摘要:胆固醇逆向转运(RCT)异常导致脂代谢紊乱是动脉粥样硬化发病重要环节,探讨介导RCT的关键蛋白在脂代谢中的作用及调控机制对阐明动脉粥样硬化发病的分子机制具有重要意义。本期专题收集的论文探讨了利拉鲁肽、苦瓜素以及生长分化因子11对细胞胆固醇流出及介导RCT中关键蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、ABCG1和B类Ⅰ型清道夫受体表达的影响,分别从不同角度阐释RCT关键蛋白参与药物或小分子物质调控胆固醇流出的分子机制。

摘要:目的 研究生长分化因子11(GDF11)对巨噬细胞胆固醇逆转运的影响,并探究GDF11发挥作用的具体机制。方法 提取小鼠腹腔巨噬细胞后给予氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、GDF11和激活素受体样激酶7(ALK7)抑制剂SB431542孵育24 h。利用油红O染色观察细胞脂质蓄积,提取总mRNA和总蛋白后,利用real-time PCR和Western blot检测GDF11、三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)和三磷酸腺苷结合盒转运体G1(ABCG1)的mRNA和蛋白表达水平。给予小鼠腹腔注射外源GDF11,提取腹腔巨噬细胞用³H标记的胆固醇孵育后注射回小鼠腹腔内,每8 h收集一次小鼠粪便,48 h后收集小鼠肝脏和血液样本,检测样本³H含量,计算胆固醇逆转运水平。结果 ox-LDL孵育24 h显著诱导巨噬细胞内脂质蓄积,同时抑制GDF11 mRNA及蛋白的表达。GDF11处理能有效抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞脂质蓄积,同时显著诱导ABCA1 mRNA及蛋白的表达。经外源补充GDF11后显著提高小鼠体内胆固醇逆转运水平。GDF11孵育巨噬细胞后,在给予巨噬细胞ALK7抑制剂SB431542孵育后,GDF11对ox-LDL诱导细胞内脂质蓄积的抑制作用被拮抗,对ABCA1表达的调控作用也被抑制。结论 GDF11通过ALK7调节ABCA1的表达,从而促进巨噬细胞胆固醇逆转运。

摘要:目的 前期工作发现苦瓜蛋白(MD28)可上调THP-1源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达而减少胞内的脂质蓄积,但其机制不清楚。文章拟从转录后水平分析其作用机制。方法 首先用miRNA芯片技术分析经MD28干预后,50 mg/L ox-LDL处理48 h的THP-1源性泡沫细胞miRNA谱中下调1.5倍的microRNA(miRNA),并与Genecards调控ABCA1基因表达的miRNA比较,找到二者共同miRNA,然后以荧光素酶报告基因系统验证其靶基因关系。qRT-PCR 检测ABCA1 mRNA和miR-23b-3p的表达水平,Western blot检测蛋白表达水平,油红O染色测定胞内脂质蓄积。结果 miR-23b-3p是miRNA芯片和Genecards的交集,靶基因验证实验证实ABCA1是miR-23b-3p的靶基因。MD28剂量(0 g/L、0.4 g/L、1.2 g/L、3.6 g/L、5 g/L)和时间(0 h、6 h、12 h、24 h、48 h)依赖性地上调ABCA1 mRNA及蛋白的表达水平,以1.2 g/L作用12 h最为显著。ox-LDL上调miR-23b-3p表达且被MD28抑制,MD28能减少胞内脂质蓄积,miR-23b-3p的抑制剂可拮抗MD28对ABCA1表达和胞内脂质蓄积的作用。结论 MD28通过下调miR-23b-3p介导其促进THP-1源性泡沫细胞ABCA1表达、减少胞内脂质蓄积作用。

摘要:高血脂是心血管病与糖尿病的共同危险因素,然而临床上使用他汀类药物控制血脂却增加了患者新发糖尿病的风险。相反,家族性高胆固醇血症(FH)病人有较高的血脂并长期使用他汀类药物,这类患者罹患糖尿病的风险却降低了。考虑到FH病人主要是由低密度脂蛋白受体(LDLR)突变引起的,这使得LDLR介导的胆固醇代谢是否参与糖尿病的发病成为疑问。他汀类药物能够上调肝脏和某些组织的LDLR表达并促进胆固醇内流,有可能引起某些胰岛细胞“脂毒性”的发生。胰岛β细胞对胆固醇较敏感,少量胆固醇蓄积就能造成细胞功能障碍。本文旨在讨论LDLR在他汀类药物诱发的糖尿病中的病理角色,为降低该药的不良反应、促进2型糖尿病的防治提供新的思考。

摘要:目的 研究利拉鲁肽对高糖条件下HepG2细胞胆固醇流出的影响,检测相关蛋白表达并探讨其分子机制。方法 体外培养HepG2细胞,以高糖刺激并以不同浓度利拉鲁肽干预,采用BODIPY-胆固醇荧光法检测利拉鲁肽对高糖条件下HepG2细胞胆固醇流出的影响,通过Western blot法分析三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、ABCG1与清道夫受体B1蛋白表达及细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路变化。结果 利拉鲁肽可显著降低高糖(50 mmol/L)条件下HepG2细胞内荧光密度,增加ABCA1蛋白的表达,且增强ERK1/2的磷酸化水平。结论 利拉鲁肽增强高糖条件下HepG2细胞中胆固醇流出,其机制可能与调控ERK1/2信号通路进而上调ABCA1表达有关。

摘要:目的 探讨运动对衰老高血压大鼠脑动脉平滑肌CaL通道功能的影响。方法 雄性3月龄正常血压(WKY)大鼠、自发性高血压大鼠(SHR)各18只；16月龄WKY大鼠和SHR各36只,再随机分成安静组和运动组,各18只。运动组以16 ~18 m/min进行8周跑台运动(每天60 min,每周5天)。8周后,测定各组大鼠体重、心脏重量,采用全细胞膜片钳技术和Western blot测定大鼠脑动脉CaL通道功能和CaL通道α1C亚基蛋白的表达。结果 (1)SHR心率和收缩压均显著高于同龄WKY大鼠,老年大鼠收缩压较同类别青年组均显著增高；青年组SHR脑动脉CaL通道电流密度及其α1C亚基蛋白表达均显著高于WKY大鼠,在老年组差异无显著性,且均低于同类别青年组。(2)运动后衰老大鼠心重指数(心脏重量/体重)较同类别安静组均显著增加；运动显著降低衰老SHR收缩压,增加衰老SHR脑动脉CaL通道电流密度及其α1C亚基蛋白表达。结论 衰老SHR脑动脉CaL通道功能下调,运动缓解衰老引起的CaL通道功能重构。

摘要:目的 研究携带血管紧张素转换酶2(ACE2)基因的重组腺病毒载体(Ad-ACE2)转染对高脂饲养的载脂蛋白E基因敲除(ApoE－/－)小鼠保护内皮、改善胰岛素抵抗及抑制肝脏纤维化的影响。 方法 用高脂高能量饲料喂养ApoE－/－小鼠,模拟代谢综合征。30只ApoE－/－小鼠随机分为对照组(Con组)、ACE2基因对照组(EGFP组)和ACE2基因治疗组(ACE2组),每组10只,均给予高脂饮食。3组分别通过尾静脉注射生理盐水、Ad-EGFP和Ad-ACE2干预。12周末行葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验。小鼠麻醉后,心尖取血,测定血脂水平。取肝脏组织进行HE染色、油红O染色。免疫组织化学染色观察肝组织ACE2、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(COL-Ⅲ)、白细胞介素6(IL-6)表达。 结果 用Ad-ACE2转染的ACE2组显著提高了ApoE－/－小鼠肝脏中ACE2的表达(P＜0.05),ACE2组内皮依赖性功能明显优于Con组和EGFP组(P＜0.05),胰岛素敏感性强于Con组和EGFP组(P＜0.05),而血脂水平无明显改变。ACE2组肝脏组织中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、IL-6表达均低于Con组和EGFP组(P＜0.05)。 结论 ACE2过表达能够保护内皮,改善胰岛素抵抗,抑制肝脏纤维化,从而保护肝脏功能。

摘要:目的 探讨高盐对心肌成纤维细胞增殖及细胞内游离钙离子浓度和pH的影响。方法 贴壁法培养SD大鼠乳鼠心肌成纤维细胞,免疫荧光染色法行心肌成纤维细胞波形蛋白鉴定。将心肌成纤维细胞分为对照组(Na＋浓度122.27 mmol/L)、高盐组(Na＋浓度161 mmol/L),处理48 h。用EdU荧光染色法检测细胞增殖状况；负载Fura2-AM和BCECF-AM荧光指示剂后用比率荧光系统分别检测细胞内pH及Ca²＋浓度。结果 高盐组心肌成纤维细胞增殖明显高于对照组,且高盐组细胞内pH和Ca²＋浓度明显高于对照组。结论 高盐可以诱导心肌成纤维细胞增殖并导致细胞内Ca²＋浓度以及pH值升高。

摘要:目的 探讨内皮抑素(ENDO)-血管内皮细胞抑制因子(VEGI)重组腺病毒对同型半胱氨酸(Hcy)致人血管内皮细胞损伤的拮抗作用。 方法 应用内皮抑素-血管内皮细胞抑制因子融合蛋白重组腺病毒(Ad-hENDO-VEGI151)转染Hcy损伤的人血管内皮细胞ECV304,用免疫印迹法检测受染细胞融合蛋白的表达,用自动生化分析仪检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,用台盼蓝染色法计算细胞存活率,用ELISA检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达。 结果 制备的重组腺病毒具有较高的转基因效率,Ad-hENDO-VEGI151重组腺病毒能够在ECV304细胞中表达41 kDa大小的融合蛋白,Hcy(0.1~1.0 mmol/L)呈浓度依赖性地增加细胞LDH漏出量和降低细胞存活率,重组腺病毒能够有效地拮抗Hcy对人血管内皮细胞的损伤作用(P＜0.05)。 结论 内皮抑素-血管内皮细胞抑制因子重组腺病毒对Hcy致人血管内皮细胞损伤有拮抗作用,为治疗高同型半胱氨酸血症等疾病提供新的思路。

摘要:目的 研究川芎嗪对阿霉素诱导的小鼠心脏毒性的预防作用及其机制。方法 建立阿霉素诱导的心脏毒性小鼠模型,将小鼠随机分为3组:对照组、阿霉素组(阿霉素15 mg/kg)、川芎嗪组[川芎嗪60 mg/(kg·d)＋阿霉素15 mg/kg],心脏超声检测川芎嗪干预后阿霉素对小鼠心脏功能的影响,HE染色及Masson三色染色检测小鼠心脏组织学及胶原蛋白的变化,TUNEL染色检测小鼠心肌细胞凋亡情况,Western blot检测p-Akt、Akt、p-eNOS、eNOS及cleaved Caspase-3蛋白的表达。结果 与阿霉素组相比,川芎嗪组左心室短轴缩短率(FS)和左心室射血分数(EF)显著升高(P＜0.01)；川芎嗪显著降低小鼠心肌细胞凋亡(P＜0.01),明显抑制小鼠心肌纤维化和炎症细胞浸润(P＜0.01)；与阿霉素组相比,川芎嗪组显著上调p-Akt和p-eNOS的表达(P＜0.05),显著下调cleaved Caspase-3的表达(P＜0.01)。结论 川芎嗪通过激活Akt/eNOS通路抑制心肌细胞凋亡保护阿霉素诱导损伤心肌可能是川芎嗪预防阿霉素致心脏毒性的一个潜在机制。

摘要:目的 观察长链非编码RNA预测心脏重构(LIPCAR)在慢性心力衰竭及合并肾功能不全患者循环中的表达。方法 收集80例健康对照者、188例慢性心力衰竭患者,其中合并肾功能不全患者80例,用实时荧光定量PCR检测患者循环中的LIPCAR。结果 LIPCAR的表达水平在健康对照组与慢性心力衰竭组之间有显著差异(1.08±0.28比0.79±0.31,P＜0.01)。对慢性心力衰竭组进行亚组分析发现,LIPCAR在慢性心力衰竭合并肾功能不全患者中表达有进一步降低趋势。此外,LIPCAR与NT-proBNP呈负相关,与射血分数(EF)呈正相关(P＜0.01)。LIPCAR在判断心力衰竭时,AUC为0.777(95%CI为0.720~0.835)。结论 LIPCAR在慢性心力衰竭及合并肾功能不全患者循环中表达均降低,可作为诊断慢性心力衰竭的潜在生物学标志物。

摘要:目的 探讨非离子型造影剂对于老年糖尿病合并急性冠状动脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后造影剂肾病(CIN)发生的影响,筛选可能的危险因素。方法 选取行PCI治疗的134例老年糖尿病合并ACS患者(年龄≥65岁),选择同期无糖尿病的145例老年PCI患者进行对比,比较两组患者的年龄、术前脑钠尿肽、射血分数、25-羟维生素D、估算的肾小球滤过率(eGFR)、血白蛋白等。应用多因素Logistic回归分析筛查可能的危险因素。结果 134例老年糖尿病PCI患者发生造影剂肾病17例,发生率为12.6%,无糖尿病的145例老年PCI患者发生造影剂肾病13例,发生率8.9%,两组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05)；两组之间性别、围手术期用药中ACEI/ARB比较差异有统计学意义(P＜0.05)；糖尿病组术前BNP、纤维蛋白原、血小板体积分布宽度高于非糖尿病组,25-羟维生素D低于非糖尿病组(P＜0.05)。对老年糖尿病合并ACS患者PCI后发生造影剂肾病行Loistic回归分析显示,纤维蛋白原、25-羟维生素D进入回归方程,为造影剂肾病发生的危险因素,术前纤维蛋白原升高增加造影剂肾病的发病风险(OR=3.403,95%CI:1.353～6.845,P=0.007),25-羟维生素D降低使造影剂肾病发生风险显著增加(OR=0.485,95%CI:0.282～0.833,P=0.009)。结论 术前纤维蛋白原升高、25-羟维生素D下降使老年糖尿病合并ACS患者PCI术后造影剂肾病发生风险增加。

摘要:目的 探讨连续性肾脏替代治疗(CRRT)血液灌流(HP)联合连续性静脉-静脉血液滤过治疗(HP/CVVH)、血浆置换(PE)联合连续性静脉-静脉血液滤过治疗(PE/CVVH)对高脂血症性重症急性胰腺炎(HLSAP)的治疗价值及效果评价。 方法 将68例HLSAP患者随机分为CVVH组、HP+CVVH组和PE+CVVH组,均予重症急性胰腺炎常规治疗,并分别予以单纯CVVH、HP+CVVH、PE+CVVH治疗。比较治疗前和治疗72 h后三组患者生命体征、APACHEⅡ评分、甘油三酯(TG)、C反应蛋白(CRP)、重要脏器功能指标变化值；CT检查评价治疗前与治疗1周后CT严重程度指数(CTSI)变化；记录治疗1周内主要并发症发生率、平均住院天数及死亡率。 结果 三组患者治疗前各项指标差异无显著性。但各组患者治疗后各项指标均有好转(P<0.05),治疗72 h后三组间APACHEⅡ评分、血和尿淀粉酶比较差异均无统计学意义(P>0.05)；HP+CVVH、PE+CVVH两组与CVVH组比较其余实验室指标改善更明显(P<0.05)。治疗1周后三组患者CTSI均较治疗前下降(P<0.05),且HP+CVVH组和PE+CVVH组较CVVH组改善更明显(P<0.05)。HP+CVVH组和PE+CVVH组较CVVH组临床情况更好,死亡率低,住院时间短(P<0.05)。 结论 HP、PE联合CVVH治疗较单纯CVVH治疗能够更快降低患者血TG水平,改善临床症状,可减少系统炎性反应综合征及多器官功能障碍综合征/多器官功能衰竭的发生,有效降低死亡率,减少住院时间。

摘要:目的 通过对Shiomi等提出的以脂质堆积为核心的斑块易损指数计算方法进行优化,以期更全面、客观地对实验性动脉粥样硬化斑块不稳定性进行评估。方法 实验分为对照组(C57BL/6小鼠)和模型组(LDLR－/－和ApoE－/－小鼠),每组6只动物。对照组给予正常饲料,模型组给予高脂饲料,25周后处死动物,分离主动脉根部和主动脉弓,经OCT包埋后连续切片,分别进行H&E、苦味酸-天狼猩红、油红O、阿利新蓝染色,内皮细胞及平滑肌细胞免疫荧光染色、基质金属蛋白酶及巨噬细胞免疫组织化学染色。对Shiomi等提出的斑块易损指数公式进行改良,在计算公式分子中增加影响斑块不稳定性因素,同时在分母中增加影响斑块稳定性指标,优化动脉粥样硬化斑块易损指数计算公式。通过对比两个公式对LDLR－/－小鼠主动脉根部和无名动脉斑块稳定性的判断,考察评估优化后计算公式的可靠性。之后采用优化公式对高脂饮食ApoE－/－小鼠和LDLR－/－小鼠主动脉不同部位斑块稳定性进行评价,对比两种小鼠动脉粥样硬化进展的差异。结果 模型组小鼠主动脉不同部位斑块破损面积,脂质沉积,胶原蛋白、蛋白多糖和基质金属蛋白酶分布,巨噬细胞浸润,纤维帽内皮细胞覆盖率和平滑肌细胞覆盖率与对照组相比发生明显改变。在此基础上优化了基于多指标病理染色的斑块不稳定性计算公式。通过计算发现,ApoE－/－小鼠和LDLR－/－小鼠无名动脉斑块易损指数明显大于主动脉根部；而在相同部位,ApoE－/－小鼠斑块易损指数明显高于LDLR－/－小鼠。结论 本研究所优化的基于多指标组织病理学染色的斑块易损指数计算公式,涵盖多种影响斑块不稳定性的重要因素,可对斑块不稳定性进行准确评估。该方法简单、全面、可靠,具有较大实用价值。

摘要:目的 采用网络药理学方法探讨丹参干预动脉粥样硬化的分子机制。方法 在中医药数据库和文献收集筛选丹参有效成分信息的基础上,应用PharmMapper预测化学成分的已知靶点与潜在靶点,应用DAVID数据库进行KEGG通路注释分析和GO富集分析。根据丹参的潜在靶点预测和富集分析的结果运用Cytoscape构建成分-预测靶点网络模型、成分-靶点-通路网络模型及成分-靶点-生物过程网络模型,并分析其作用机制。结果 丹参的16个化学成分返回了344个潜在靶点,并获得了6条相关信号通路和28个生物过程。其中生物过程可分为四个模块——保护内皮细胞功能、抗氧化作用、抗斑块形成、调理血脂水平。结论 这些发现体现了丹参对动脉粥样硬化干预的分子机制。不仅为丹参干预动脉粥样硬化的研究提供了理论依据以及为未来的相关研究提供了基础,同时对丹参等传统中药作用机制研究提供新的范式。

摘要:作为继一氧化氮和一氧化碳之后新发现的气体信号分子,硫化氢(H₂S)已引起国内外专家学者的广泛关注,并进行了大量生理学与病理生理学方面的研究。绝大多数学者认为H₂S对糖尿病及其微血管病变的发生发展起着重要作用。然而,到目前为止,人体中H₂S的生理功能和毒性作用仍不完全清楚,H₂S效应的大部分作用机制尚未完全阐明。本文就H₂S对3种常见的糖尿病微血管病变(糖尿病视网膜病变、糖尿病神经病变、糖尿病肾病)的作用及其机制研究进展作一综述,以期为糖尿病微血管病变的研究和治疗提供新的理论依据。

摘要:动脉粥样硬化是威胁人类健康的最严重的心脑血管疾病之一,阐明动脉粥样硬化发生机制和防治动脉粥样硬化已成为医学界研究的热点。颈动脉粥样硬化在一定程度上可反映全身动脉粥样硬化斑块发展状况,由于颈动脉位置表浅,易于探及检查,已被证实可作为了解和评估全身动脉粥样硬化的“窗口”。经研究证实,内皮祖细胞可修复受损内膜,延缓动脉粥样硬化的发生发展。本文针对颈动脉粥样硬化患者内皮祖细胞数量和功能的变化,以及内皮祖细胞对该病发生发展的作用进行概括和总结,为动脉粥样硬化的治疗与防治提供新的策略。

摘要:中叶素(IMD)是近年来发现的一种新的心血管调节肽,是降钙素基因相关肽(CGRP)超家族新成员。既往研究发现,中叶素在缺血再灌注中具有重要的保护作用。流行病学和临床研究显示,糖尿病人群缺血性心脏病(心绞痛、心肌梗死)、充血性心力衰竭及粥样硬化性病变所致疾病的发生率及其严重程度远高于非糖尿病人群。因此,中叶素是否在糖尿病合并冠心病患者中具有保护作用有待探讨。文章就中叶素的生物学特性以及在糖尿病合并冠心病中的作用从基础研究到临床研究进展做一综述。

摘要:动脉粥样硬化是心脑血管疾病的病理基础,慢性炎症反应、内皮功能损伤在其发生发展过程中起重要作用。近年来发现了一些新的内皮损伤与炎症标志物,包括Endoglin(CD105)、Endocan、Apelin、趋化素等。本文主要介绍Endoglin在动脉粥样硬化中的作用。