摘要:目的 观察西罗莫司造成血管内皮钙超载引起细胞损伤并探讨其相关机制。方法 在西罗莫司处理和利阿诺定稳定利阿诺定受体通道的情况下,采用MTT法检测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞存活率,HE染色观察细胞形态,一氧化氮(NO)检测试剂盒测定培养液NO含量,Ca2＋敏感的荧光染料Fluo-3 AM标记胞质Ca2＋,分别采用流式细胞仪分析和激光共聚焦显微镜观察细胞内Ca2＋水平,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡率。结果 西罗莫司能降低细胞存活率(P<0.01)。西罗莫司500 nmol/L刺激24 h后,HE染色发现细胞肿胀,核固缩、核碎裂及胞浆空泡；NO含量降低,细胞内Ca2＋含量增高,线粒体膜电位降低,细胞凋亡率增加(P均＜0.01)。与西罗莫司500 nmol/L组相比,利阿诺定50 μmol/L干预组细胞存活率明显增加(P<0.01),细胞内Ca2＋含量降低(P<0.05),细胞培养液NO含量由28.33±4.18 μmol/L增至47.03±3.87 μmol/L(P<0.01),线粒体膜电位水平由0.24±0.03增至0.45±0.04(P<0.01),细胞凋亡率由43.3%±2.0%降至30.7%±0.9%(P<0.01)。结论 西罗莫司可能通过内质网利阿诺定受体途径增加细胞内Ca2＋水平,造成钙超载和线粒体损害,继而引起细胞凋亡。