摘要:目的 提取并纯化蛹虫草多糖(CMPS),分析相对分子质量分布,初步探讨其降胆固醇的作用机制。方法 通过热水提取-醇沉法分离CMPS,采用Sevage试剂、AB-8大孔吸附树脂进行纯化,应用高性能凝胶渗透色谱明确CMPS相对分子质量分布。模拟机体胃肠道环境,测定不同质量浓度CMPS结合胆酸盐能力；培养HepG2细胞,观察CMPS对肝细胞增殖率及细胞内胆固醇水平的影响,蛋白免疫印迹分析肝细胞内3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA-R)及甾醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)表达变化。结果 CMPS中相对分子质量为3 119 kDa的多糖含量最高；CMPS体外结合胆酸盐能力较强,与胆酸钠、牛磺胆酸钠及甘氨胆酸钠的结合率分别达到63%、62%和50%。细胞实验数据表明低于200 mg/L的CMPS干预HepG2细胞24 h没有抑制其增殖率。同时,在安全质量浓度范围内(＜200 mg/L),CMPS可显著下调肝细胞内SREBP-2和HMG-CoA-R蛋白表达,降低肝细胞内总胆固醇水平。结论 CMPS具有良好的体外降胆固醇活性。

摘要:为观察低密度脂蛋白和氧化型低密度脂蛋白对肝脂酶合成和肝脂酶活性的影响,将不同浓度的低密度脂蛋白、氧化型低密度脂蛋白与人肝癌细胞株HepG2细胞共同培养,用MTT法测定细胞增殖抑制率,用组织化学法测定细胞肝脂酶活性,用逆转录聚合酶链反应测定细胞肝脂酶mRNA的表达水平。结果发现,低密度脂蛋白浓度在2 7.4 7、5 4 .95mg/L时HepG2细胞逆转录聚合酶链反应产物的吸光度值分别是细胞对照的2 .8倍和2 .3倍,浓度在10 9.89mg/L时逆转录聚合酶链反应产物的吸光度值与细胞对照比较降低2 0 %。细胞肝脂酶活性随低密度脂蛋白浓度增加而降低,两者呈负相关(r=- 0 .95 6 14 ,P<0 .0 5 ) ;低密度脂蛋白浓度在5 4 .95mg/L时开始产生细胞增殖抑制作用,其细胞增殖抑制率与低密度脂蛋白浓度呈正相关(r=0 .91199,P<0 .0 5 )。不同浓度的氧化型低密度脂蛋白处理HepG2细胞其肝脂酶mRNA逆转录聚合酶链反应产物的吸光度值均低于细胞对照孔;脂蛋白浓度为2 7.4 7、5 4 .95及10 9.89mg/L时低密度脂蛋白组细胞肝脂酶活性是氧化型低密度脂蛋白组的3～4倍;浓度在5 4 .95mg/L时氧化型低密度脂蛋白对细胞的增殖抑制作用是低密度脂蛋白的2倍。结果提示,低密度脂蛋白在一定浓度范围能诱导HepG2细胞肝脂酶mRNA表达上调;高浓度低密度脂蛋白及各种浓度氧化型低密度脂蛋白均表现抑制HepG2细胞肝脂酶活性及肝脂酶mRNA表达。

摘要:为了解胰高血糖素和双丁酰环腺苷酸在肝脏载脂蛋白代谢中的作用,以培养的人肝癌细胞系HepG2细胞为研究对象,采用“冻干浓缩培养液载脂蛋白测定法”,观察了胰高血糖素和双丁酰环腺苷酸对HepG2细胞分泌载脂蛋白AⅠ、AⅡ、CⅢ、B10 0及E的影响。结果表明,胰高血糖素浓度为4×10 -7mol/L时,载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B10 0及E的分泌分别减少47.7%、5 4.1%、32 .7%和33.2 % (P<0 .0 1) ,载脂蛋白CⅢ的分泌增加89.1% (P<0 .0 1) ;双丁酰环腺苷酸的浓度为1×10 -3mol/L时,载脂蛋白AⅠ、B10 0和E的分泌分别减少12 .3 %、2 4.9%和16 .1%(P<0 .0 1) ,载脂蛋白AⅡ和CⅢ的分泌分别增加6 6 .1%和142 .6 % (P<0 .0 1)。胰高血糖素和双丁酰环腺苷酸对HepG2细胞载脂蛋白分泌的影响基本一致。