摘要:环状RNA(circRNA)是一类新型内源性非编码RNA,广泛存在于真核生物体中,因其含量丰富、序列保守、结构稳定等特性,是近年来热门的基因表达调节因子。越来越多的研究表明circRNA在影响内皮完整性、血管平滑肌细胞和免疫炎症细胞的功能,以及在驱动动脉粥样硬化(As)斑块起始和稳定中发挥重要作用,因此其可能作为As新型诊断生物标志物和治疗靶标。因此,文章就circRNA在As中研究现状,综述其在As中的功能以及调节机制。

摘要:目的 研究环状RNA circRNA_005647抑制心肌肥厚相关基因表达的作用机制。方法 建立血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)灌注诱导的心肌肥厚小鼠模型。原代分离获得C57BL/6乳小鼠心肌细胞(NMVC),AngⅡ处理NMVC建立心肌细胞肥大模型。利用NMVC,分别感染circRNA_005647重组腺病毒(rAd-circRNA_005647)和转染miR-99b-5p模拟物来研究对NMVC肥大的影响。通过双荧光素酶报告基因实验和RNA Pull-down实验验证circRNA_005647与miR-99b-5p的结合作用。实时荧光定量PCR和Western blot检测NMVC中心肌肥厚相关基因的mRNA和蛋白表达水平。结果 在AngⅡ诱导的小鼠心肌肥厚模型和心肌细胞肥大模型中,circRNA_005647及其宿主基因肌球蛋白IXA(Myo9a)表达升高。过表达circRNA_005647可抑制AngⅡ诱导的NMVC中肥厚相关基因心房钠尿肽(Anp)和肌球蛋白重链7(Myh7)基因表达升高。circRNA_005647与miR-99b-5p间存在结合作用。过表达circRNA_005647可抑制miR-99b-5p促心肌细胞肥大的作用。结论 circRNA_005647通过结合miR-99b-5p发挥抑制心肌细胞肥大的作用。

摘要:目的 探讨miR-320对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)内皮间质转化(EndMT)的影响及其调控机制。方法 用miR-320 mimics或miR-320 inhibitor处理HUVEC。Western blot检测内皮细胞标记物血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)、血管内皮钙黏蛋白(VE-Cadherin)及间质细胞标记物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)的表达；划痕实验、Transwell实验检测miR-320对HUVEC迁移的影响；罗丹明鬼笔环肽染色检测miR-320对HUVEC细胞骨架的影响；噻唑蓝法检测细胞增殖；流式细胞仪检测细胞周期；Western blot检测miR-320对SRY相关高迁移率族蛋白4(SOX4)表达的影响。结果 miR-320 mimics上调HUVEC的VE-Cadherin、CD31表达,下调Vimentin、α-SMA表达；miR-320 mimics使HUVEC细胞骨架微丝变细,应力纤维减少,细胞迁移能力减弱,但增殖能力无明显改变。miR-320 inhibitor下调HUVEC的VE-Cadherin、CD31表达,上调Vimentin、α-SMA表达；miR-320 inhibitor使HUVEC微丝增粗,应力纤维增多,细胞迁移能力增强。miR-320 mimics下调SOX4的表达,miR-320 inhibitor上调SOX4的表达。结论 miR-320通过下调SOX4的表达抑制HUVEC的EndMT。

摘要:目的 观察miR-181a-5p对动脉钙化细胞模型的影响,探讨其可能的作用机制。方法 培养人主动脉平滑肌细胞(HASMC),经成骨样分化诱导后使用茜红素染色检测细胞成骨样分化的程度,采用real-time PCR检测成骨样分化标志基因骨钙素(OCN)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和碱性磷酸酶(ALP)的mRNA表达变化,以及miR-181a-5p的表达变化,分析miR-181a-5p与成骨样分化相关基因表达水平的相关性。miR-181a-5p mimic转染用于上调HASMC内miR-181a-5p的表达。使用TargetScan数据库预测miR-181a-5p发挥作用的靶基因。使用real-time PCR检测miR-181a-5p过表达后对靶基因表达的影响。结果 HASMC经诱导成骨样分化后,茜红素染色阳性区域和细胞内钙含量逐渐增加,细胞中成骨样分化相关基因OCN、RUNX2和ALP的表达随时间延长逐渐升高,而miR-181a-5p的表达逐渐下降(P＜0.05)。相关性分析显示miR-181a-5p的表达与OCN、RUNX2和ALP的表达均呈负相关(P＜0.05)。使用miR-181a-5p mimic转染HASMC后细胞内miR-181a-5p的表达高于对照mimic组,细胞内钙含量及RUNX2和OCN的表达均低于对照mimic组(P＜0.05)。TargetScan数据库预测结果显示miR-181a-5p可与促成骨样分化基因丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)和丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)的3′UTR区结合,miR-181a-5p mimic组HASMC中靶基因MAPK1和MAPK8的表达显著下调(P＜0.05)。结论 血管平滑肌细胞成骨样分化时下降的miR-181a-5p可抑制成骨样分化,其可能的机制是抑制促钙化信号转导分子MAPK1和MAPK8的表达。

摘要:泡沫细胞的形成与积累是动脉粥样硬化的标志,研究发现靶向泡沫细胞的形成在动脉粥样硬化的治疗与预防中具有重要作用。对动脉粥样硬化相关微小RNA(miRNA)的研究表明,miRNA可直接靶向胆固醇代谢中相关蛋白的表达,调节泡沫细胞的形成。且近年来对循环miRNA的研究发现,部分循环miRNA有望成为抑制泡沫细胞形成的新靶点。文章综述了miRNA对泡沫细胞形成各阶段的影响,并讨论了循环miRNA在泡沫细胞形成中的潜在作用。

摘要:长链非编码RNA H19(long non-coding RNA H19,H19)在腹主动脉瘤中过表达。在多种血管疾病模型中发现,H19调节多种微小RNA(如miR-let-7、miR-29、miR-21等)参与动脉硬化、平滑肌细胞凋亡和炎症反应等病理生理过程,与腹主动脉瘤的发生发展关系密切。文章就H19调节微小RNA影响腹主动脉瘤形成的潜在机制进行综述。

摘要:目的 探讨琥珀酸对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)焦亡的影响及其调控机制。方法 用琥珀酸类似物琥珀酸二乙酯(DS)处理HUVEC 24 h,比色法检测细胞内琥珀酸含量,Western blot检测细胞焦亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D N端(GSDMD-N)的含量；ATP测定试剂盒以及活性氧(ROS)荧光探针分别检测琥珀酸对HUVEC的ATP以及ROS生成的影响。ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)检测ROS在琥珀酸诱导HUVEC焦亡中的作用。琥珀酸氧化抑制剂丙二酸二甲酯(DMM)检测琥珀酸氧化代谢对ROS产生的影响。结果 DS促HUVEC内琥珀酸蓄积,上调焦亡相关蛋白Caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD-N和NLRP3的表达,抑制ATP生成并上调ROS产生。NAC抑制琥珀酸诱导的ROS生成,并下调上述焦亡相关蛋白的表达。DMM下调琥珀酸诱导的ROS产生以及HUVEC的焦亡。结论 琥珀酸通过氧化代谢上调ROS生成,进而促进HUVEC焦亡。

摘要:目的 探讨miR-21及其下游PTEN/Akt信号通路在白藜芦醇促进大鼠骨髓源性内皮祖细胞(EPC)体外成血管能力中的作用。方法 采用密度梯度离心法分离大鼠四肢骨髓的单个核细胞,培养于含10%胎牛血清的EGM-2MV完全培养基中诱导分化成EPC,实验用3~5代的EPC。白藜芦醇(20 μmol/L)干预12 h后,采用Matrigel胶检测EPC的体外成血管能力；实时荧光定量PCR检测miR-21及PTEN基因的表达情况；干扰miR-21表达后检测EPC的体外成血管能力；双荧光素酶报告基因检测miR-21对PTEN的靶向调控；Western blot检测PTEN蛋白表达情况以及Akt磷酸化水平。结果 白藜芦醇(20 μmol/L)明显促进EPC的体外成血管能力(P＜0.05),抑制了miR-21(P＜0.01)的表达,然而却促进了miR-21下游靶基因PTEN的基因(P＜0.01)及蛋白表达(P＜0.05),进而抑制PTEN下游信号分子Akt的磷酸化水平。双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-21可与PTEN mRNA的3′UTR靶向结合(P＜0.01)。结论 miR-21调控了白藜芦醇促EPC的体外成血管能力,其机制可能是通过PTEN/Akt信号通路来发挥的,该研究结果揭示了白藜芦醇调控EPC功能一种新的细胞内信号机制。

摘要:目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAP4K4)在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞损伤中的作用及其机制。方法 采用100 mg/L ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)建立细胞损伤模型。RT-PCR检测HUVEC中MAP4K4的mRNA表达水平。Western blot法测定MAP4K4、Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase-3(C-Caspase-3)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达量。CCK8法检测细胞存活率。ELISA试剂盒检测细胞凋亡。DCFH-DA用于检测细胞活性氧(ROS)水平。丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性分别用其试剂盒进行检测。结果 ox-LDL能明显上调MAP4K4的表达。另外,沉默MAP4K4能够显著增加细胞活性,且抑制ox-LDL诱导的细胞凋亡；同时可抑制Bax和C-Caspase-3的蛋白表达并促进Bcl-2的蛋白表达量。此外,下调MAP4K4能够明显抑制ROS生成及MDA含量,并增加抗氧化酶SOD和CAT活性。机制研究显示沉默MAP4K4能够激活PPARγ/ABCA1信号通路。结论 沉默MAP4K4通过激活PPARγ/ABCA1信号通路抑制ox-LDL诱导的HUVEC细胞凋亡和氧化应激从而减轻血管内皮细胞损伤,为治疗As提供理论依据。

摘要:目的 研究急性冠状动脉综合征(ACS)三支病变患者心电图aVR导联T波形态预测左心功能变化的意义。方法 160名冠状动脉造影明确的ACS三支病变患者按照入院心电图aVR导联T波形态分为T波直立组(72例)和T波倒置组(88例),比较两组一般资料、左心功能、冠状动脉病变及临床结局情况。结果 与T波倒置组比较,T波直立组左心室射血分数(LVEF)较低,LVEF＜50%占比、血清N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、Gensini评分、Syntax评分及Syntax≥23分占比较高,两组比较均有统计学意义(P＜0.05)。T波直立组较倒置组使用升压药患者例数更多、平均住院时间更长(均P＜0.05)。Spearman相关分析显示,aVR T波直立与LVEF呈负相关,与Gensini及Syntax评分、NT-proBNP、住院时长呈正相关(均P＜0.05)。多元Logistic回归分析示,aVR导联T波直立与LVEF(OR＝0.4,5%CI:1.007～1.030,P＜0.05)独立相关。结论 ACS三支病变患者中,aVR导联T波直立患者较T波倒置患者具有更低的LVEF值与较差的临床结局,aVR T波直立可评估ACS三支病变患者左心功能情况。

摘要:目的 探究冠状动脉钙化评分联合甘油三酯/高密度脂蛋白胆固醇(TG/HDLC)值对维持性血液透析患者心血管事件的筛查价值。方法 选取行维持性血液透析患者110例为研究对象,按是否发生心血管事件分为心血管病变组(n=40)和无心血管病变组(n=70),应用多层螺旋CT对受试者冠状动脉钙化程度进行评分,检测患者血清中TG、HDLC的含量,计算TG/HDLC值,采用受试者工作特征曲线分析冠状动脉钙化评分联合TG/HDLC值对维持性血液透析患者发生心血管事件的筛查价值。结果 心血管病变组体质量指数(BMI)、TG/HDLC值、冠状动脉钙化评分显著高于无心血管病变组,HDLC水平显著低于无心血管病变组(P＜0.05)；TG/HDLC值和冠状动脉钙化评分为维持性血液透析患者发生心血管疾病的独立风险因素；联合检测诊断效能最高,曲线下面积(AUC)为0.925,95%CI为0.869～0.981,显著优于单项检测。结论 冠状动脉钙化评分和TG/HDLC值是维持性血液透析患者心血管事件的独立风险因素,有助于筛选出维持性血液透析患者中有心血管疾病风险的患者。

摘要:目的 了解脑梗死合并颈动脉硬化住院患者随访1年的生存情况及影响因素,为延长患者生存期、降低死亡率提供循证依据。方法 纳入2017年4月—2018年8月于南华大学附属长沙中心医院收治的脑梗死合并颈动脉硬化住院患者548例并随访1年,根据其生存情况分为存活组与死亡组,对两组的临床特征进行比较,采用Cox比例风险回归模型分析影响其生存状况的因素。结果 548例患者随访期内共死亡36例,死亡率约6.57%。单因素分析结果显示婚姻状况、文化水平、心脏病、年龄以及甘油三酯是脑梗死合并颈动脉硬化住院患者随访期内死亡的危险因素(P＜0.05)。多因素Cox比例风险回归模型分析显示,婚姻状况(无配偶)(HR 1.736,95%CI 1.086～2.776)、心脏病(HR 2.343,95%CI 1.156～4.752)增加脑梗死合并颈动脉硬化住院患者死亡风险,文化水平高(HR 0.205,95%CI 0.044～0.952)降低其死亡风险。结论 无配偶、文化水平低及患有心脏病的脑梗死合并颈动脉硬化住院患者具有更高的死亡风险。出院后,家属要加强对无配偶及患有心脏病的脑梗死合并颈动脉硬化患者的综合照护及人文关怀,以降低其死亡风险。

摘要:目的 分析在冠心病合并糖尿病患者中应用生物可吸收聚合物涂层药物洗脱支架的有效性和安全性。方法 检索国内外数据库,检索对比生物可吸收聚合物涂层药物洗脱支架(BP-DES)与耐用聚合物涂层药物洗脱支架(DP-DES)在冠心病合并糖尿病患者应用的临床随机对照试验,主要结果为靶病变失败率、靶血管血运重建率、靶病变血运重建率以及心源性死亡率,用以评估有效性和安全性。结果 共纳入14项随机对照试验,其中3 855例患者应用BP-DES,2 916例患者应用DP-DES,平均随访时间为2.9年。BP-DES对比DP-DES在整体的靶病变失败率为13.5%比12.8%(RR:1.07,95%CI:0.88～1.29,P=0.50),靶病变血运重建率以及靶血管血运重建率在整体上无统计学差异,根据随访时间小于3年、随访3年以及随访时间超过3年分为3组进行亚组分析,结果表明各个亚组之间均无统计学差异。BP-DES对比DP-DES总的心源性死亡率为6.2%比5.4%(RR:1.10,95%CI:0.90～1.34,P=0.35),根据随访时间进行亚组分析均无统计学差异。结论 在冠心病合并糖尿病患者中,BP-DES对比DP-DES拥有类似的安全性和有效性。

摘要:动脉硬化的早期检查对于心血管疾病的防治有重要作用,无创的检测方法可以使动脉硬化的早期检查具有重要临床意义。脉搏波传导速度作为无创测量动脉硬化的指标,已获得医学界广泛认可。脉搏波传导速度的测量主要有张力测定法、示波法、超声成像法、光电容积描记法、生物阻抗容积描记法、磁共振成像法等方法。本文对这些技术和方法的优缺点及其研究进展进行了综述。

摘要:心肌纤维化(MF)以细胞外基质积聚、成纤维细胞活化、转化为肌成纤维细胞为特征,是心脏损伤后心脏重构的特征之一,MF包括两种基本类型:反应性纤维化和修复性纤维化,在心室重构的过程中,两种纤维化常合并存在,MF可导致充血性心力衰竭、恶性心律失常和猝死,成为心室重构持续发展和难以逆转的重要原因。一些研究表明,肠道菌群代谢产物,包括氧化三甲胺、短链脂肪酸、吲哚氧基硫酸盐和对甲酚硫酸盐等参与到心肌纤维化的过程中并起到了重要的作用,有望成为治疗心力衰竭的新靶点。本文将对肠道菌群代谢产物在心肌纤维化中的作用机制进行阐述,同时介绍通过干预肠道菌群改善心肌纤维化的研究进展。