摘要:目的 观察microRNA-223(miR-223)对糖基化终产物(AGE)诱导人脂肪间充质干细胞(hADSC)凋亡和氧化应激的影响。方法 采用酶消化法分离培养hADSC,并应用流式细胞术对表面抗原CD14、CD34、CD45、CD90、CD105和人类白细胞抗原DR(HLA-DR)进行检测。将hADSC分为牛血清白蛋白(BSA)对照组、AGE修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)作用组、miR-223模拟物转染组、miR-223模拟物转染＋AGE-BSA组、miR-223抑制物转染组和miR-223抑制物转染＋AGE-BSA组。应用CCK-8法和TUNEL染色检测各组细胞存活率和凋亡率,Western blot检测Cleaved Caspase3蛋白表达水平,应用双氯荧光素(DCFH-DA)试剂盒检测各组细胞活性氧(ROS)含量。结果 流式细胞术检测结果表明,原代培养的hADSC高表达CD14、CD90和CD105,不表达CD34、CD45和HLA-DR。CCK-8法、TUNEL染色、Western blot和DCFH-DA法检测结果表明,与BSA对照组相比,AGE-BSA作用组hADSC凋亡率、miR-223表达水平、Cleaved Caspase3蛋白表达水平、ROS生成显著升高,而细胞存活率下降(P＜0.05)；与AGE-BSA作用组相比,miR-223模拟物转染能够进一步上调AGE-BSA引起的hADSC凋亡率、Cleaved Caspase3蛋白表达水平和ROS生成增加,下调AGE-BSA引起的hADSC存活率减少(P＜0.05)；与AGE-BSA作用组相比,miR-223抑制物转染能够抑制hADSC凋亡率、Cleaved Caspase3蛋白表达水平和ROS生成增加,拮抗AGE-BSA引起的hADSC存活率减少(P＜0.05)。结论 miR-223高表达能够促进AGE-BSA引起的hADSC细胞凋亡和ROS生成,其可能作为调控hADSC促进糖尿病创伤愈合的新靶点。

摘要:目的 探讨CD137-CD137L信号是否通过肿瘤坏死因子受体相关因子6/c-Jun氨基末端激酶/活化蛋白1(TRAF6/JNK/AP-1)途径调控小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)活化T细胞核因子c1(NFATc1)的表达。方法 采用组织块原代培养小鼠VSMC,第3～5代细胞用于实验。VSMC分为6组:对照组、CD137刺激组、CD137抑制组、siTRAF6干预组、siJNK干预组、siAP-1干预组。Western blot检测各组TRAF6、磷酸化JNK(p-JNK)、磷酸化AP-1(p-AP-1)、NFATc1蛋白表达水平。免疫荧光法检测各组TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1荧光表达。结果 (1)与对照组相比,CD137刺激组(CD137-CD137L信号激活)TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1蛋白表达水平明显升高(P＜0.05)；与CD137刺激组相比,CD137抑制组(CD137-CD137L信号抑制)TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1蛋白表达水平明显降低(P＜0.05)。(2)采用siRNA技术分别沉默TRAF6、JNK、AP-1后,与CD137刺激组相比,siTRAF6干预组TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1表达明显减少(P＜0.05)；siJNK干预组TRAF6表达无改变,而p-JNK、p-AP-1、NFATc1表达明显减少(P＜0.05)；siAP-1干预组TRAF6、p-JNK表达无明显改变,而p-AP-1、NFATc1表达明显减少(P＜0.05)。(3)免疫荧光检测显示:CD137刺激组TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1荧光表达量升高(P＜0.05)；CD137抑制组TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1荧光表达量明显降低(P＜0.05)；siTRAF6干预组、siJNK干预组、siAP-1干预组TRAF6、p-JNK、p-AP-1、NFATc1荧光表达量与上述蛋白表达结果一致。结论 CD137-CD137L信号可通过TRAF6/JNK/AP-1通路影响NFATc1的表达。

摘要:目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对高尿酸血症大鼠血管内皮炎症因子的作用。方法将36只雄性SD大鼠分为正常对照组、模型对照组、EGCG低剂量组、EGCG中剂量组、EGCG高剂量组、别嘌呤醇组,5周后,运用RT-PCR检测大鼠主动脉MCP-1、TNF-α、ICAM-1、ET-1及eNOS表达量,以及大鼠血清尿酸、肌酐、尿素氮和黄嘌呤氧化酶(XO)水平。结果 模型对照组大鼠的血尿酸和XO水平显著高于正常对照组(P＜0.01),EGCG各浓度组及别嘌呤醇组大鼠的血尿酸和XO水平与模型对照组相比较则有不同程度下降(P＜0.01)。模型对照组大鼠主动脉MCP-1、TNF-α、ICAM-1的mRNA表达量较正常对照组显著升高(P＜0.01),EGCG各浓度组和别嘌呤组大鼠主动脉TNF-α、ICAM-1的mRNA表达量与模型对照组相比显著下降(P＜0.01),EGCG高剂量组和别嘌呤组MCP-1 mRNA表达量与模型对照组相比显著下降(P<0.05)。EGCG中剂量组和别嘌呤组ET-1 mRNA表达量与模型对照组相比显著下降(P<0.05)。结论 EGCG干预可以降低高尿酸血症大鼠的血尿酸水平,同时减少血管内皮炎症因子的表达。

摘要:目的 探讨细胞外超氧化物岐化酶(EC-SOD)在同型半胱氨酸(Hcy)致巨噬细胞氧化应激中的作用及机制。方法 将THP-1单核细胞用佛波酯刺激48 h后演变成巨噬细胞,用0、50、100、200、500 μmol/L Hcy作用细胞72 h,并加设叶酸＋维生素B12(VitB12)干预组(100 μmol/L Hcy＋30 μmol/L叶酸＋30 μmol/L VitB12)。微板法检测氧化应激指标(H₂O₂、O₂－、OH－)的变化；实时荧光定量PCR检测巨噬细胞中EC-SOD的mRNA表达水平；Western blot检测巨噬细胞中EC-SOD的蛋白表达水平；EC-SOD测定试剂盒检测EC-SOD活性。分别构建EC-SOD重组质粒和干扰质粒转染细胞,检测EC-SOD的mRNA及蛋白的表达水平以及超氧阴离子的表达。结果 与对照组相比,100、200、500 μmol/L Hcy组H₂O₂、OH－活性显著增高 (P＜0.01),EC-SOD mRNA和蛋白表达明显降低(P＜0.01)。与对照组相比,100、200、500 μmol/L Hcy组EC-SOD活性分别下降了13.92%、8.62%、10.32%(P＜0.05,P＜0.01)。与100 μmol/L Hcy组相比,叶酸＋VitB12干预组EC-SOD mRNA的表达升高了47%。分别转染EC-SOD重组质粒和干扰质粒后,与100 μmol/L Hcy组相比,EC-SOD重组组O₂－含量降低了63.89%,干扰片段-596组O₂－含量则增加了33.59%(P＜0.05,P＜0.01)。结论 EC-SOD参与了Hcy导致的单核细胞源性巨噬细胞的氧化应激。在抑制Hcy诱导动脉粥样硬化的过程中,EC-SOD可能发挥着重要的作用。

摘要:目的 尝试构建人血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)基因双顺反子表达载体并检测其在293T细胞中的表达情况和生物学活性,为深入探讨LOX-1在动脉粥样硬化中的作用和以LOX-1为靶点建立干预机制治疗动脉粥样硬化奠定基础。方法 首先根据Primer5.0软件设计引物,采用聚合酶链反应法以LOX-1 cDNA片段为模板扩增LOX-1基因完整编码区,克隆至T载体,经测序成功后亚克隆到双顺反子真核表达载体pIRES2-AcGFP1-Nuc。利用脂质体转染法将双顺反子重组表达质粒转染至293T细胞,倒置荧光显微镜检测质粒转染情况。采用逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法鉴定LOX-1基因在核酸和蛋白水平的表达,采用激光共聚焦检测LOX-1基因在293T细胞膜上的表达,激光共聚焦和流式细胞术检测表达在293T细胞膜上的LOX-1结合氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)的生物学活性。结果 成功构建pIRES2-LOX-1双顺反子重组表达载体,将其转染293T细胞后,观察到绿色荧光蛋白基因的表达,初步表明LOX-1基因转染至293T细胞。进一步分子水平鉴定结果表明LOX-1基因在293T细胞核酸和蛋白水平均得到表达,激光共聚焦结果证明LOX-1基因在293T细胞膜上表达。最后激光共聚焦和流式细胞术结果证实表达在293T细胞膜上的人LOX-1基因可以结合氧化型低密度脂蛋白。结论 成功构建人LOX-1基因双顺反子表达载体,在此基础上证明其在293T细胞膜上得到表达,并且具有结合ox-LDL的生物学活性,为后续体外研究其在动脉粥样硬化中的作用以及以此为靶点建立干预机制奠定了基础。

摘要:目的 探讨不同浓度白藜芦醇对缺血再灌注大鼠神经功能损伤及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法 将150只健康成年雄性SD大鼠随机分成5组:假手术组、模型组(I/R组)、小剂量白藜芦醇(2.5 mg/kg)组、中剂量白藜芦醇(5 mg/kg)组、大剂量白藜芦醇(10 mg/kg)组,每组30只。模型组和白藜芦醇组在制作脑缺血再灌注损伤模型20 min前分别给予生理盐水或不同浓度白藜芦醇腹腔注射,术后6 h、24 h、48 h、72 h、7天时间节点分别评定神经功能缺损评分。应用四氮唑红染色(TTC)脑组织后计算脑梗死病灶体积并比较5组的差异；分别应用免疫组织化学检测缺血脑组织周边区组织的TNF-α表达量并比较5组的差异。结果 (1)模型组大鼠在缺血再灌注后各时间点均有神经功能缺损,白藜芦醇可改善神经功能缺损,剂量越大,改善越明显。(2)白藜芦醇干预各组大鼠的脑梗死体积显著减少(P＜0.05),呈显著剂量依赖性。(3)在各个时间点,各组大鼠缺血周边区脑组织的TNF-α阳性细胞数为:模型组＞小剂量白藜芦醇组＞中剂量白藜芦醇组＞大剂量白藜芦醇组＞假手术组(P＜0.05)。结论 (1)缺血再灌注脑损伤过程中,白藜芦醇能有效的保护大鼠脑神经细胞,减少脑梗死体积,改善神经功能缺损评分,这一作用可能是通过抑制TNF-α表达来完成的。(2)白藜芦醇对脑缺血再灌注损伤的保护作用与剂量相关,并且呈现显著剂量依赖性。

摘要:目的 探讨血管紧张素受体AT1相关的受体蛋白(APJ)激动剂Apelin-13对高血压性肾纤维化的影响及其机制。方法 12周龄雄性自发性高血压大鼠随机分为对照组、1 μg/(kg·d) Apelin-13组、10 μg/(kg·d) Apelin-13组、100 μg/(kg·d) Apelin-13组；Apelin-13通过尾静脉给药。测量大鼠24 h尿蛋白量、血清肌酐和尿素氮浓度。采用套尾法测量尾动脉收缩压,HE染色和Masson染色观察大鼠肾脏组织学改变,Western blot检测肾脏组织中自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62的表达。结果 与对照组比较,10 μg/(kg·d) Apelin-13组、100 μg/(kg·d) Apelin-13组以剂量依赖方式降低大鼠收缩压、24 h尿蛋白量、血清肌酐和尿素氮水平、肾脏损伤评分和胶原容积分数(均P＜0.05),减轻肾小管上皮细胞水肿,减少间质胶原沉积,降低肾间质纤维化程度。10 μg/(kg·d) Apelin-13组、100 μg/(kg·d) Apelin-13组也以剂量依赖方式增加大鼠肾脏组织中LC3-Ⅱ表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及Beclin-1表达,降低p62表达(均P＜0.05)。结论 Apelin-13抑制高血压性肾纤维化的进展,其机制可能与Apelin-13抑制细胞自噬有关。

摘要:目的 用冠状动脉CT血管成像(CTA)和冠状动脉造影(CAG)检查心肌桥-壁冠状动脉(MB-MCA),探讨MB-MCA的临床特征及其影像学指标与心肌缺血症状的相关性。方法 回顾分析我院近年来的MB病例,入选既经冠状动脉CTA又经CAG诊断的MB病例152例。按照有无动脉粥样硬化(As)分为单纯MB组、As并MB组；根据有无心肌缺血症状分为有症状组、无症状组。分析并比较各组临床特征及影像学资料。分析MB-MCA影像学指标与心肌缺血症状的相关性。结果 冠状动脉CTA对MB的检出率为11.4%,CAG对MB的检出率为10.1%,两者相近。152例MB-MCA特点:收缩期压缩程度为50.1%±10.5%,舒张期压缩程度为22.8%±10.5%；平均长度为18.2±11.5 mm,厚度为2.7±0.8 mm；最常见MB发生部位为左前降支(LAD)中段(60.7%)。As并MB组心肌缺血症状(典型胸闷等)发生率、活动平板运动试验阳性率明显高于单纯MB组(75.5%比58.7%,66.0%比43.5%,P＜0.001)。有症状组比无症状组MB更多分布于LAD中段(86.9%比68.9%,P＜0.001),更易合并As发生(74.8%比57.8%,P＜0.001)。Spearman相关分析显示,MB厚度、MCA收缩期及舒张期压缩程度与心肌缺血症状呈显著正相关。结论 冠状动脉CTA与CAG对MB的检出率相似。MB合并As患者的心肌缺血症状发生率、活动平板运动试验阳性率均高于单纯MB患者。MB患者心肌缺血症状与MB厚度、MCA压缩程度及As密切相关。

摘要:目的 探讨冠心病合并葡萄糖耐量受损(IGT)患者胰岛素抵抗(IR)与冠状动脉病变程度之间的关系。方法 152例冠心病并IGT患者及35例冠心病非IGT患者(对照组),采用HOMA2法测定IR指数(HOMA2-IR),采用Gensini积分系统定量评定冠状动脉狭窄程度,B₂/C型病变定义为冠状动脉形态学复杂病变。以HOMA2-IR四分位数为切点将冠心病并IGT患者分为4组:第1四分位数组(n＝38)、第2四分位数组(n＝38)、第3四分位数组(n＝38)、第4四分位数组(n＝38),比较5组基线资料及冠状动脉造影结果。结果 5组间餐后2 h血糖(2hPBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素和Gensini积分逐渐增高,差异有统计学意义(P＜0.01)。第4四分位数组多支病变和B₂/C病变明显高于第1四分位数组和对照组(P＜0.05)。相关性分析显示,Gensini积分与HOMA2-IR(r＝0.712,P＜0.001)存在较强的正相关。多元逐步回归分析显示,HOMA2-IR、HbA1c和2hPBG是影响冠状动脉狭窄程度的独立危险因素。Logistic回归分析显示,HOMA2-IR是多支病变和B₂/C病变的独立危险因素。结论 IR是反映冠心病并IGT患者冠状动脉狭窄程度的重要指标。

摘要:目的 探讨心外膜脂肪组织(EAT)厚度、血清缺血修饰白蛋白(IMA)和高敏肌钙蛋白T(hs-cTnT)与急性冠状动脉综合征(ACS)的相关性。方法 选择2014年9月至2015年11月我院收治的120例ACS患者作为病例组,其中单支病变组、双支病变组和多支病变组各40例。选择同期在我院进行体检的心功能正常健康者120例作为正常对照组,采用超声心动图测定EAT厚度,采用白蛋白-钴离子结合试验法测定血清IMA水平,采用电化学发光免疫分析法测定血清hs-cTnT水平。结果 ACS患者EAT厚度、IMA和hs-cTnT水平及Gensini积分均显著高于正常对照组(P＜0.01)。ACS患者单支病变组、双支病变组和多支病变组EAT厚度、IMA和hs-cTnT水平及Gensini积分变化均呈递增趋势,且均高于正常对照组(P＜0.01)。ACS患者EAT厚度、IMA和hs-cTnT水平与Gensini积分呈显著正相关(P＜0.01)。单支病变组患者IMA水平与Gensini积分具有相关性(P＜0.05),EAT厚度和hs-cTnT水平与Gensini积分无显著相关性(P＞0.05)；双支病变组和多支病变组患者EAT厚度、IMA和hs-cTnT水平与Gensini积分均呈显著正相关(P＜0.05或P＜0.01)。结论 EAT厚度、IMA和hs-cTnT水平与ACS病变严重程度具有相关性。

摘要:目的 探讨血小板与淋巴细胞比值(PLR)在急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者接受直接PCI术中出现无复流和术后发生主要不良心脑血管事件(MACCE)中的预测价值。方法 回顾分析我院181例接受直接PCI治疗的STEMI患者临床和冠状动脉造影资料,依据ROC曲线确定诊断术中无复流的PLR标准,将入选患者分为高PLR组和低PLR组,并比较两组临床资料、住院期间和随访期间MACCE发生率。结果 对符合入选标准的181例患者术前PLR和术后TIMI血流之间的关系进行ROC曲线分析,结果显示PLR≥162.72预测发生术中无复流现象的敏感性和特异性分别为84.62%和85.5%(AUC＝0.835,95%CI为0.776～0.883,Z＝6.611,P＜0.001)。根据术前PLR＝162.72将所有患者分为高PLR组(PLR≥162.72,n＝48)和低PLR组(PLR＜162.72,n＝133),两组患者临床一般资料比较无明显差异。与低PLR组相比,高PLR组术后CK-MB峰值浓度升高(313.55±212.76 U/L比216.64±152.41 U/L,P＝0.001)、左心室射血分数(LVEF)降低(48.58%±7.30%比51.66%±6.82%,P＝0.009)和住院期间MACCE发生率升高[20.83%(10/48)比 9.77%(13/133),P＝0.049]。术后随访6～72(25.57±18.7)个月,共发生MACCE 28例,包括不同原因死亡10例。其中,高PLR组MACCE发生率显著高于低PLR组(27.08%比11.28%,P＝0.009)。生存分析显示,高PLR组全因死亡率和无MACCE生存率显著高于低PLR组(P＜0.05或P＜0.01)。COX比例风险回归分析显示,高PLR为预测心肌梗死发生术后MACCE的独立危险因素(HR＝2.106,95%CI为1.794～5.586,P＝0.035)。结论 PLR为一种预测STEMI患者直接PCI术后发生MACCE的独立而有价值的指标。

摘要:目的 探讨累积心率暴露(cumHR)与臂踝脉搏波传导速度(baPWV)的关系。方法 选择开滦研究人群中卒中队列和老年人群队列7904例组成观察人群,最终纳入研究队列的为5153例。根据cumHR将研究对象进行四分位分组。采用偏相关分析cumHR与baPWV的相关性,多因素线性回归和多因素Logistic回归分析cumHR对baPWV的影响。结果 随着cumHR的增加,平均baPWV水平和baPWV≥1400 cm/s的检出率均呈上升趋势。偏相关分析结果表明,cumHR与baPWV呈正相关(r＝0.35,P＜0.05)；校正了年龄、性别后cumHR与baPWV仍呈正相关(r＝0.24,P＜0.05)。多因素线性回归分析显示,cumHR每增加1次/分,baPWV增加1.071 cm/s。Logistic回归分析表明,校正了其他混杂因素后,与cumHR第一分位组相比,cumHR第二分位组、第三分位组、第四分位组均是baPWV≥1400 cm/s的危险因素,OR值(95%CI)分别为1.432(1.121～1.829)、1.738(1.371～2.204)、2.475(1.949～3.143)。结论 cumHR与baPWV呈正相关关系。cumHR是脉搏波传导速度增加的危险因素。

摘要:目的 评价同种药物洗脱支架和不同种药物洗脱支架治疗冠状动脉药物洗脱支架内再狭窄的有效性。方法 计算机检索PubMed、OVID、Embase、Cochrane图书馆、万方数据库、中国学术期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普数据库(VIP),收集同种和不同种药物洗脱支架治疗冠状动脉药物洗脱支架内再狭窄的临床资料,共纳入10项研究,1680名患者,使用RevMan5.2软件进行系统评价。检索时间为各大数据库建库至2015年10月。结果 在治疗冠状动脉药物洗脱支架内再狭窄时,采用不同药物洗脱支架可降低靶病变血运重建率(OR＝0.73,95%CI为0.55~0.96,P＝0.02)和主要不良心血管事件发生率(OR＝0.72,95%CI为0.54~0.96,P＝0.03)。两组间的病死率(OR＝1.03,95%CI为0.49~2.16,P＝0.95)和心肌梗死发生率(OR＝0.59,95%CI为0.24~1.41,P＝0.23)无统计学差异。结论 对于药物洗脱支架内再狭窄患者,再次植入不同药物洗脱支架比植入同种支架更获益。

摘要:目的 构建大鼠的动脉粥样硬化模型。方法 将载脂蛋白E(ApoE)缺陷(ApoE－/－)大鼠共16只,均分为两组作为实验组和对照组,均予高脂饲料喂养12周。实验组在前4周予Alzet渗透泵植入大鼠皮下,内部填充血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),以1 μg/(kg·min)的速率匀速释放。对照组仅予等量生理盐水处理。第12周麻醉后测体重、取血并处死,检测炎症因子及血脂,取心脏及主动脉组织,切片作HE、油红O、Masson染色。结果 实验组大鼠出现动脉粥样硬化斑块,对照组无类似表现,两组之间在其他方面无统计学差异。结论 ApoE－/－大鼠予高脂饮食饲养并予AngⅡ刺激,可成功造成大鼠动脉粥样硬化模型。

摘要:组胺是人体内重要的参与免疫调节和过敏反应、神经信号传递、胃酸分泌、造血细胞生成等生理病理过程的小分子生物胺。组胺通过作用于细胞表面的组胺受体,激活相应的胞内信号通路,进而发挥一系列生理效应。已有研究表明,炎症与免疫反应贯穿冠心病、心力衰竭、心肌心包炎等心血管疾病的发生发展过程,其中组胺的作用颇受关注。本综述将着眼于探讨组胺对固有免疫反应的调控作用及其对心血管疾病的影响。

摘要:早期流行病学研究发现降低的高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平与增加的冠心病风险密切相关,这促使了高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化假说的提出:相对于低密度脂蛋白胆固醇而言,HDLC是“好”的胆固醇,提高血清HDLC水平可能降低心血管事件风险。然而新的研究发现:升高HDLC水平并不能减少临床心血管事件的发生。这使得高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化假说遭到质疑。近来,高密度脂蛋白功能而非HDLC水平与动脉粥样硬化的关系被更多地关注。本文就高密度脂蛋白最新相关研究进行综述。

摘要:成纤维细胞生长因子21(FGF21)是近几年新发现的代谢调节因子,它与糖尿病性大血管病变之间的关系已成为近些年的研究热点。内源性FGF21水平在糖耐量受损时升高,随着2型糖尿病大血管病变的出现,其水平进一步升高,推测其可能机制是FGF21抵抗。血管内皮细胞有FGF21基因表达,且FGF21在动脉粥样硬化早期可能起保护作用,这暗示着FGF21有望成为预防和治疗糖尿病性大血管病变的靶点。

摘要:补阳还五汤作为中医经典方剂在动脉粥样硬化的防治方面有着较好的疗效,但其治疗机制尚不明确。本文通过整理近年来补阳还五汤对于动脉粥样硬化的作用机制及其信号通路,包括炎症通路、Rho/Rho激酶信号通路、Toll样受体信号通路、基质金属蛋白酶信号通路等方面做一综述。

摘要: