摘要:目的 比较心肌组织样软基质与玻璃硬基质对小鼠骨髓CD34⁺及CD34－细胞亚群向内皮系细胞分化的差异。方法 利用原子力显微镜检测正常Balb/c小鼠心肌组织硬度(弹性模量≈15 kPa),采用聚丙烯酰胺凝胶制备心肌样软培养基底铺于玻璃培养皿中,利用密度梯度离心法及免疫磁珠分选法收集小鼠骨髓CD34⁺及CD34－细胞,分别于心肌样软基底及玻璃硬基底培养皿(弹性模量＞1 GPa)中进行细胞培养,培养7天后,利用激光共聚焦显微镜观测内皮细胞系表面标志物、细胞形态及细胞骨架。结果 在两个硬度培养体系中,CD34⁺细胞均表现出较CD34－细胞更高的乙酰化低密度脂蛋白(ac-LDL)/荆豆凝集素I(UEA-1)双阳性比例(P＜0.01),以及更高的CD31、vWF、Flk-1和VE-cadherin等内皮细胞系标记物表达(P＜0.05)。就两种细胞亚型的分化差异而言,心肌样软基质较玻璃硬基质表现出更高的细胞分化诱导效率,这可能与软基质上CD34⁺细胞表现出更为浓集的黏着斑和F-actin有关。结论 与玻璃硬基质相比,心肌样软基质能更为有效的诱导CD34⁺细胞亚群向内皮系分化；软基底培养体系是一种更佳的探讨细胞生物行为的培养体系。

摘要:目的 探讨温阳通脉方是否通过Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号转导通路,调节水通道蛋白(AQP)的表达,发挥对缺血再灌注心肌组织的保护作用。方法 将30只雄性SD大鼠随机分为5组,每组6只:假手术组、模型组及温阳通脉方低剂量治疗组、中剂量治疗组和高剂量治疗组。将大鼠灌胃给药14天后,结扎心脏左冠状动脉前降支,按缺血30 min再灌注120 min的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型。全自动生化分析仪检测各组大鼠的血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)；心电图检测大鼠ST段抬高情况；HE染色观察心脏组织病理形态学变化；免疫组织化学染色检测心肌组织中AQP1、AQP4蛋白的表达；Western blot检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、AQP1、AQP4的蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠血清中的CK-MB、LDH含量显著上升(P＜0.01),缺血30 min与再灌注120 min后心电图的ST段显著抬高(P＜0.01),HE染色显示模型组的心肌细胞损伤严重,AQP1、AQP4免疫组织化学表达明显增多(P＜0.01),JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、AQP1、AQP4的蛋白表达均明显升高(P＜0.01)。与模型组相比,给药大鼠CK-MB、LDH水平明显降低(P＜0.01),缺血30 min与再灌注120 min后的ST段均降低(P＜0.01),心肌细胞损伤均可见不同程度减轻,AQP1、AQP4免疫组织化学表达明显减少,JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3整体的表达呈升高趋势,尤其是p-JAK2和p-STAT3的表达(P＜0.01),AQP1、AQP4的水平均有不同程度降低(P＜0.01)。结论 温阳通脉方的心肌保护作用可能与激活JAK2/STAT3信号通路,下调AQP1和AQP4的表达有关。

摘要:目的 研究miR-206对血管内皮细胞增殖的影响及其机制,为临床动脉硬化疾病提供新的诊疗方向。方法 收集临床病理首次确诊为糖尿病下肢动脉粥样硬化病变的患者病变处动脉内皮组织和正常内皮组织,qPCR检测miR-206的表达；而后通过基础实验研究将HUVEC分为未转染组、miR-206-mimics组和miR-206-inhibitor组,观察转染效率；三组细胞均采用CCK8检测细胞增殖情况,Transwell进行迁移能力评估,流式细胞仪检测细胞周期情况,Western blot检测Cx43表达情况。结果 糖尿病动脉硬化患者下肢动脉(均为胫腓动脉)病变处内皮细胞miR-206的mRNA表达较正常组织内皮细胞明显增加(P<0.05)；HUVEC转染miR-206-mimics后,miR-206表达显著升高(P＜0.05),转染miR-206-inhibitor后,miR-206表达明显降低(P<0.05)；在HUVEC转染miR-206-mimics 24 h后,细胞增殖率相比于未转染组和miR-206-inhibitor组要明显降低(P<0.05)；在HUVEC转染miR-206-mimics后,细胞迁移能力明显降低(P<0.05),细胞周期在G2期发生阻滞,而HUVEC 转染miR-206-inhibitor后细胞迁移能力提高(P<0.05)；miR-206-mimics 组细胞Cx43表达明显降低,而miR-206-inhibitor组细胞Cx43表达明显增加。结论 miR-206可以抑制血管内皮细胞的增殖,将内皮细胞阻滞在有丝分裂G2期,并且抑制内皮细胞迁移,其对内皮细胞增殖的影响可能是通过调节Cx43表达来实现的。

摘要:目的 探讨西红花苷对异丙肾上腺素所致心肌缺血缺氧模型大鼠的保护作用,并验证其作用机制是否与C/EBP-β/PGC-1α/UCP3信号通路有关。方法 皮下注射异丙肾上腺素建立大鼠缺血缺氧模型后,分别灌胃给予西红花苷不同剂量干预( 25、50、100 mg/kg)。比较各组大鼠血清LDH-1、CK-MB、MDA、TNF-α、NO水平以及大鼠CI及心肌梗死面积；比较各组心肌Akt、ERK1/2、C/EBP-β、PGC-1α、UCP3蛋白及基因表达水平。结果 与空白对照组比较,模型组大鼠存活率极显著降低(P<0.01),血清LDH-1、CK-MB、MDA、TNF-α、NO水平、CI及心肌梗死面积均极显著升高(P<0.01)；心肌纤维排列紊乱且炎性细胞浸润明显；心肌Akt、ERK1/2蛋白表达均显著升高(P<0.05),C/EBP-β、UCP3蛋白及mRNA表达均极显著升高(P<0.01),PGC-1α蛋白及mRNA表达极显著降低(P<0.01)。与模型组比较,阳性对照组大鼠存活率显著升高(P<0.05),血清LDH-1、CK-MB、MDA、TNF-α、NO水平、心肌梗死面积均极显著降低(P<0.01),CI显著降低(P<0.05),心肌纤维排列整齐且炎性细胞浸润明显减轻；Akt、ERK1/2蛋白表达均极显著升高(P<0.01),C/EBP-β蛋白及mRNA表达均极显著降低(P<0.01),PGC-1α蛋白表达极显著升高(P<0.01)而mRNA表达显著升高(P<0.05),UCP3蛋白表达无差异而mRNA表达显著升高(P<0.05)。与模型组、对照组比较,西红花苷中、高剂量均可显著提高大鼠存活率(P<0.05)；显著降低大鼠血清LDH-1、CK-MB、MDA、TNF-α及NO水平(P<0.05)；显著降低CI及心肌梗死面积(P<0.05)；减轻炎症浸润且提高心肌细胞完整程度；显著升高心肌Akt、ERK1/2蛋白表达水平(P<0.05)；显著降低心肌C/EBP-β蛋白及mRNA表达水平(P<0.05),显著升高PGC-1α、UCP3蛋白及mRNA表达水平(P<0.05)；其中高剂量组综合效果较好。结论 西红花苷对大鼠缺血缺氧损伤心肌具有明显的保护作用,其机制可能与调节C/EBP-β/PGC-1α/UCP3信号通路相关。

摘要:目的 观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对人主动脉血管平滑肌细胞透明质酸(HA)合成的影响,并初步探究其分子机制。方法 体外培养人主动脉血管平滑肌细胞T/G HAVSMC,使用不同浓度(10、25、50、75、100 mg/L)ox-LDL对T/G HAVSMC细胞进行干预,使用CCK-8法检测细胞存活率,并进行分组分析。采用浓度为25和50 mg/L的ox-LDL干预T/G HAVSMC细胞48 h,并设置天然LDL(native-LDL,N-LDL)组(50 mg/L的N-LDL)和对照组,使用HPLC法测定HA含量,使用实时定量PCR检测透明质酸合成酶2(HAS2)和透明质酸合成酶3(HAS3)的mRNA表达,使用Western blot法检测凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)、氧化脂蛋白的清道夫受体(SR-PSOX)以及脂肪酸转位酶(CD36)的表达。结果 低于100 mg/L的ox-LDL对T/G HAVSMC细胞无明显细胞毒性。25 mg/L和50 mg/L ox-LDL组HA含量、HAS2和HAS3的mRNA表达量明显高于N-LDL组和对照组(P<0.05),N-LDL组与对照组组间差异无显著性(P>0.05)。25 mg/L和50 mg/L ox-LDL组LOX-1表达明显高于N-LDL组和对照组(P<0.05),而LRP-1、SR-PSOX和CD36表达无明显变化(P>0.05)。结论 ox-LDL能够诱导人主动脉平滑肌细胞中HA的合成,其机制可能与结合LOX-1有关。

摘要:目的 探讨GATA6基因启动区－493(rs144923558)G/A、－172(rs146748749)G/A 2个位点单核苷酸多态性(SNP)与急性心肌梗死(AMI)之间的关系及其相关的危险因素。方法 采用病例-对照研究方法,收集328例AMI患者和344例正常对照；应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术结合DNA测序后的序列比对进行数据统计；运用Hardy-Weinberg平衡检验后,应用χ²检验进行相关分析；利用Logistic回归对多种危险因素以及2个SNP位点与AMI发病进行关联性分析；利用Haplovview4.2软件和SHEsis网站进行连锁不平衡及单倍体分析。结果 2个SNP位点共检测出3种基因型为GG、GA和AA,其基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),同时在AMI组与对照组间差异无显著性(P>0.05)。多因素Logistic回归分析:增龄、高血压病、吸烟、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)和甘油三酯(TG)升高是AMI发病的独立危险因素(P<0.05),HDLC为保护因素(P<0.05)。在显性、隐性和加性3种不同遗传模式下进行Logistic回归分析发现,2个SNP位点与AMI发病无关联性。进行连锁不平衡和单倍型分析提示,该2个SNP位点处于同一个连锁不平衡区域(D′=1.000,r²=1.000),单倍型GG和AA均未增加AMI易感性(P>0.05)。结论 GATA6基因启动区－493(rs144923558)G/A与－172(rs146748749)G/A两个SNP位点为完全连锁不平衡,其中GG为主要单倍型。该2个SNP位点及其单倍体型与AMI发病无相关性,但提供了GATA6基因启动区多态性的群体遗传学资料。

摘要:目的 探讨急性脑梗死(ACI)患者血清microRNA-124(miR-124)和microRNA-182(miR-182)的表达水平,及二者联合检测对脑梗死诊断及预后评估的价值。方法 选取ACI患者120例作为观察组,同期健康体检者80例作为对照组。观察组患者根据脑部梗死体积进一步分为小梗死组(＜5 cm³)、中梗死组(≥5 cm³且≤10 cm³)和大梗死组(＞10 cm³)。检测所有入组患者血清miR-124和miR-182的相对表达量,通过受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-124和miR-182以及二者联合诊断ACI的价值。ACI患者随访1年,分析血清miR-124和miR-182与预后的相关性。结果 观察组患者血清miR-124和miR-182的相对表达量分别为(2.63±0.59)和(2.69±0.69),显著高于对照组[分别为(1.08±0.32)和(1.07±0.46)](P＜0.05)。中梗死组和大梗死组miR-124相对表达量显著低于小梗死组(P＜0.05),而miR-182相对表达量显著高于小梗死组(P＜0.05)。Pearson相关分析显示,miR-124相对表达量与脑部梗死体积呈负相关(r=－0.613,P＜0.01),miR-182相对表达量与脑部梗死体积呈正相关(r=0.761,P＜0.01)。miR-124以1.34为截断值时诊断ACI的灵敏度为73.33%,特异度为90.00%,ROC曲线下面积为0.775(95%CI 0.715~0.834,P=0.030)；miR-182以1.45为截断值时诊断ACI的灵敏度为66.67%,特异度为87.50%,ROC曲线下面积为0.675(95%CI 0.602~0.749,P=0.038)；二者联合诊断的灵敏度为88.33%,特异度为86.25%,ROC曲线下面积为0.811(95%CI 0.756~0.866,P=0.028)。联合检测ROC曲线下面积显著高于单项检测(P＜0.05)。随访预后发现,联合诊断为阳性的患者在治疗后8个月、12个月的死亡率显著高于联合诊断为阴性的患者(P＜0.05)。结论 miR-124与miR-182在ACI患者血清中呈高水平表达,二者联合检测对ACI的诊断及预后评估有较好的价值。

摘要:目的 研究血清白蛋白对射血分数(EF)保留型及中间型心力衰竭(HFpEF和HFmrEF)患者易损期预后的影响。方法 连续选取心力衰竭患者151例,其中射血分数保留型(HFpEF)85人,射血分数中间型(HFmrEF)66人；选取同期住院非心力衰竭患者151例作为对照组。收集患者临床资料并进行随访,随访终点事件为全因死亡和心力衰竭再入院。比较两组患者基线资料,并进行单因素Logistics回归分析,确定心力衰竭患者危险因素,对心力衰竭组患者随访结果作Cox回归分析和Kaplan-Meier生存分析以评价血清白蛋白对易损期预后的影响。结果心力衰竭组患者血清白蛋白水平显著低于非心力衰竭患者(t=－6.431,P<0.001),单因素Logistic回归分析结果OR值为0.162(95%CI 0.098~0.268,P<0.001),提示血清白蛋白是HFpEF和HFmrEF患者的保护因素。Cox回归分析和Kaplan-Meier生存分析显示,血清白蛋白与HFpEF和HFmrEF患者易损期的预后有关,其中单因素COX分析HR=0.1,5%CI(0.188~0.655),P=0.001,多因素COX分析HR=0.9,5%CI(0.225~0.858),P=0.016, 均有统计学意义,低白蛋白组和高白蛋白组生存曲线的差异有统计学意义(log-rank检验,χ²=11.881,P=0.001)。结论 血清白蛋白可能是HFpEF和HFmrEF患者的保护因素,血清白蛋白越低,易损期的预后越差。

摘要:目的 探讨血清Betatrophin在新疆哈萨克族及汉族冠状动脉病变中的评估价值。方法 选择经动脉造影检查后且无糖尿病的患者为研究对象,其中哈萨克族108例,汉族115例,采用Gensini积分系统评估冠状动脉病变程度,并依据Gensini积分将研究对象分为病例组与对照组,其中病例组132例,对照组91例；采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清Betatrophin水平,AB-ELISA法测定血清ANGPTL3含量,ELISA法测定血清脂蛋白脂肪酶(LPL)含量,并检测两组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FBG)等水平。结果 ①与对照组比较,病例组的体质指数(BMI)、TC、TG、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平升高(P均＜0.05)；与汉族病例组比较,哈萨克族病例组的BMI、TC、TG、LDLC水平升高(P均＜0.05)。②病例组与对照组的空腹胰岛素(FINS)、FBG、HOMA-IR、HOMA-β差异无显著性(P均＞0.05)。③哈萨克族病例组血清Betatrophin、ANGPTL3、LPL均高于汉族病例组(P均＜0.05)。④哈萨克族病例组Gensini积分与TC、TG、LDLC、Betatrophin呈正相关(r分别为0.204、0.454、0.452、0.446,P均＜0.05)；汉族病例组Gensini积分与BMI、TC、TG、LDLC、Betatrophin呈正相关(r分别为0.438、0.195、0.296、0.357、0.393,P均＜0.05)；多元线性回归分析显示TG、哈萨克族为Betatrophin增高的因素；Logistic回归分析显示BMI、LDLC、Betatrophin是影响汉族冠状动脉病变的因素,LDLC、Betatrophin、ANGPTL3、LPL是影响哈萨克族冠状动脉病变的因素。结论 Betatrophin水平升高可能加重新疆哈萨克族及汉族人群的冠状动脉病变,TG、哈萨克族可能是影响Betatrophin血清学水平的因素。

摘要:目的 探讨脑梗死患者血清微小RNA(miRNA)miR-181c、miR-128b表达水平及其与90天预后的相关性,为miRNA在脑梗死诊断和治疗上提供参考意义。方法 选取128例脑梗死患者以及同期108例健康体检者作为研究对象,分别作为研究组和对照组。比较两组研究对象的miR-181c和miR-128b表达水平,并分析miR-181c、miR-128b表达水平与疾病严重程度的相关性以及脑梗死相关危险因素；根据90天随访的预后情况分为预后良好组和预后不良组,并对影响90天预后的相关因素进行单因素和Logistic回归分析,探讨影响疾病发生及预后的独立影响因素。结果 研究组吸烟、高血脂、高血压、糖尿病以及心房颤动比例明显高于对照组(P<0.05),研究组患者miR-181c、miR-128b表达水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),Logistic回归分析结果显示糖尿病、miR-181c、miR-128b表达水平是脑梗死的独立危险因素(P<0.05)；Spearman相关性分析显示急性脑梗死患者病情严重程度与血清miR-181c和miR-128b水平呈正相关(r=0.867,P=0.005；r=0.885,P=0.002)；预后不良组患者发生高血压、糖尿病、心房颤动的比例和入院时NIHSS评分以及血清miR-181c、miR-128b水平均显著高于预后良好组(P<0.05),Logistic回归分析结果显示入院时NIHSS评分及血清miR-181c、miR-128b水平均与脑梗死患者90天预后存在密切相关性(P<0.05)。结论 脑梗死患者血清miR-181c、miR-128b表达水平显著高于健康人群,糖尿病、miR-181c、miR-128b表达水平是脑梗死的危险因素(P<0.05),miR-181c、miR-128b表达水平与患者脑梗死严重程度存在显著正相关,且两者表达水平以及NIHSS评分均与急性脑梗死患者90 天预后存在密切联系。

摘要:目的 通过对睡眠时间与高血压发生风险进行系统性评价,为高血压防控管理提供科学依据。方法 检索数据库为Pubmed、Embase、万方数据库、维普中文期刊数据库及中国期刊全文数据库,筛选关于睡眠时间与高血压相关性的横断面研究文献,检索时间为2012年3月至2018年9月,双人提取信息并评价文献质量,采用Stata12.0软件进行Meta分析,并进行异质性、敏感性及发表偏倚分析等。结果 符合纳入标准的文献17篇,样本量共计959 358例,短睡眠时间增加高血压患病风险,当睡眠时间<7 h高血压风险会增高55%(OR=1.55,95%CI:1.28～1.87,P<0.001),睡眠时间>7 h未显示与高血压存在关联(OR=1.02,95%CI:0.78～1.32,P>0.05)。亚组分析发现,地区人群不同和睡眠时间定义不同是异质性主要来源。漏斗图进行Begg's和Eegg's检验显示结果不完全一致。敏感性分析提示本研究结果稳定性较好。结论 成人短时间睡眠可增加高血压发病风险,而长时间睡眠未提示与高血压发病相关。

摘要:动脉粥样硬化(As)是心脑血管疾病的重要病理基础。近年来,许多研究表明表观遗传机制在As的调控中也起着重要作用。被称为DNA第6种碱基的5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)是染色体10/11易位家族蛋白(TET)介导DNA去甲基化产生的一种重要表观遗传修饰,参与多种生物学过程。最近研究表明,TET2及其介导的羟甲基化修饰不仅参与血管平滑肌细胞表型转化调控,还与内皮功能、炎症免疫反应等As的关键因素密切相关。在As斑块中也检测到TET2和5hmC明显缺失,缺失水平与损伤程度呈正相关。TET2和羟甲基化修饰可能在As的病理过程中发挥重要保护作用。本文将介绍TET2的结构及其功能、5hmC的研究概况及检测技术突破,重点阐述TET2及其介导的羟甲基化修饰在As中的作用及其机制,为As的有效防治提供新思路和新靶点。

摘要:越来越多的证据表明,慢性炎症与高血压、动脉粥样硬化等心血管疾病密切相关。半胱天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)亚型Caspase-1、4、5和11被称为炎症Caspase,通过促进炎症因子的成熟与释放,诱导放大炎症反应,激活固有免疫应答。炎症Caspase作用机制包括两方面,一方面激活模式识别受体NLRP3炎症小体,促进炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的剪切成熟,另一方面剪切Gasdermin D形成具有膜上打孔作用的N端,导致细胞焦亡,促进炎症因子释放。文章就炎症Caspase在心血管疾病中的作用进行综述。

摘要:随着对动脉粥样硬化(As)的深入研究,促进易损斑块的稳定性成为As新的治疗理念。在As“由内而外”学说中血管内膜的病理改变成为始动因素,然而近年研究表明外膜新生滋养血管(VV)在As“由外向内”发病机制中起到关键作用,总之,对于As的治疗已从保护血管内膜转变为调节外膜VV。

摘要:动脉粥样硬化(As)是冠心病、脑卒中、外周血管疾病的主要致病原因。如今有多种学说对其发病机制进行阐述,均未阐明具体致病机理。目前临床药物治疗主要以抗血小板聚集、降脂、抗凝及溶栓为主,但对血管内皮的保护却鲜有作用,特异性不佳。中药红景天苷(SAL)在动物模型实验中具有显著的抗As作用。大量机制研究也证实SAL能明显减轻血管内皮细胞损伤、抑制内皮凋亡、延缓内皮衰老、抑制炎症及应激反应、抗泡沫细胞形成并抑制其凋亡的发生、防止血管平滑肌细胞过度增殖、降低血液黏稠度、阻止血栓形成、稳定斑块,从而保护血管系统,抑制As的发生、发展。因此,SAL有望成为阻止As从发生、发展到恶化的整个进程的重要治疗手段。本文综合了近年来SAL干预As的机制研究进展,旨在为进一步的科研和临床应用提供参考价值。