数欧美和亚洲国家中迅速增高。糖尿病心血管并发症是糖尿病患者的主要死亡原因,其发生机制不甚明了。糖尿病有关的代谢因素增加循环和组织中氧化和糖化蛋白或脂蛋白的水平和氧化应激性。这些改变可引起动脉粥样硬化,凝血因子和血小板活性增高,纤溶活性减低,进一步导致血栓形成和急性组织缺血。纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)是一种急性反应物和炎症介质。血浆PAI-1增高被认为是一个内皮细胞功能失调的标....

摘要:在正常生理情况下,血管内皮结构完整、功能正常,一方面通过屏障作用阻止低密度脂蛋白(lowdensity lipoprotein,LDL)等大分子物质和单核细胞等血液细胞成分进入动脉内膜,另一方面又通过产生前列腺素(PGI2)等活性因子发挥抗凝、抑制平滑肌细胞增殖等多种功能。血液中大量LDL在内皮下的沉积导致内皮细胞损伤、单核细胞浸润、血小板粘附聚集、刺激血管平滑肌细胞向血管内膜迁移与增殖,巨噬细胞吞噬脂质而形成泡沫细胞,逐渐发展成动?...

摘要:自载脂蛋白E基因敲除小鼠问世以来,已成为研究脂代谢和动脉粥样硬化最为常用的模型。到目前为止,各种基因敲除和转基因小鼠在研究血浆脂蛋白谱和主动脉病变方面做出了巨大的贡献。尤其是LDL受体(LDLR)敲除小鼠,作为人类中引起动脉粥样硬化最常见的疾病-家族性高胆固醇血症的动物模型,其血浆LDL可以通过调整食物中胆固醇含量而控制在不同水平,从而诱发出与人类病变更为相近的血管病变。在这两种小鼠模型基础上,通过杂交,不同的转....

摘要:免疫细胞介导的炎症反应参与了动脉粥样硬化发生、发展的多个环节。如淋巴细胞、单核细胞的粘附、聚集和内膜下浸润;巨噬细胞、淋巴细胞的激活,释放炎症细胞因子,趋化因子;以及泡沫细胞的形成等。高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症是心血管疾病发病的一个独立危险因子,我们以前的研究表明高同型半胱氨酸血症促进动脉粥样硬化的早期发病。以高Hcy饮食喂养载脂蛋白E-/-小鼠4周,小鼠的主动脉上斑块明显增多,主动脉根部斑块的泡....

摘要:大量资料证实,脂代谢紊乱不仅是动脉粥样硬化、冠心病、脑卒中、糖尿病并发症、代谢综合症等人类重大疾病的主要危险因素,机体其他各系统的许多重要疾病也都与其密切相关,已成为人类健康的最大威胁。虽经百余年的探索,其发病机理仍不十分清楚,现已公认是由多基因、多因素导致的一类复杂性病理过程。因此,需要从不同角度、不同层次进行系统、深入研究并通过综合分析才能对其有一个较为全面的了解。随着功能基因组学、蛋白质组和?...

摘要:内皮祖细胞(EPC)可以分化为成熟内皮细胞(EC)并参与新生血管形成,但是关于影响内皮祖细胞分化的机制目前尚不清楚。AMP激活的蛋白激酶(AMPK)能够增加内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的激活从而增加一氧化氮(NO)的产生及其生物活性,本项研究目的旨在探讨AMPK在人EPC分化中的重要作用及其机制。分离人脐带血来源单个核细胞,应用改良的EPC条件培养基培养4～6周后,进行EPC特异表面标记物CD34和VEGFR2的表达鉴定,同时检测其摄取乙酰化低密?...

摘要:参加国际比对是标准化工作的重要组成部分,其目的是保持国际间分析结果的可比性。目前HDL胆固醇和LDL胆固醇无一级参考物质,也无一级参考测量过程或决定性方法,主要是因为血清不同脂蛋白之间没有明确的界限,其理化性质存在一定重叠,定义和准确测定脂蛋白胆固醇非常困难。因此参加国际比对对HDL胆固醇溯源更为重要。HDL胆固醇比对的两种主要方式是应用参考物质(美国疾病控制与预防中心—国家心肺血液研究所血脂标准化计划,CDC-NH....

摘要:心脏和脑组织血流减少或暂停,导致心脑组织缺氧,对心脏和脑造成进一步的损伤。对于缺氧这一病理生理刺激,机体通过适应性的变化调节机制维持自身的稳定。其中,缺氧激活的缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)是目前为止发现的唯一的一个特异性缺氧状态下发挥活性的转录因子。HIF通过调节一系列靶基因来调节血管舒张和新生血管生成、红细胞生成和抗炎症反应,从而改善心脑组织缺氧和损伤。缺氧诱导因子(HIF-)1是由HIF-1α?...

摘要:糖尿病微血管病变是糖尿病多种并发症的病理基础,也是糖尿病预后的决定性因素,主要包括糖尿病视网膜病、糖尿病肾病、糖尿病神经病变及糖尿病心肌病变等。目前研究的热点主要涉及两方面,即糖基化终产物及其信号通路在糖尿病病变发生中的作用、微血管内皮细胞的功能改变与糖尿病血管病变的发生。本文就上述两方面的研究进展作一综述,并介绍本研究室的相关研究结果。

摘要:动脉粥样硬化性心脑血管疾病是危害人类健康最主要的杀手之一。一般认为,动脉粥样硬化(As)是一种巨噬细胞和淋巴细胞对侵入动脉壁的病原性脂蛋白所产生的炎症反应,最早肉眼可见的病变是脂纹的形成,其主要成分是大量摄取脂质后从巨噬细胞所衍变成的泡沫细胞。研究认为,脂质在巨噬细胞中的大量积聚主要由清道夫受体介导。在众多的清道夫受体中,A类清道夫受体是目前公认的介导氧化型低密度脂蛋白进入细胞的主要受体之一。因此,通过....

摘要:在本课题组和其它学者有关研究的基础上,本文提出一个新的假说:各种造成内皮细胞损伤的危险因素激活动脉外膜成纤维细胞,成纤维细胞被激活的表现为:①呈现增生样改变;②分化为肌成纤维细胞表型并向血管内膜迁移;③合成和释放细胞外基质成分增多;④合成和释放促炎性细胞因子。外膜成纤维细胞的激活促使动脉粥样硬化(As)早期病灶的形成。本假说为从血管外膜用药和从外膜进行基因疗法治疗血管疾病提供了理论依据。传统上认为血管外....

摘要:动脉粥样硬化是心肌梗死和脑梗死的主要病因,其发生机理尚未完全阐明,普遍认为,各种诱发因素使来源于血液和坏死细胞的脂质被大中动脉中膜的平滑肌截留在内中膜之间并在此聚积,当这些脂质含量超过局部细胞的消化能力时,诱发动脉壁损伤和慢性炎症,导致脂质条纹、纤维斑块和复合病变等病理变化,造成血管狭窄、器官缺血坏死,并可能由于斑块破例,引起栓塞。但初期斑块特别是脂质条纹是可以逆转的,主要机制有:(1)控制和治疗易患因素,....

摘要:正常血压产生的剪切力(shear stress)和牵张力(stretchstress)对机体发育、细胞分化及组织器官表型的维持是必需的。而高血压引起的异常生物机械力对于血管细胞增殖、凋亡、迁移、肥大、分化和炎症反应等起着十分重要作用,可导致严重的心血管重塑,是临床上死亡的主要原因之一。然而,至今仍无报道显示血管细胞是否存在特异性机械力受体以及细胞外机械力信号是如何被介导入胞内导致细胞的结构和功能改变。利用我们已建立的体内、?...

摘要:高甘油三酯血症(hypertriglycerolemia,HTG)在动脉粥样硬化的发生发展中起着十分重要的作用,是心血管病的独立危险因素,还与代谢综合症、糖尿病等相联系。HTG的发生机制尚未完全阐明。研究表明,HTG是典型的多基因、多因素疾病,其发生既有遗传因素作用,也有环境因素的作用,前者如甘油三酯代谢相关基因的变异,后者如膳食的结构及量的影响。近年来,人们又把更多的注意力集中在遗传因素与环境因素的相互作用在HTG发生的意义上。由于心血管病多发生在中老年人,人们在研究遗传因素和/或遗传因素在HTG发生中的作用时,更多地关注中老年人,在青年人中的研究较少。而遗传因素和/或遗传因素在青年人HTG 更多还原

摘要:背景与目的Intermedin(IMD)是2004年发现的降钙素基因相关肽超家族的新成员,具有舒张血管、降低血压和增强心肌收缩力的作用。本工作在整体大鼠血管钙化模型上观察内源性IMD及其受体系统的变化及外源性IMD对血管钙化的影响。方法用尼古丁灌胃和肌肉注射维生素D3的方法建立了大鼠血管钙化模型,原子吸收分光光度法测定组织和细胞钙含量,vonKossa染色鉴定钙结节。实时聚合酶链反应检测IMD及其受体—降钙素受体样受体和受体活性修饰....

摘要:目的研究不同饮食条件下在肝脏中过表达肝X受体α的对机体脂代谢的影响。方法本研究分别给予正常饮食和高脂喂养C57小鼠9周后,经尾静脉注射腺病毒载体过表达肝X受体α和nSREBP1c,一周后观察小鼠的血糖、血脂、胰岛素水平和糖耐量改变,以及肝脏中脂质变化和糖、脂代谢相关基因的表达,并在离体给予肝X受体α的内源性配体22-OH胆固醇以及通过腺病毒单独或共同过表达肝X受体α,观察其基因表达的改变。结果(1)高脂饮食可使糖耐量减低....

摘要:背景和目的稀土主要有镧(La)、铈(Ce)、镨(Pr)等17种元素组成。实验发现稀土元素镧具有类似于钙的化学性质,被称为“超级钙(Super calcium)”,是有效的细胞钙结合位点的竞争剂,与钙相比,这种结合的可逆性较小,镧可选择性的在细胞膜位点上代替或取代钙离子,从而阻止钙内流和外流。本研究在大鼠血管钙化模型上观察醋酸镧[La(Ac)3]对血管钙化的影响,以探讨镧在血管钙化发病中的保护作用及其可能机制。方法采用尼古丁灌胃和维生素D3....

摘要:背景与目的肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)是由52个氨基酸残基组成的调节循环系统功能稳态的多功能肽。本工作观察高脂膳食载脂蛋白E-/-小鼠动脉ADM及其受体系统—降钙素受体样受体(calcitonin receptor-like receptor,CRLR)和受体活性修饰蛋白(receptor activity modifying proteins,RAMP)的变化及外源性ADM对高脂膳食载脂蛋白E-/-小鼠动脉动脉粥样硬化的作用。方法17周龄载脂蛋白E-/-小鼠喂饲高脂膳食4周,皮下包埋渗透泵持....

摘要:目的研究洛伐他汀对内皮祖细胞分化的影响机制。方法密度梯度离心方法分离人脐带血单个核细胞,将其接种于人纤连蛋白包被的培养板上,添加生长因子的M199培养基培养。培养20d后,使用免疫荧光及流式细胞技术鉴定EPC的表面标志物CD34、CD133和VEGFR2的表达,以及其摄取乙酰化LDL和结合荆豆凝集素的能力,经鉴定后,采用黏附实验,Matrigel成管实验,及Western blot检测方法观察洛伐他汀对内皮祖细胞(EPC)分化的影响。结果不同浓度的洛伐....

摘要:背景与目的肝细胞核因子4(hepatocyte nuclear factor4,HNF4)是高度保守的孤儿受体家族成员之一。它可通过募集其它分子,并与其反应元件作用调节相关基因,进而影响组织分化,糖、脂及胆汁酸等物质的代谢。HNF4的突变可诱发1型青少年发病型成人糖尿病(MODY1)。既往的研究显示在HepG2细胞中胰岛素可上调甾醇反应元件结合蛋白2(SREBP2),但抑制HNF4的表达,然而HNF4在糖尿病模型中的表达和整体动物肝脏中的调节情况尚不清楚。方法与结....

摘要:背景与目的在动脉粥样硬化和再狭窄等疾病中,基质金属蛋白酶直接参与了血管平滑肌周围基质的降解和重塑,从而影响到平滑肌的迁移和增殖,对于动脉粥样硬化和再狭窄的发生起着关键性的作用。ADAMTS-7是作者新发现的一种金属蛋白酶,属于ADAMTS(含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶;a disintegrin and metalloproteinase withthrombospondinmotifs)家族中的一员。我们以往的研究证实ADAMTS7可以降解血管外基质蛋白软骨?...

摘要:背景与目的家族性高胆固醇血症(FH)容易导致早发性冠心病,在中国人群中发生率约为1/500,和欧美及日本大致相同。已经有大量证据表明FH病人发生冠心病,低密度脂蛋白的增高扮演了重要角色。但是另一类重要的脂蛋白,高密度脂蛋白(HDL),特别是它的亚组份,由于缺乏方便可靠的检测方法,和FH的关系没有得到充分理解。HDL是冠心病的强烈危险因子已经得到证明。在HDL亚组份中,大颗粒(HDL2a、HDL2b和HDL3a)和冠心病的发生和严重程度成负相....

摘要:背景与目的反复发作的胰腺炎作为严重的高甘油三酯血症的并发症常见于脂蛋白脂肪酶(lipoproteinlipase,LPL)或载脂蛋白CII基因突变导致的I型高脂血症病人。然而,胰腺炎和严重高甘油三酯血症导致急性胰腺炎的发病机理至今还没有明确。为了探讨LPL缺陷小鼠能否作为研究严重高甘油三酯血症和急性胰腺炎关系的合适动物模型,以及胰脂肪酶分解高浓度乳糜微粒中甘油三酯从而产生大量脂肪酸是否是急性胰腺炎的诱导因素,我们对此动物模型....

摘要:目的研究饮食中胆固醇含量在高脂肪饮食诱导严重高甘油三酯血症过程中的作用。方法雄性仓鼠分为STZ组和对照组。注射STZ9天后从STZ组筛选出血糖大于200mg/dL的个体再分为三组,分别喂饲普通饲料、高脂高胆固醇饲料(HF1)和高脂正常胆固醇饲料(HF2)。对照组也分为三组分别喂饲以上3种饲料。每周检测血糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平。结果注射STZ后血糖升高并维持在300～500mg/dL。在高脂饮食4周时....

摘要:目的内皮脂酶(endothelial lipase,EL)是新近发现的一种脂肪酶,它与肝脂肪酶(HL)、脂蛋白脂肪酶同属于甘油三酯脂肪酶基因家族,参与高密度脂蛋白(HDL)的代谢。本研究旨在观察高胆固醇饮食对小鼠肝脏EL mRNA表达的影响,并同时检测小鼠血脂水平的改变,研究EL mRNA表达水平与血脂的关系。方法选择40只小白鼠,随机分为正常饮食组(n=20)和高胆固醇饮食组(n=20),共喂养6个月。于喂养前、3个月和6个月时分别测体重,检测血浆总胆固醇(TC....

摘要:背景与目的糖尿病是因胰岛素分泌或功能缺陷引起的内分泌代谢病,多伴有脂代谢紊乱。临床常见血清甘油三酯(VLDL)升高、也有胆固醇(LDL)升高,降低血脂可有效延缓糖尿病及并发症的发生。胰岛B细胞损伤是糖尿病发生发展过程中的重要环节,高水平LDL/VLDL对B细胞功能与活性的影响及其作用机制目前在国内还鲜有报道。本文应用不同浓度的LDL/VLDL作用于体外培养的胰岛B细胞,探讨脂蛋白对B细胞损伤的作用机制,同时对氧化应激反应可能在?...

摘要:建立参考系统和参加标准化计划(国际比对)是标准化工作的两个主要内容。我们在建立胆固醇参考系统的同时,近年来也参加了国际上几个主要的胆固醇测定比对。现简要介绍比对计划和结果。1、美国疾病控制与预防中心-国家心肺血液研究所血脂标准化计划(CDC-NHLBI-LSP):该计划是国际上历史最长、影响最大、使用参考物质的标准化计划,分3阶段:①申请者的分析质量对CDC血清有无基质效应。②评价申请者血脂分析的精密度和准确度及维持分....

摘要:脂蛋白(a)是由类似于LDL的脂蛋白和载脂蛋白(a)组成的一种特殊脂蛋白,脂蛋白(a)水平升高是心血管病的重要危险因素。目前绝大多数脂蛋白(a)测定方法是以载脂蛋白(a)为抗原、用免疫法测定脂蛋白(a)总质量。但是,由于脂蛋白(a)中载脂蛋白(a)分子大小的高度不一致性、脂蛋白(a)中蛋白组成的不同、载脂蛋白(a)与纤溶酶原的同源性等,脂蛋白(a)的免疫测定存在很多问题,实验室间结果可比性差,标准化难度很大。测定脂蛋白(a)胆固醇[脂蛋....

摘要:高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)均非单一的脂蛋白颗粒,按颗粒大小,HDL可大致分为HDL2和HDL3,LDL分为LDLa和LDLb。大量研究显示,HDL和LDL亚类可能是比HDL和LDL更有效的心血管病危险预示指标。测定HDL和LDL亚类的方法有多种,但定量不够准确、不同方法结果缺乏可比性。脂蛋白(a)是由类似于LDL的脂蛋白和载脂蛋白(a)组成的一种特殊脂蛋白,脂蛋白(a)升高是心血管病的重要危险因素。目前绝大多数脂蛋白(a)测定是利用免疫学方法....

摘要:目的非甾体类抗炎药物阿司匹林对氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlow densety lipopreotein,ox-LDL)诱导血管内皮细胞炎症损伤的抑制作用。方法(1)ox-LDL的制备:取新鲜人血清用梯度离心法分离低密度脂蛋白,用5μmol/L硫酸铜氧化型低密度脂蛋白24h后,添加EGDA终止反应,透析后4℃保存供试验使用。(2)培养血管内皮细胞:取新生儿脐带分离脐静脉血管内皮细胞。培养基中含10%特级胎牛血清、内皮生长因子、抗生素等,取第三代～第五代的培?...

摘要:背景与目的卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)是循环中胆固醇酯化的主要酶,其功能和活性一直受到重视。研究LCAT活性的方法有多种,其中一种是测定高密度脂蛋白胆固醇酯化速率(FERHDL),目前FERHDL的测定方法是Dobiasova等建立的同位素示踪法。本研究采用高效液相色谱法测定血清FERHDL。方法首先向人新鲜全血样本中加入5,5’二硫双-2-硝基苯甲酸(DTNB),抑制LCAT活性,使血中的LCAT活性离体后仍然维持在体内水平。离心分离血清,制备高密....

摘要:目的研究冠心病患者血浆蛋白质差异表达谱,寻找可能与冠心病相关联的特异性标志蛋白群。方法收集来自中国中医科学院西苑医院和广安门医院经冠脉造影确诊的住院冠心病患者17例,门诊高脂血症患者17例以及健康志愿者18例,均为北京地区汉族人群,年龄在35～55岁之间,男女比例3∶2。所有研究对象清晨空腹采取静脉血2.0mL,立即分离出血浆,-80℃保存备用。采用GE公司pH3-10非线性IPG胶条在Ettan IPGPhor等电聚焦系统进行第一向分离后,?...

摘要:目的探讨中国北方汉族人群载脂蛋白A5基因-1131T>C位点、载脂蛋白C3基因-482C>T位点多态性对高脂血症患者血脂浓度的影响。方法应用聚合酶链反应—限制片长多态性技术对172例高脂血症患者和80例健康体检者载脂蛋白A5、载脂蛋白C3基因型进行分析,并对其血脂水平进行检测。结果高脂血症患者载脂蛋白A5-1131T>C位点C等位基因频率显著高于健康人(P<0.05)。该位点CC基因型患者TG水平较TT型患者明显升高,且高密度脂蛋白胆固醇显著降低....

摘要:目的探讨中国北方汉族人群载脂蛋白E基因第4外显子多态性对高脂血症患者血脂浓度及应证复方中药调脂通脉颗粒调脂疗效的影响。方法172例高脂血症痰瘀互阻证患者随机分为治疗组(调脂通脉颗粒)和对照组(血脂康胶囊),观察症状体征(积分)和血脂浓度的变化,应用聚合酶链反应—限制片长多态性技术进行载脂蛋白E基因型测定。结果调脂通脉颗粒调脂效果与血脂康相当,两组无显著差异(P>0.05),但在病人临床症状积分改善上应证方药调脂通脉?...

摘要:目的探讨普罗布考抗氧化、抗血小板制剂、阿托伐他汀联合用药对兔动脉粥样硬化病变的干预作用。方法新西兰雄性大白兔36只随机分为4组,分别给予正常及高脂饮食6周后高脂组再分为3组:高脂组、高脂+阿托伐他汀组[2.5mg/(kg·d)]、高脂+普罗布考(1.0/d)、氯吡格雷[5mg/(kg·d)]、阿托伐他汀[2.5mg/(kg·d)]联合干预组,继续喂养4周后,观察主动脉动脉粥样硬化斑块形成情况,分别采用HE染色和免疫组织化学染色观察斑块部位内膜病变程度....

摘要:背景与目的动脉粥样硬化(As)性疾病是发达国家的最主要死亡原因之一,血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)则具有抗As的作用。高效率的调控血浆HDL浓度在预防及治疗As中起着关键性作用,而ATP结合盒转运体A1是HDL形成过程中最重要的蛋白。普罗布考作为降血脂药已在临床应用20余年,虽具有抗氧化和抗As作用,但可降低HDL浓度,其机制不明。本文旨在探讨普罗布考在ATP结合盒转运体A1介导的HDL形成及特异性细胞脂质转运过程中的作用机制。方法....

摘要:目的观察注射用磷酸肌酸钠(商品名纳斯达欣,长春英联生物技术有限公司)治疗老年不稳定性心绞痛的疗效。方法将52例老年不稳定性心绞痛患者随机分为2组:对照组和治疗组。治疗组26例,男20例,女6例,年龄61～95岁,合并高血压16例,脑梗死10例,糖尿病Ⅱ型8例;对照组26例,男19例,女7例,年龄60～86岁,合并高血压17例,脑梗死9例,糖尿病Ⅱ型9例。对照组给予硝酸酯、钙拮抗剂和β-阻滞剂等,治疗组在对照组治疗基础上,加注射用磷酸肌酸钠1.0....

摘要:目的观察逐瘀通脉胶囊(三精千鹤制药)治疗急性缺血性心脑血管卒中的临床疗效。方法治疗组56例急性缺血性心脑血管卒中,30例为脑卒中,其中男18例,女12例,年龄66.7±5.8岁;26例为心卒中,其中男14例,女12例,不稳定型心绞痛20例,急性心肌梗死6例。对照组30例中,男16例,女14例,年龄65.2±4.9岁。其中急性脑梗死18例,不稳定型心绞痛10例,急性心肌梗死2例。对照组:急性脑梗死、不稳定性心绞痛和急性心肌梗死分别按我国有关指南标准治疗....

摘要:目的观察在常规治疗基础上加用磷酸肌酸和赖诺普利治疗冠心病充血性心力衰竭的临床疗效。方法将42例冠心病充血性心力衰竭患者随机分为2组:常规治疗组和观察治疗组。前者21例,男17例,女4例,年龄61～95岁;心功能Ⅱ级4例,Ⅲ级11例,Ⅳ级6例。后者21例,男18例,女3例,年龄60～95岁;心功能Ⅱ级3例,Ⅲ级12例,Ⅳ级6例。常规治疗组给予强心剂(洋地黄和非洋地黄)、利尿剂和扩张血管剂等治疗;观察治疗组在常规治疗组基础上,给予注射用磷酸?...

摘要:目的急性心肌梗死是动脉粥样硬化的终末病变,发病具有昼夜节律——早晨高发,这提示昼夜节律生物钟参与了这一病理过程。因此我们检测了动脉粥样硬化发展过程中生物钟基因、凋亡相关基因以及动脉粥样硬化相关基因的表达变化。方法应用载脂蛋白E基因敲除(载脂蛋白E-/-)小鼠建立动脉粥样硬化早期与进展期动物模型。应用实时聚合酶链反应、Westernblot与基因芯片等方法检测心脏与主动脉内膜钟基因、凋亡相关基因与动脉粥样硬化相关?...

摘要:目的探讨过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1α(peroxisome proliferators activated receptorγcoactivator1α,PGC-1α)基因Gly482Ser及Thr394Thr单核苷酸多态性(single nucleotide polimophism,SNP)与中国人冠心病易感性和脂质代谢之间的关系。方法构建一组病例对照模型,并选择两个该基因常见单核甘酸多态性位点Thr394Thr及Gly482Ser,应用聚合酶链反应限制性片长多态性技术,在342例冠心病患者和334例正常人之间进行多态?...

摘要:目的研究探讨载脂蛋白M多态性与冠心病的相关性。方法采用聚合酶链反应—限制片长多态性分析方法,对418例冠心病患者和372例健康对照者的载脂蛋白M基因启动子上游-855T>C单核苷酸多态性进行分析。利用PCR的方法获得的目的产物长度为231bp,PCR产物与限制性核酸内切酶Hae III经37℃温育过夜,用3%琼脂糖凝胶电泳分析,通过EB染色紫外灯下显色。酶切产物存在3种形式:231bp为TT纯合子,231bp、158bp和73bp共存的为TC型杂合子,158bp和73....

摘要:目的筛选与胞浆域相互作用的小分子多肽,研究这种多肽对A类清道夫受体功能的影响,以期研制出能够干预泡沫细胞形成的多肽。方法以A类清道夫受体胞浆域为靶标,运用亲和筛选噬菌体肽库的实验方法筛选与A类清道夫受体胞浆域特异性结合的多肽,对所获得的A类清道夫受体胞浆域特异性结合多肽进行测序。在体外,通过ELISA和GST-pull down分析,鉴定多肽与全长A类清道夫受体的相互结合。用人工方法合成A类清道夫受体胞浆域结合多肽,通过流....

摘要:目的建立稳定表达A类I型清道夫受体真核表达载体的人胚肾细胞——HEK293细胞系。方法构建pRc/CMV-A类I型清道夫受体真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入HEK293细胞,再用G418筛选稳定的细胞表达系。真核细胞中A类I型清道夫受体的表达分别用逆转录聚合酶链反应与Western blot方法检测。结果在转染并经G418反复筛选的HEK293细胞系中,细胞系明显表达A类I型清道夫受体的mRNA及其蛋白质。结论用pRc/CMV-A类I型清道夫受....

摘要:目的低密度脂蛋白(LDL)是血浆中胆固醇的主要载体,低密度脂蛋白受体(低密度脂蛋白受体)的生理功能是介导细胞对LDL的内吞,以满足细胞对胆固醇的需求并调节血浆胆固醇水平。LDL受体基因突变可因血浆中LDL清除障碍而导致高胆固醇血症,是最常见的单基因遗传病之一,称为家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)。修饰的单链DNA寡核苷酸(modified single-stranded DNAoligonucleotide,MSO)被证实可以较低频率地修复报?...

摘要:目的不同剪切力对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,hUVEC)表达基质金属蛋白酶9(maxtrix metallopro-teinase9,MMP-9)的影响,并明确其信号转导通路。方法采用原代培养hUVEC的方法,利用流室系统及灌流系统给hUVEC加载力,应用探针实时定量PCR方法检测mRNA的表达,应用胶原酶谱法检测MMP-9活性;以免疫印迹法检测蛋白表达。结果随着低剪切力作用时间的延长,MMP-9mRNA及其活性呈时间依赖性增加,MMP-9特异性抑....

摘要:目的总结21例70岁以上高龄(>70岁)患者行非体外循环下冠状动脉旁路移植术(Off-Pump Coronary Artery Bypass Grafting,OPCABG)围术期治疗经验。方法1998年12月至2007年5月期间21例>70岁患者行OPCABG,并与同期行OPCABG的<70岁患者(平均56.47±8.05岁)进行对比。结果>70岁患者中术后死亡1例,手术死亡率3.85%,其他患者恢复平稳出院。术后心房纤维颤动和脏器功能不全等并发症明显增多。结论>70岁患者行OPCABG结果良好,OPCABG有较多?...

摘要:目的克隆新西兰大白兔脂联素cDNA,体外表达脂联素蛋白质,探讨脂联素对动脉粥样硬化斑块的影响及作用机制。方法逆转录聚合酶链反应方法克隆兔脂联素cDNA并测序,采用pGAPZαPichia Expression Kit试剂盒体外表达兔脂联素蛋白质。体外构建携带脂联素基因调控的肿瘤特异性非增殖型腺病毒(Ad-APN),充盈球囊拉伤腹主动脉后辅以1%高胆固醇饲料喂养,构建动脉粥样硬化新西兰大白兔动物模型。高胆固醇喂养3月时,血管内超声检查,然后将实?...

摘要:目的观察脉心康及罗格列酮干预大鼠血管平滑肌细胞源性泡沫细胞中过氧化体增殖物激活型受体γ和ATP结合盒转运体A1mRNA表达的变化,以探讨脉心康对动脉粥样硬化泡沫化细胞形成的可能调控机制。方法采用组织贴块培养法培养血管平滑肌细胞,以氧化型低密度脂蛋白使其泡沫化,并以脉心康和罗格列酮分别进行干预。采用原位杂交技术观察过氧化体增殖物激活型受体γ和三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA表达的变化,并作统计学分析。结果与生理....

摘要:目的探讨内皮细胞功能紊乱在肝缺血—再灌注损伤中的作用及葛根素对其的影响。方法实验兔和肝癌手术患者均随机分为肝缺血—再灌注组(n=10和n=12)和肝缺血—再灌注+葛根素治疗组(n=10和n=12);分别取缺血前、缺血45min(兔)或25min(患者)和再灌注45min(兔)或25min(患者)共3个时相点,用放射免疫法测定血浆透明质酸,赖氏法检测谷丙转氨酶。结果肝缺血—再灌注期间,实验兔和肝癌手术患者血浆透明质酸、谷丙转氨酶明显升高,尤以再灌注....

摘要:目的探讨超杓型高血压与颈动脉内膜—中膜厚度的关系。方法采用动态血压监测法将高血压患者分为超杓型高血压组和杓型高血压组,高分辨率超声技术检测两组的颈动脉内膜—中膜厚度,比较两组检测结果。结果超杓型高血压组颈动脉内膜—中膜厚度大于杓型高血压组(P<0.05)。结论超杓型高血压患者颈动脉粥样硬化病变较杓型高血压患者更为明显。超杓型高血压与颈动脉内膜—中膜厚度的关系@林伟强$福建医科大学附属第二医院心内科$福建省....

摘要:目的Calphostin C是从Cladosporiumchadosporioides分离出来的具有多醌结构、作用于蛋白激酶C(PKC)调节区的特异性抑制剂,目前主要应用于乳腺癌等多药耐药性的临床治疗。已有的资料显示PKC活性的改变可能参与了细胞内脂质的蓄积和外排,在动脉粥样硬化长期演变的进程中具有潜在的药物开发价值。为此,本研究以荷脂THP1巨噬细胞为载体,以梯度Cal-phostin C为处理因素,观察细胞内脂质蓄积改变过程中相关基因、蛋白的表达情况,为筛选....

摘要:背景与目的血管扩张刺激磷蛋白(vasodilator-stimulated phosphoprotein,VASP)是一种肌动蛋白骨架调节蛋白,通过自身结构的三个功能区,构建了与粘附斑和胞内肌动蛋白丝的物理连接,在细胞迁移的信号通路中发挥重要作用。它有三个磷酸化位点Ser157、Ser239和Thr278,这些位点的磷酸化与其功能密切相关。本实验旨在探讨血管扩张刺激磷蛋白Ser157和Ser239位点的磷酸化对血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导的细胞迁移的影响及其作用差....

摘要:目的WAVE1蛋白是定位于细胞骨架的一种特殊的激酶A锚定蛋白(AKAP)家族成员,它能结合PKA并整合细胞外信号形成多价信号传导复合物,共同转移到细胞骨架的特殊位点,激活PKA来调节肌动蛋白骨架改变,从而调节细胞变形,移动等基本生物过程。本实验通过建立WAVE1稳定表达细胞株,探讨它对血小板源性生长因子诱导下细胞迁移的影响。方法(1)分别将真核表达载体pEGFP胆固醇1和重组质粒pEGFP胆固醇1/WAVE1通过脂质体转染至人ECV304细胞株,以....

摘要:目的目前国内外分离纯化人血浆纤溶酶原一般直接采用亲和层析法,但由于纤溶酶原与脂蛋白(a)的载脂蛋白(a)具有高度同源性,均含有多个能与赖氨酸结合的Kringle结构,因此用赖氨酸(Lys)亲和层析法不能将二者完全分开,得到的纤溶酶原常有载脂蛋白(a)的污染。本实验尝试建立一种快速、简单分离高纯度纤溶酶原的有效方法。方法采用多聚阴离子沉淀并结合Lys-Sepharose4B亲和层析法,分离纯化人血浆纤溶酶原。新鲜人血浆于0.4%磷钨酸钠、....

摘要:目的为探讨分泌粒蛋白Ⅲ(SecretograninⅢ,SgⅢ)和髓过氧化物酶在细胞氧化型低密度脂蛋白(LDL)中的可能作用,观察LDL对单核细胞SgⅢ基因表达及髓过氧化物酶酶活性的影响。方法采用密度梯度超速离心法纯化人血浆LDL,将生长良好的THP1单核细胞系无血清同步化后与100mg/L LDL共培养,吸光光度法检测培养基中共轭二烯和丙二醛的含量;作用9h后以逆转录聚合酶链反应法分别检测SgⅢ基因和髓过氧化物酶基因的mRNA的表达水平;作用24h后,以....

摘要:目的探讨重组人甲硫氨酸硫氧化物还原酶在体外是否对氧化的低密度脂蛋白和高密度脂蛋白有还原修复作用以及对氧化脂蛋白所致细胞损伤的保护作用。方法用含有人甲硫氨酸硫氧化物还原酶基因的重组质粒转化大肠杆菌E Coli M15(pREP4),经诱导表达、破菌、Ni-NTAAgarose亲和层析分离纯化目的蛋白,并检测其活性;采用两步密度梯度超速离心法纯化人血浆低密度脂蛋白和高密度脂蛋白;以AAPH、Cu2+体外氧化型低密度脂蛋白和高密度脂蛋白,应....

摘要:目的构建一种快速、系统检测与糖尿病相关的45个mtDNA位点的微阵列芯片。方法针对mtDNA的45个突变位点,采用Primer Premier5.0和NCBI BLAST软件设计野生型和突变型探针;将氨基修饰的探针,通过芯片点样仪点样于醛基修饰玻璃基片,并设立阳性、阴性和平行对照;以不对称聚合酶链反应方法制备单链靶序列,扩增的同时以Cy5染料标记DNA片段;42℃杂交3h后洗涤,Axon GenePix4000B芯片扫描仪阅读芯片,GenePix Pro4.0版软件和GeneSpring7.3?...

摘要:目的以往的研究发现,三七总皂甙(TPN)具有抑制和促进血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的双重作用,但至今对其作用机制十分不明。本研究旨在观察TPN对大鼠VSMC增殖的影响及经由何种信号通路介导。方法体外培养的大鼠VSMC给予TPN不同浓度作用一定时间或某一特定浓度不同作用时间,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)和蛋白印迹(Western blot)法观察了VSMC增殖的变化及c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化的变化。结果TPN能快速的激活JNK1/2,并呈时....

摘要:背景与目的糖尿病心血管并发症涉及血管系统和心脏实质器官的损害,但是目前糖尿病心肌病变的机制依然模糊。我们早期的研究显示:慢性炎症反应与糖尿病心肌病变之间有密切的关系,反映慢性炎症反应的促炎因子-巨噬细胞移动抑制因子(MIF)介导了动脉粥样硬化的炎症过程,而反映心脏功能的G蛋白偶联受体激酶(GRK2)参与了心力衰竭的病理过程。本研究旨在观察糖耐量异常时MIF与GRK2的表达,探索糖尿病心肌病变的可能机制。方法以成心肌细....

摘要:背景与目的主要由巨噬细胞和活化淋巴细胞分泌的巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)参与调节先天性和获得性免疫反应,并能抑制巨噬细胞游走,促进巨噬细胞在炎症局部浸润。研究表明,动脉粥样硬化时MIF合成增加。因此,有必要了解动脉粥样硬化斑块组织中MIF的表达情况,探讨MIF在动脉粥样硬化发生过程中的作用。方法雄性新西兰大白兔20只,随机分为2组,对照组和实验组各10只。对照组喂食基础饲料,实?...

摘要:目的众多研究资料表明,巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是体内一种重要的细胞因子和炎症介质,其在动脉粥样硬化发生中可能发挥重要作用。动脉粥样硬化中MIF能抑制巨噬细胞游走,促进巨噬细胞在炎症局部浸润,其过度调节可能在单核巨噬细胞的黏附、向内皮的迁移、聚集和转化形成泡膜细胞中起着重要作用,巨噬细胞中高浓度的MIF可能促进和增强动脉粥样硬化的过程。本研究旨在探讨肾素血管紧张素系....

摘要:目的研究新的缩血管活性肽尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)对大鼠主动脉外膜成纤维细胞迁移作用的影响及其细胞内信号机制。方法取雄性Wistar大鼠,分离主动脉外膜,采用贴块法培养外膜成纤维细胞;采用Transwell Chamber系统检测UⅡ对成纤维细胞迁移的影响。实验分组:(1)对照组,除细胞培养基外,无UⅡ和其它工具药加入。(2)UⅡ刺激组:向细胞培养基中分别加入10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L、10-7mol/L和10-6mol/L浓度的UⅡ。(3)UⅡ....

摘要:目的为进一步研究低密度脂蛋白浓度极化在人体血管中形成的特点以及低密度脂蛋白在血管局部是如何发挥作用的。方法用计算机对脂质浓度极化的发生特点和影响因素模拟分析,用微管吸吮技术研究了低密度脂蛋白对内皮细胞粘弹和粘附特性的影响,用平行平板流动腔分析内皮细胞在流场剪切力作用下的迁移特点。结果①低密度脂蛋白在侧壁分叉和对称分叉血管中均存在明显的脂质浓度升高的现象,且位于动脉血管分叉部位。在该处,血液的压力?...

摘要:目的为进一步证实和探讨LDL浓度极化在动脉粥样硬化局灶性中的作用。方法以狭窄血管远心端为研究对象,采用数值模拟及粒子图象测速法分别模拟和测定狭窄血管远心端流场分布及其特点;数值模拟及激光共聚焦显微镜分别模拟和测定狭窄血管远心端壁面LDL浓度分布;采用外科手术的方法于兔颈总动脉平直段套一硅橡胶环形成颈总动脉局部狭窄,在整体动物水平观察狭窄血管远心端LDL浓度极化对动脉粥样硬化发生发展的影响;在此基础上通过检?...

摘要:目的观察基质细胞衍生因子1受体CXCR4在低切应力诱导的动脉粥样硬化斑块中的表达,探讨CXCR4在动脉粥样硬化病变中的作用。方法建立颈总动脉套环的局部狭窄动物模型,喂养4周;数值模拟局部狭窄远心端流场以及剪切应力分布;酶法测定血浆中总胆固醇、甘油三酯以及HDL水平;HE染色观察局部狭窄远心端病理学改变,油红O染色观察病变处脂质的蓄积,免疫荧光观察病变处CXCR4的表达。结果4周后,兔血脂水平没有明显改变,但在局部狭窄远心端形....

摘要:目的载脂蛋白AI是高密度脂蛋白(HDL)中主要的蛋白质,它是细胞胆固醇逆向转运(RCT)的特殊重要因素。载脂蛋白AI能与磷脂,多种血浆因子及细胞膜受体结合,可以激活卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT),起着促进细胞内胆固醇的移出,酯化,转移,以及调节HDL代谢的作用。本研究旨在探讨载脂蛋白水平主要是载脂蛋白AI的水平对HDL亚类分布的影响。方法采用双向电泳-免疫印迹检测法分析了545例受试者血浆HDL亚类的组成及含量。应用在受试人群呈?...

摘要:目的探讨胆固醇对人肝细胞C反应蛋白基因表达的影响及其机制。方法分别以浓度为6.25、12.5、25.0和50.0mg/L的胆固醇作用人肝细胞L-02,采用逆转录聚合酶链反应法检测细胞中C反应蛋白mRNA转录情况;Western blotting检测细胞内C反应蛋白基因表达;免疫比浊法检测细胞培养液中C反应蛋白含量。用核因子κB信号通路阻断剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐干预胆固醇作用L-02细胞,比较核因子κB信号通路阻断前后C反应蛋白表达量的变化。用荧光分....

摘要:目的研究单核细胞趋化蛋白1诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的分子机制。方法培养并鉴定人脐静脉内皮细胞,用不同浓度单核细胞趋化蛋白1(0.1、1.0、10和100μg/L)分别作用人脐静脉内皮细胞24h、48h;用流式细胞技术及蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白Fas、Bcl-2和Bax的表达。结果胶原酶灌注消化收集细胞,胰蛋白酶-EDTA混合液消化传代可以获得满意的人脐静脉内皮细胞,血管性假血友病因子和KDR染色证实培养细胞为内皮细胞;单核细胞趋化蛋白1能....

摘要:目的观察具有抗氧化、抗炎和抑制血管增生的表没食子酸儿茶精-3-表没食子酸酯(简称表没食子酸酯)对载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块形成和Toll样受体4及单核细胞趋化蛋白1表达的影响,以探讨表没食子酸酯抗动脉粥样硬化形成作用的其他机制。方法50只4周龄雄性载脂蛋白E基因敲除小鼠,随机分成基础饮食+PBS对照组(n=6)、基础饮食+表没食子酸酯组(n=12)、高脂高胆固醇饮食+PBS对照组(n=7)、高脂高胆固醇饮食+表没食子酸酯?...

摘要:目的用低密度脂蛋白处理THP-1源性巨噬细胞后,检测低密度脂蛋白受体和PCSK9(proprotein convertase subtilisin/kexintype9)的表达并研究PCSK9与低密度脂蛋白受体之间的相关性。方法160nmol/L佛波酯孵育THP-1源性巨噬细胞24h,使其诱导分化成贴壁的巨噬细胞后,分别用0、10、20和30mg/L的低密度脂蛋白处理细胞,油红O染色检测细胞荷脂情况,免疫荧光检测细胞上PCSK9蛋白表达及分布情况,RT-PCR、Western blotting分别检测细胞上PCSK9....

摘要:目的为研究氨氯地平独立于降压外的血管保护作用,观察其对人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白1表达的影响,进一步明确其抗动脉粥样硬化作用的可能机制。方法用不同浓度氨氯地平预处理人脐静脉内皮细胞1h,与氧化型低密度脂蛋白共同孵育24h后,采用逆转录聚合酶链反应检测氨氯地平对体外培养的人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA表达的影响,酶联免疫试剂盒检测培养基中单核细胞趋化蛋白1活性。结果氧化型低密度脂蛋白上调人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白1的表达,各浓度氨氯地平处理组人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA与蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论氨氯地平呈浓度依赖性抑制氧化型低密度脂蛋白刺激导致的人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化蛋白1表达上调。

摘要:目的观察胆固醇转运复合物囊泡素1/环胞菌素A在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞荷脂过程中的表达变化及其与细胞内胆固醇蓄积的关系,进而探讨胆固醇转运复合物囊泡素1/环胞菌素A在动脉粥样硬化形成中的作用机制。方法实验采用75mg/Lox-LDL与RAW264.7巨噬细胞共同孵育48h,建立巨噬细胞荷脂化模型,并用普罗布考干预。Westernblotting和免疫荧光分别定量、定位检测囊泡素1/环胞菌素A的表达改变;免疫共沉淀检测囊泡素1/环....

摘要:目的观察中药雷公藤多甙对高脂血症家兔脂肪肝形成的影响并探讨可能机制,为研究治疗脂质代谢异常和脂肪肝提供新依据。方法22只雄性新西兰白兔随机分为3组。基础对照组(n=6):普通颗粒饲料喂养;高脂对照组(n=8):含1%胆固醇和5%猪油的高脂颗粒饲料喂养;雷公藤处理组(n=8):在饲以高脂饮食的基础上给予雷公藤1.5mg/(kg·d)。16周末结束实验。采用ELISA法测定血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平,处死动物后采用氯仿/甲?...

摘要:目的观察氧化型低密度脂蛋白和氧化型高密度脂蛋白对ECV304细胞膜上Toll样受体2、Toll样受体4受体表达的影响,及其受这两种脂蛋白刺激后ECV304对THP-1的趋化作用。方法用不同浓度的氧化型低密度脂蛋白和氧化型高密度脂蛋白孵育ECV304细胞,用RT-PCR的方法检测细胞Toll样受体2和Toll样受体4mRNA表达的水平,筛选出最适的浓度。用最适浓度处理ECV304内皮细胞24h后,用RT-PCR的方法检测细胞Toll样受体2和Toll样受体4mRNA表达的水平,用....

摘要:目的观察脂多糖和核因子κB抑制剂甲基磺酰苯丙氨酰氯甲酮(tosyl-phenylalanine chloromethyl-ketone,TPCK)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇流出和ATP结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响,以探讨脂多糖是否通过Toll样受体4-核因子κB途径影响ABCA1的表达。方法THP-1细胞经佛波酯诱导转化为巨噬细胞,再加入ox-LDL培养使其转化为泡沫细胞,实验分3组:未加处理因素的空白对照组,脂多糖单独处理组和脂多糖联合TPCK处理组。油红O染?...

摘要:目的在细胞和动物模型上,研究了调控β-catenin水平对血管平滑肌细胞分化增殖的影响。方法体外培养大鼠动脉平滑肌细胞,以过氧化体增殖物激活型受体(PPAR)γ激动剂—罗格列酮为刺激药物,观察细胞生长曲线、测定β-catenin及其上、下游基因GSK3β、cyclin D1的表达。另外,以高脂饮食喂养结合球囊导管拉伤内皮,建立兔动脉粥样硬化模型。将模型家兔分为对照组和给药组,测定各组动脉中膜平滑肌的增生程度以及β-catenin和相关上、下....

摘要:目的观察雷公藤多甙对新西兰兔主动脉粥样硬化病变的影响。方法24只新西兰兔随机分为基础组(普通饲料),高脂组(高脂饲料含胆固醇1%,猪油5%),药物组(雷公藤多甙),每组8只。药物组在高脂饮食8周后开始用药,方式为混入饲料中口服给予,剂量为1.25mg/(kg·d),时间为8周。实验16周后处死动物,采集血液,测量各组血清总胆固醇,高密度脂蛋白胆固醇,甘油三酯水平。每组取部分主动脉进行苏丹IV染色,剩余主动脉进行石蜡包埋,观察动脉粥样硬?...

摘要:目的血小板连接了炎症、血栓以及动脉粥样硬化形成,而它主要通过释放活性物质来发挥作用。其中血小板因子(plateletfactor4,PF4)被认为是一种促动脉粥样硬化的血小板分子。本实验主要探讨PF4对人脐静脉内皮细胞株表达Toll样受体2的是否具有调节作用。方法和结果免疫组织化学方法观察到高脂喂养的载脂蛋白E基因敲除小鼠小鼠粥样斑块表达PF4和Toll样受体2,两者均在斑块肩部和内皮细胞部位表达较为丰富。利用逆转录PCR和Western bl....

摘要:背景和目的本实验采用高果糖喂养雄性SD大鼠4周建立胰岛素抵抗(IR)大鼠模型,观察替米沙坦对IR的改善作用,研究替米沙坦对IR大鼠血清及血管壁炎性因子C反应蛋白(CRP)的影响,从而初步探讨替米沙坦对IR大鼠主动脉炎症反应的抑制作用,为血管紧张素受体阻滞剂(ARB)应用于临床防治与IR、2型糖尿病相关性的心血管疾病提供实验依据。方法①实验分为(每组24只SD大鼠)4组。对照组:普通饲料喂养12周,后8周给与等体积的生理盐水灌胃;替米沙?...

摘要:背景和目的动脉粥样硬化是糖尿病的严重及常见并发症。糖尿病的主要临床特点是血糖升高,而高糖可以刺激血管产生氧化应激,损伤内皮细胞,诱发动脉粥样硬化。探讨氧化应激产生的机制,抑制活性氧的产生,对于防止糖尿病并发动脉粥样硬化有十分重要的作用。NADPH氧化酶(NOX)是血管内皮细胞中活性氧产生的主要来源,而DPI是NADPH氧化酶的抑制剂。本文采用高浓度葡萄糖及NADPH氧化酶抑制剂DPI预处理后再加入葡萄糖来处理人脐静脉内皮细?...

摘要:目的观察丙丁酚对载脂蛋白E-/-小鼠主动脉粥样硬化斑块形成及主动脉凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达的影响,以探讨丙丁酚调节血脂以外的可能的抗动脉粥样硬化作用机制。方法将21只4周龄的雄性载脂蛋白E-/-小鼠随机分成基础饮食对照组、高脂饮食对照组和高脂饮食加丙丁酚组,每组7只。喂养14周后处死小鼠,检测血脂水平、肿瘤坏死因子α、白细胞介素β(TGF-β);从主动脉血管根部连续冰冻切片,油红0染色观察主动脉瓣处动脉粥样....

摘要:目的本文观察JAK抑制剂AG490对干扰素γ处理后的THP1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇流出和ATP结合盒转运体A1表达的影响。方法用160nmol/L的佛波酯诱导THP1细胞24h,使其贴壁并转化为巨噬细胞,在含有50mg/L氧化型低密度脂蛋白培养液中继续培养细胞48h使其转化为泡沫细胞,以不加任何处理因素的细胞作为空白对照,用干扰素γ单独或联合JAK抑制剂AG490处理细胞24h。油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况;液体闪烁计数法观察细胞胆固醇流出....

摘要:目的观察阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白诱导的THP1巨噬细胞脂质蓄积及CD36表达的影响。方法用50mg/L氧化型低密度脂蛋白与不同浓度(0μmol/L、0.312μmol/L、1.25μmol/L和5μmol/L)的阿托伐他汀共同孵育24h,空白组作为对照,用液体闪烁计数法检测细胞[3H]胆固醇流入情况,油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况,高效液相色谱分析法检测细胞内总胆固醇水平,逆转录聚合酶链反应与Western blotting分别检测THP1巨噬细胞CD36mRNA与蛋白?...

摘要:目的研究不同磷脂配比构成的脂蛋白rHDL-A1、rHDL-A2、rHDL-A3、rHDL-B1、rHDL-B2对J774巨噬细胞胆固醇转运的影响。方法取新鲜抗凝血浆,用超速离心法进行密度梯度离心,收集LDL、HDL3。将LDL置于含10μmol/L CuSO4的PBS溶液(pH7.2)中,37℃温育24h;氧化修饰后的LDL置含200μmol/L EDTA的PBS中透析24h。将POPC、CE、载脂蛋白AI和胆酸钠按不同比例混合反应生成脂蛋白,分别记为rHDL-A1、rHDL-A2、rHDL-A3、rHDL-B1和rHDL-B2。经氧化....

摘要:目的观察脂质转运阻断剂BLT4对小鼠腹膜巨噬细胞B类I型清道夫受体表达及其介导的胆固醇转运的影响。方法以载脂蛋白E-/-小鼠腹膜巨噬细胞+DMSO溶媒对照或+100μmol/L BLT4为I组、II组,具有相同遗传背景的C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞+DMSO溶媒对照或+100μmol/L BLT4为III组、IV组。逆转录聚合酶链反应、Western blotting检测B类I型清道夫受体mRNA转录和蛋白表达水平变化,高效液相色谱检测细胞内脂质蓄积情况,液体闪烁计数法检测胆....

摘要:目的通过构建人B类I型清道夫受体真核表达载体、使细胞瞬时过表达B类I型清道夫受体,观察其对肿瘤坏死因子(tumornecrosis factor,TNF)α和单核细胞趋化因子1(monocyte chemoattractant protein,MCP1)表达的影响,初步探讨单核—巨噬细胞B类I型清道夫受体抗动脉粥样硬化的作用机制。方法获得人B类I型清道夫受体cDNA,用聚合酶链反应的方法(上下游引物分别含有XbaI和KpnI限制性内切酶酶切位点)克隆人B类I型清道夫受体基因全长;用限?...

摘要:目的研究丙丁酚对高脂高胆固醇饲养的载脂蛋白E基因敲除小鼠和C57BL6/J小鼠血脂及动脉粥样硬化病变的影响,以及肝脏B类I型清道夫受体和PPARγ表达的变化。方法分别随机将20只载脂蛋白E-/-小鼠和20只C57BL6/J小鼠分为载脂蛋白E-/-高脂组和载脂蛋白E-/-高脂+0.5%丙丁酚组。动物喂养12周,摘眼球取血,采用酶比色法检测剂盒测定小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL胆固醇)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL胆固醇)的....

摘要:目的探讨氧化修饰高密度脂蛋白(oxidized high density lipoprotein,ox-HDL)对C57B/6J小鼠骨髓源性树突状细胞(bone marrowderived dendritic cells,BMDC)成熟活化的影响。方法制备C57BL/6J小鼠骨髓细胞悬液,利用动物树突状细胞专用分离液和细胞粘附性差异去除杂细胞,用rmGMCSF和rmIL-4使其分化为BMDC。经鉴定后,实验分为PBS阴性对照、HDL组(50μg/mL)、ox-HDL组(50μg/mL)和脂多糖(1μg/mL)阳性对照组。流式细胞术检测BMDC CD8....

摘要:目的探讨氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlowdensity lipoprotein,ox-LDL)对C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞(bone marrowde-rived dendritic cells,BMDC)趋化作用、成熟活化的影响。方法制备C57BL/6J小鼠骨髓细胞悬液,利用动物树突状细胞专用分离液和细胞粘附性差异去除杂细胞,rmGMCSF和rmIL-4使其分化为BMDC。实验分为PBS阴性对照组、LDL组(50mg/L)、氧化型低密度脂蛋白组(50mg/L)和脂多糖(1mg/L)阳性对照组。采用Transwell趋化?...