摘要:目的 观察血管生成素1(Ang-1)通过LXRα调节THP-1源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、ABCG1表达和胆固醇流出。 方法 160 nmol/L佛波酯诱导人THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,50 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)共孵育,使其荷脂形成泡沫细胞,常规体外培养细胞；实验分为对照组和Ang-1处理组；液体闪烁计数仪检测细胞胆固醇流出水平,高效液相色谱检测细胞内脂质成分,实时荧光定量PCR和Western blot检测ABCA1、ABCG1表达；LXRα激动剂T0901317或抑制剂GGPP分别处理THP-1源性泡沫细胞。 结果 Ang-1显著抑制THP-1源性泡沫细胞胆固醇流出,下调ABCA1、ABCG1表达；LXRα激活剂拮抗Ang-1对ABCA1、ABCG1表达及胆固醇流出的抑制作用。 结论 Ang-1可能通过抑制LXRα表达,降低ABCA1和ABCG1表达水平,减少THP-1源性泡沫细胞内胆固醇流出。

摘要:目的 探讨胃促生长素(Ghrelin)与护骨素(OPG)/细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)在钙化发生过程中的调控机制。 方法 首先观察高脂高糖培养基中A7r5(主动脉平滑肌细胞)钙化过程中Ghrelin的变化情况,继之观察外源性Ghrelin干预后高脂高糖钙化培养基中A7r5中OPG、RANKL的表达变化。最后观察Ghrelin与OPG/RANKL在钙化发生过程中的调控机制。各组细胞均于培养14天后进行相关检测(Von Kossa染色、茜素红染色、细胞外钙沉积量测定、免疫组织化学染色、Western blot检测)。 结果 Von Kossa染色、茜素红染色及细胞外钙沉积量检测显示,高脂高糖及β-甘油磷酸盐模拟的糖尿病代谢紊乱环境下,A7r5钙沉积量显著增加了5.21倍。Ghrelin免疫组织化学染色及IPP6定量分析显示,随着钙化的形成与发展,Ghrelin表达明显下调。外源性Ghrelin 可上调OPG相对表达量6.25倍。相对于高脂高糖钙化组,anti-OPG组钙沉积量增加了1.33倍(P<0.05),RANKL组钙沉积量增加了1.59倍(P<0.05)；相对于anti-OPG组,anti-OPG+Ghrelin组钙沉积量下调了41.9%(P<0.05)；相对于RANKL组,RANKL+Ghrelin组钙沉积量下调了57.8%(P<0.05)。 结论 OPG/RANKL可介导Ghrelin调控A7r5主动脉平滑肌细胞钙化。

摘要:目的 检测原核表达Lunasin(露那辛)的抗炎生物学活性,为Lunasin今后在生物医药领域的开发奠定基础。 方法 利用基因工程技术将PCR扩增得到的Lunasin DNA片段定向克隆至表达载体pET28,酶切及测序鉴定后对其诱导表达,利用镍离子亲和层析法对其进行纯化；Griess法和ELISA法检测小鼠J774A.1细胞培养液中Lunasin对一氧化氮和肿瘤坏死因子α、白细胞介素6等炎症因子含量的影响；Western blot检测Lunasin对核因子κB(NF-κB)p65磷酸化以及组织因子(TF)表达的影响。 结果 成功构建了Lunasin的原核表达载体,获得纯度达90%的Lunasin多肽。Lunasin能通过抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠J774A.1细胞NF-κB的活化而抑制一氧化氮合成以及下游基因肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的表达。Lunasin对LPS诱导的J774A.1细胞TF的表达也具有显著抑制作用。 结论 原核表达的Lunasin表现出显著的抗炎生物学活性,明显抑制LPS诱导的J774A.1细胞TF表达,其机制可能是通过抑制NF-κB的活化而实现的。

摘要:目的 观察电针“曲池”、“足三里”对脑缺血模型大鼠缺血皮层中突触素(SYN)及脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨电针治疗缺血性脑卒中的作用机制。 方法 90只大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,按时间点每组又分为3个亚组:3天组、7天组、14天组,每亚组10只大鼠。模型组和电针组均用改良的线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉阻塞模型。各组于术后2 h及处死前行神经功能缺损评分。电针组予电针患侧“曲池”穴和“足三里”穴,1次/天,每次30 min,至动物处死。采用免疫组织化学染色、Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠左侧皮质SYN、BDNF表达情况。 结果 与假手术组比较,模型组、电针组神经功能缺损评分明显升高(P＜0.01)；经电针治疗后,电针组神经功能缺损评分低于模型组(P＜0.05)。免疫组织化学染色和Western blot结果显示,与假手术组比较,模型组、电针组SYN蛋白表达显著降低,电针组SYN蛋白表达比模型组显著提升(P＜0.01)；与假手术组比较,模型组、电针组BDNF蛋白表达显著上升,电针组BDNF蛋白表达比模型组显著增多(P＜0.01)。RT-PCR结果表明,与假手术组比较,模型组、电针组SYN mRNA表达显著下降,电针组SYN mRNA表达比模型组显著升高(P＜0.01)；与假手术组比较,模型组、电针组BDNF mRNA表达显著升高,电针组BDNF mRNA表达比模型组显著升高(P＜0.01)。 结论 电针“曲池”、“足三里”可促进脑缺血大鼠皮质BDNF的合成和分泌,上调SYN的表达,可能在调控脑可塑性方面发挥重要作用。

摘要:目的 探讨ox-Lp(a)损伤血管内皮细胞的表观遗传调控机制。 方法 生物信息学分析和筛选与0,1-转位酶2(TET2) mRNA 3’-UTR靶向结合的候选miRNA,荧光素酶报告基因系统验证其结合的靶向性；以0 mg/L、25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L及200 mg/L的ox-Lp(a)与HUVEC-12内皮细胞孵育24 h,或用100 mg/L ox-Lp(a)与HUVEC-12内皮细胞孵育0 h、6 h、12 h、24 h及48 h,qRT-PCR和Western blot分别检测TET2 mRNA和蛋白的表达水平。qRT-PCR检测hsa-miR-125a-5p表达水平,以5hmc水平分析TET2活性的变化,Transwell检测ox-Lp(a)对单层血管内皮细胞通透性的影响。 结果 生物信息学分析和荧光素酶报告基因验证结果表明TET2为hsa-miR-125a-5p的靶基因,且hsa-miR-125a-5p与TET2 mRNA的3’-UTR结合的自由能值低(－30.1 kcal/mol)。ox-Lp(a)呈剂量和时间依赖性抑制TET2蛋白和mRNA的表达水平,以100 mg/L ox-Lp(a)作用HUVEC-12内皮细胞 24 h的效果最佳；100 mg/L ox-Lp(a)作用HUVEC-12内皮细胞 24 h后,TET2活性显著下降,且显著上调hsa-miR-125a-5p的表达。anti-hsa-miR-125a-5p能逆转ox-Lp(a)对HUVEC-12内皮细胞 TET2蛋白和mRNA表达水平的抑制作用和活性下降。ox-Lp(a)显著增加单层血管内皮细胞通透性,但可被anti-hsa-miR-125a-5p部分逆转。 结论 ox-Lp(a)通过上调hsa-miR-125a-5p并与TET2 mRNA 3’-UTR靶向性结合,抑制TET2蛋白和mRNA的表达水平及活性,从而增加单层血管内皮细胞通透性。

摘要:目的 分析神经调节蛋白1(NRG-1)与卡托普利单独应用或联合应用对抑制心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡以及改善心功能的作用机制。 方法 将100只清洁级SD大鼠利用区组随机化原则分为NRG-1组、卡托普利组、联合用药组、伪手术组及对照组,除伪手术组实施主动脉-腔静脉穿刺手术外,其余四组在穿刺手术基础上造瘘制备成心力衰竭大鼠模型,NRG-1组和卡托普利组术后分别给予NRG-1、卡托普利治疗,联合用药组给予NRG-1和卡托普利联合治疗,分析比较不同用药方案对大鼠心肌细胞凋亡率的抑制与心功能改善效果。 结果 术后8周,与伪手术组比较,对照组出现心功能指标下降、血浆BNP浓度升高、血流动力学指标改变、心肌肥厚程度增加、心肌细胞凋亡指数升高(P＜0.05)；与对照组比较,NRG-1组、卡托普利组和联合用药组在治疗8周后心功能、血浆BNP、血流动力学、心肌肥厚程度、心肌细胞凋亡指数均明显改善(P＜0.05),且NRG-1组血浆BNP、心肌细胞凋亡指数的改善效果明显优于卡托普利组(P＜0.05),而联合用药组上述各指标的改善效果更优于卡托普利组、NRG-1组(P＜0.05)。 结论 NRG-1与卡托普利应用于心力衰竭治疗时,均能有效抑制心肌细胞凋亡、改善心功能,而两药联合治疗会进一步提升其疗效。

摘要:目的 探讨心肌梗死患者血清低密度脂蛋白(LDL)亚组分的分布特征并分析其与急性心肌梗死、陈旧性心肌梗死患者血清临床生物化学指标的相关性。 方法 采集并筛选14例急性心肌梗死患者、24例陈旧性心肌梗死患者和19例健康体检者的新鲜血清,采用Lipoprint脂蛋白亚类分析系统检测血清LDL亚组分组成和含量。 结果 急性心肌梗死和陈旧性心肌梗死患者血清LDL平均粒径、I-LDL含量和百分比显著降低(P＜0.01),小LDL(S-LDL)含量和百分比显著升高(P＜0.01)；从急性心肌梗死到陈旧性心肌梗死血清S-LDL尤其是LDL₅C、LDL₆C、LDL₇C与血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、载脂蛋白B(ApoB)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的相关性发生了显著性变化。 结论 LDL粒径的降低,S-LDL含量与百分比的升高,较LDLC浓度的单独升高对心肌梗死患者的精准检测和诊断有非常重要的指导意义,血清LDL₅C、LDL₆C、LDL₇C与临床生物化学指标相关性的检测对临床诊断心肌梗死以及鉴别诊断急性心肌梗死、陈旧性心肌梗死有极大的辅助诊断价值。

摘要:目的 探讨血小板/淋巴细胞计数比(PLR)与行急诊冠状动脉介入治疗(PPCI)的急性前壁心肌梗死患者心肌灌注和院内主要不良心脏事件的相关性。 方法 回顾分析行PPCI手术的急性前壁心肌梗死患者共136例。根据患者术前PLR值,用四分位法获取患者四分位数,以三四分位数(PLR=165)为界限,将患者分为高PLR组(PLR≥165的第四分位组)和低PLR组(PLR＜165的第一、二和三分位组)。比较两组患者的基线临床特征、Killip心功能分级、TIMI血流分级、心肌呈色分级(MBG)、实验室检查及院内主要不良心脏事件(MACE)。 结果 高PLR组患者Killip分级≥Ⅱ级的比例较低PLR组显著增高(47%比20%,P=0.005)。高PLR组术后TIMI血流0～2级(36%比14%, P=0.004)、MBG 0～1级的比例显著高于低PLR组(44%比21%, P=0.016)。高PLR组患者心肌灌注不良比例显著高于低PLR组(56% 比27%,P=0.002)。Logistic多因素回归分析显示影响心肌灌注的危险因素有:PLR(OR 1.009,95%CI 1.004～1.015, P=0.001)、血栓抽吸(OR 1.473,95%CI 1.012～2.144,P=0.043)、脑钠尿肽(BNP)(OR 1.1,5%CI 1.000～1.002,P=0.034)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)峰值(OR 1.2,5%CI 1.001～1.005,P=0.067)。高PLR组的院内MACE显著高于低PLR组(25% 比7%,P=0.004),全因死亡率也显著高于低PLR组(14%比2%,P=0.014)。 结论 急诊PCI术前PLR是急性前壁心肌梗死患者心肌灌注不良的独立预测因素。PLR增高的急性前壁心肌梗死患者院内死亡及MACE发生率增加。

摘要:目的 研究血清微小RNA(miRNA)中的miR-663、miR-126和miR-370在冠心病患者支架植入术后的表达情况,分析以上3种miRNA对支架内再狭窄(ISR)的预测价值。 方法 研究纳入175例冠心病支架植入术后并随访复查冠状动脉造影的患者,根据造影结果分为ISR组(n＝66)和无ISR组(n＝109)。分析比较两组患者的临床资料。收集所有患者的血清,通过实时荧光定量PCR检测血清miR-663、miR-126和miR-370的表达情况。应用统计学方法分析以上3个miRNA预测ISR的价值。 结果 175例支架植入术后冠心病患者中发生ISR的共66例。ISR组吸烟率更高(P＜0.05)；ISR组血糖、低密度脂蛋白胆固醇、高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平均高于无ISR组(P＜0.01)。ISR组血清miR-663、miR-126表达量低于无ISR组,而miR-370表达量高于无ISR组(均P＜0.01)。Logistic回归分析表明,miR-663、miR-126表达水平与ISR发生相关,吸烟、hs-CRP是ISR的独立危险因素。受试者工作特征曲线结果表明,miR-663、miR-126和miR-370预测ISR的曲线下面积(AUC)分别为0.772、0.720和0.650；而miR-663联合miR-126预测ISR的AUC为0.909,优于单一miRNA的预测效能。 结论 冠心病支架植入术后ISR患者血清miR-663、miR-126表达下降,miR-370表达增加。miR-663、miR-126和miR-370可用于预测ISR的发生,miR-663联合miR-126可明显提高预测ISR的效能。

摘要:目的 探讨主动脉内气囊反搏(IABP)对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)伴心源性休克(CS)患者肾功能的影响。 方法 STEMI伴CS患者103例,随机分为对照组(n＝51)和IABP组(n＝52),比较两组患者的临床资料,观察STEMI伴CS患者急性肾损伤(AKI)的发生率、严重程度和30天的存活率,以及IABP对AKI的影响。 结果 两组间年龄、性别、高血压病史、糖尿病史、合并肺水肿、入院收缩压、入院平均动脉压、心率、左心室射血分数、血肌酐基础值、基础肾小球滤过率估计值、门-球时间、对比剂用量及术后TIMI血流等指标比较无显著差异(P＞0.05)。在静脉使用多巴胺剂量及去甲肾上腺素使用率方面,IABP组低于对照组(P＜0.05)。对照组AKI主要发生在第1天,而IABP组更多发生在第2天,两组AKI总体发生率比较无显著差异(P＞0.05)。肾替代治疗(RRT)比较,对照组高于IABP组(35.3%比17.3%,P＜0.05)。血肌酐比较,第1天对照组的血肌酐高于IABP组(P＜0.05),而入院基础值、第2天和第3天两组均无显著差异。30天存活率比较,对照组和IABP组无显著差异,而AKI患者低于非AKI患者(P＜0.01)。 结论 IABP不减少STEMI伴CS患者AKI的发生率,也不提高其30天存活率,但能延缓AKI进展的速度,减少AKI患者的RRT使用率。

摘要:目的 观察在早期糖尿病肾病(DN)患者血清中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)水平的变化,探讨NGAL与致动脉硬化指数(AIP)的关系。 方法 选取尿微量白蛋白/肌酐＜300 mg/g的糖尿病患者120例为糖尿病组,根据尿微量白蛋白/肌酐分为正常白蛋白尿组和早期DN组,另选取健康体检者60例作为对照组。检测各组血清甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)、高密度脂蛋白(HDL)、NGAL、超敏C反应蛋白(hs-CRP)等,并计算致动脉硬化指数；分析3组NGAL、hs-CRP、AIP的变化。按照AIP三分位数将所有研究对象分成低、中、高水平3组,分析其NGAL和hs-CRP的变化。对所有变量进行简单线性相关和多元线性逐步回归分析。 结果 与对照组比较,正常白蛋白尿组和早期DN组NGAL、hs-CRP、AIP水平明显升高(P<0.001)；与正常白蛋白尿组比较,早期DN组NGAL、hs-CRP、AIP水平明显升高(P<0.001)。血清NGAL水平随AIP上升而明显上升(P<0.001)。AIP与hs-CRP、NGAL呈正相关(r=0.296,0.313,P<0.05)；NGAL、hs-CRP为AIP的独立影响因素。 结论 血清NGAL是监测糖尿病早期肾损伤的指标。NGAL是一个急性时相反应蛋白,参与了糖尿病肾病动脉粥样硬化的发生发展。

摘要:目的 探讨脑梗死患者颅内外动脉粥样硬化与外周血T细胞亚群的相关性。 方法 将脑梗死组180例脑梗死患者按类肝素药物治疗急性缺血性脑卒中试验(TOAST)亚型分类标准分为大动脉粥样硬化性脑梗死组(LAA组)、心源性栓塞组(CE组)、小动脉闭塞性脑梗死组(SAA组)、其他原因所致脑梗死(SOE组)组、不明原因脑梗死(SUE组)；按头颈CT血管造影(CTA)颅内外动脉狭窄结果分为无狭窄组、单纯颅外动脉狭窄组、单纯颅内动脉狭窄组、颅内外动脉狭窄组,各狭窄组进一步按狭窄程度分为轻、中及重度狭窄组。同时选取健康体检者60例作为对照组。分别比较各组间血T细胞亚群水平。 结果 脑梗死组CD4+T细胞水平明显高于对照组,CD8+T细胞水平明显低于对照组(P＜0.05)；LAA组和SAA组CD4+T细胞水平显著高于其他类型脑梗死组及对照组,而CD8+T细胞水平呈相反表现(P＜0.05)；颅内外动脉狭窄严重程度与CD4+T细胞呈正相关,与CD8+T细胞呈负相关。无狭窄组CD4+T细胞水平低于各狭窄组,CD8+T细胞水平高于各狭窄组(P＜0.05),而各狭窄组间T细胞亚群差异无统计学意义。 结论 CD4+T细胞和CD8+T细胞与脑梗死患者动脉粥样硬化密切相关,检测血T细胞亚群对颅内外动脉粥样硬化及其严重程度具有一定的预测价值。

摘要:目的 探讨血清中肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)、磷酸二酯酶4D(PDE4D)的水平与急性冠状动脉综合征的关系。 方法 采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测50例急性冠状动脉综合征患者(ACS 组)及100例正常对照者(对照组)的HB-EGF蛋白及PDE4D蛋白的血清水平,运用Logistic回归分析评估它们与ACS的关系。 结果 校正高血压、吸烟、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、体质指数(BMI)等单因素分析有意义的因素后,发现HB-EGF蛋白水平与是否罹患ACS有关[OR=4.114,95%CI为(1.782,9.498),P=0.001]；PDE4D蛋白水平也与是否罹患ACS有关[OR=5.049,95%CI为(1.764,14.448),P=0.003]。 结论 血清中HB-EGF、PDE4D水平与是否罹患急性冠状动脉综合征有关,HB-EGF、PDE4D水平高者患急性冠状动脉综合征的风险高。

摘要:目的 探讨头臂干彩色多普勒超声(CDU)在经桡动脉行冠状动脉造影(CAG)入径选择中的临床价值。 方法 700例行CAG的不稳定型心绞痛患者,随机分为试验组(n＝362)和对照组(n＝338)。试验组根据CDU筛查有无头臂干迂曲分为超声迂曲组和超声无迂曲组；对照组根据CAG筛查有无头臂干迂曲分为造影迂曲组和造影无迂曲组。分析CDU诊断头臂干迂曲的准确性,头臂干迂曲的发生率及其对CAG手术成功率、手术时间以及并发症的影响。 结果 试验组和对照组头臂干迂曲的发生率分别是9.4%、10.7%,差异无统计学意义(P＞0.05)。CDU诊断头臂干迂曲的灵敏度为94.4%,特异度为98.7%。造影迂曲组手术成功率较超声迂曲组、超声无迂曲组、造影无迂曲组低(P＜0.05),手术时间较超声迂曲组、超声无迂曲组、造影无迂曲组长(P＜0.05)。超声迂曲组、超声无迂曲组、造影迂曲组、造影无迂曲组发生桡动脉痉挛分别有1、9、1、8例,造影迂曲组出现1例轻度主动脉夹层、12例导管打结。 结论 CDU可为广大介入医师对头臂干迂曲患者选择更有效的CAG途经提供重要参考价值。

摘要:目的 探讨高分辨率磁共振成像(HR-MRI)在评估椎动脉夹层(VAD)方面对血管腔、血管壁结构及成分的显示效果。 方法 回顾性纳入2012年1月至2016年4月连续就诊且完成数字减影血管造影、磁共振血管造影、磁共振成像(MRI)和HR-MRI的5例VAD患者作为研究对象,比较和分析HR-MRI对VAD的诊断价值。 结果HR-MRI能确定以下内容:(1)椎动脉粥样硬化斑块由大量脂质核心组成；(2)VAD内存在大面积的“假腔”和完全塌陷的“真腔”；(3)HR-MRI能有效区分先天性椎动脉发育不全和动脉粥样硬化斑块。此外,基于经典MRI的病因诊断,在HR-MRI扫描后,2例患者加入了降脂药物治疗,2例患者在短时间内使用双重抗血小板药物。 结论 将HR-MRI应用于VAD患者的诊断中,能更详细地阐明受影响血管壁的状况,有助于临床医师更好识别个体患者的发病机制并选择最佳治疗药物。

摘要:血管钙化是一种多因素介导、主动、可逆的调节过程,涉及多种细胞因子及信号通路。血管钙化的本质是多种血管细胞成分向成骨样细胞表型转化,最终导致管壁增厚、管腔狭窄和血管硬化重塑。目前研究表明,血管平滑肌细胞、钙化血管细胞、周细胞以及血管壁内的间充质干细胞都具有向成骨样细胞表型转化的潜能。成骨样细胞的来源及其转化和促血管钙化机制已成为这一领域的重大研究课题。

摘要:经皮冠状动脉介入治疗、溶栓治疗可以使心肌梗死患者明显获益并且改善预后,但是由此引起的心肌缺血再灌注损伤问题也凸显出来,心肌缺血再灌注损伤涉及到多个靶点通路,不同信号通路之间的关系错综复杂。近几年医学家提出的再灌注损伤挽救激酶和生存活化因子增强两个促存活激酶信号通路成为了再灌注干预治疗的新靶点,从而成为心血管疾病甚至其他血管性疾病的新的切入点。本文拟阐述这两条信号通路对缺血再灌注后心肌保护的作用机制,为心肌梗死新药研发提供新思路。

摘要:网膜素是由内脏脂肪组织分泌的一种细胞因子,能够增强胰岛素敏感性,与代谢综合征、炎症性疾病等多种疾病密切相关。循环网膜素水平是颈动脉粥样斑块的独立预测因素,表明网膜素可能参与了动脉粥样硬化发生发展的调控。网膜素可能通过内皮细胞保护作用、抑制巨噬细胞源性泡沫细胞形成、抑制血管平滑肌细胞的增殖、迁移、分泌以及抗炎作用发挥着抗动脉粥样硬化作用。文章将对网膜素的生物学特性、生理病理作用以及网膜素与动脉粥样硬化关系的研究进展作一综述。

摘要:心脑血管疾病是严重威胁人类健康的常见疾病,是全球的头号死因。动脉粥样硬化被认为是众多心脑血管疾病的发病基础。我国传统中药水蛭中包含多种活性物质,这些活性物质在防治心脑血管疾病等多种复杂疾病过程中发挥着多组分、多靶点的协同作用。近年来,水蛭及含有水蛭的中成药或复方制剂已广泛应用于心脑血管疾病临床治疗中。本文重点就水蛭对动脉粥样硬化发生中内皮细胞、巨噬细胞和平滑肌细胞三类主要细胞的作用研究进展进行综述。