摘要:目的]探讨孕期运动对自发性高血压大鼠(SHR)3月龄子代肾脏结构、功能及肾脏局部血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/转化生长因子β1(TGF-β1)/结缔组织生长因子(CTGF)信号通路的影响,旨为高血压生命早期干预和关键靶器官保护提供实验依据。 [方法]将SHR和WKY大鼠进行雌雄配种后的孕鼠随机分为孕期安静组(p-WKY-SED、p-SHR-SED)和孕期运动组(p-WKY-EX、p-SHR-EX)。选择3月龄子代大鼠为研究对象,采用尾动脉无创血压系统、比色法分别检测3月龄子代大鼠的血压、血清尿素氮和肌酐。HE染色、Masson染色、ELISA、Western blot分别检测3月龄子代大鼠的肾脏结构、胶原容积分数、AngⅡ浓度、肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)和致纤维化信号通路相关蛋白表达。 [结果](1)无论雌雄,p-SHR-SED组子代大鼠的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和平均动脉压(MAP)均显著高于p-WKY-SED组；孕期运动可显著降低雄性子代大鼠的SBP、DBP和MAP(P＜0.05),而对雌性子代大鼠无影响(P＞0.05)。(2)各组间血清尿素氮和肌酐无显著差异(P＞0.05)。(3)无论雌雄,p-SHR-SED组子代大鼠的肾小球体积、肾脏胶原容积分数显著高于p-WKY-SED组；孕期运动后,p-SHR-EX组子代大鼠的肾小球体积、肾脏胶原容积分数显著降低(P＜0.05)。(4)无论雌雄,p-SHR-SED组子代大鼠的肾脏AngⅡ显著高于p-WKY-SED组；孕期运动后,p-SHR-EX组子代大鼠的肾脏AngⅡ明显减少(P＜0.05)。(5)无论雌雄,p-SHR-SED组子代大鼠的血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)、TGF-β1、CTGF蛋白表达均显著高于p-WKY-SED组,而血管紧张素转换酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)、MasR蛋白表达显著低于p-WKY-SED(P＜0.05)；孕期运动后,p-SHR-EX组雄性子代大鼠的AT1R、TGF-β1、CTGF蛋白表达显著减少,ACE2、AT2R、MasR蛋白表达升高,雌性子代大鼠的AT1R、TGF-β1蛋白表达显著减少(P＜0.05)。 [结论](1)孕期运动可显著降低高血压大鼠3月龄雄性子代大鼠的血压,而对雌性子代大鼠的血压无显著影响。(2)孕期运动可能通过调节RAAS平衡、抑制AngⅡ/TGF-β1/CTGF信号通路降低高血压大鼠3月龄雌/雄子代大鼠的肾脏纤维化。

摘要:目的]研究依达拉奉右莰醇(ED)对液压冲击脑损伤大鼠小胶质细胞极化的影响,并基于Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路探讨其机制。[方法]从205只健康雄性SD大鼠中随机取32只设为假手术组,其余173只大鼠采用液压冲击法制备脑损伤大鼠模型,取160只成模大鼠随机分为模型组、ED(7 mg/kg)组、TAK242(瑞沙托维,TLR4抑制剂,2 mg/kg)组、ED(7 mg/kg)＋TAK242(2 mg/kg)组和ED(7 mg/kg)＋脂多糖(LPS,TLR4激动剂,0.4 mg/kg)组,每组32只。各组分别1次/天连续腹腔注射给药14天后,通过改良神经功能缺损评分(mNSS)、失重法、伊文思蓝(EB)渗透法考察大鼠神经功能、脑含水量和血-脑屏障(BBB)通透性,通过HE染色、Nissl染色考察脑组织病理学改变,ELISA检测脑组织γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)1β、IL-4、IL-10水平,免疫荧光双染法检测小胶质细胞M1极化表型(CD86/Iba-1)和M2极化表型(CD206/Iba-1),RT-PCR、Western blot检测TLR4、NF-κB p65、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、水通道蛋白4(AQP4) mRNA和蛋白表达。 [结果]与模型组相比,ED组、TAK242组和ED＋TAK242组大鼠mNSS评分、脑含水量、BBB通透性明显降低(P＜0.05),脑组织结构紊乱、神经元排列稀疏无序、空泡样变、炎症细胞浸润、尼氏小体数量减少等病理学改变明显改善,脑组织IFN-γ、TNF-α、IL-1β水平明显降低,IL-4、IL-10水平明显升高(P＜0.05),小胶质细胞M1极化表型阳性细胞率明显降低,M2极化表型阳性细胞率明显升高(P＜0.05),TLR4、NF-κB p65、NLRP3、AQP4的mRNA和蛋白表达量均明显降低(P＜0.05)。TAK242可明显增强ED对液压冲击脑损伤大鼠神经功能、脑含水量、BBB通透性、炎症反应、小胶质细胞极化、TLR4/NF-κB信号通路相关mRNA和蛋白表达的调控作用(P＜0.05),LPS则明显逆转ED对液压冲击脑损伤大鼠的上述调控作用(P＜0.05)。 [结论]ED可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路而促进小胶质细胞由M1型向M2型极化,抑制炎症反应和BBB通透性升高,从而对大鼠液压冲击脑损伤起到保护作用。

摘要:目的]基于Wnt/β连环蛋白(β-catenin)信号通路探讨补阳还五汤加减通过调控血管平滑肌细胞的表型转化及血清炎症因子水平,发挥抗动脉粥样硬化(As)的作用。 [方法]将50只ApoE－/－小鼠随机分为模型组、补阳还五汤加减(低、中、高剂量)组及阿托伐他汀组,每组10只；10只C57BL/6J小鼠设为对照组,给予普通饲料喂养,其余5组小鼠给予高脂饲料喂养8周进行As模型复制,第9周开始灌胃,连续灌胃4周,12周后分离小鼠主动脉根部,制备石蜡切片,油红O染色观察主动脉窦脂质含量；免疫组织化学法检测骨桥蛋白(OPN)表达水平；ELISA法检测小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的水平；Western blot检测小鼠主动脉中Wnt1、β-catenin及c-myc蛋白的表达；RT-PCR法检测小鼠主动脉中Wnt1、β-catenin基因的表达。 [结果]补阳还五汤加减(低、中、高剂量)能够降低As模型小鼠主动脉窦脂质含量及OPN表达；降低小鼠血清IL-6、TNF-α、IL-1β、MCP-1水平；并可下调小鼠主动脉中Wnt1、β-catenin蛋白及基因的表达。 [结论]补阳还五汤加减通过调控炎症反应发挥抗As的作用,部分机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。

摘要:目的]探究阿芬太尼对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠的作用及在该过程中对鞘氨醇激酶1(SphK1)/鞘氨醇-1-磷酸(S1P)信号通路的调节机制。 [方法]将SPF级SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物组(复方丹参组)和阿芬太尼低剂量组、阿芬太尼高剂量组、阿芬太尼高剂量+SphK1激动剂组(阿芬太尼+PMA组),每组20只。除假手术组,其余组均利用结扎左前降支冠状动脉后再灌注复制MIRI模型。全自动生物化学分析仪检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和谷草转氨酶(AST)的活性；TTC检测大鼠心肌梗死面积；HE染色观察大鼠心肌组织形态学特征；TUNEL染色检测大鼠心肌细胞凋亡；ELISA检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)及S1P的水平；试剂盒检测心肌组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性；Western blot检测心肌组织SphK1蛋白表达。 [结果]相较于假手术组,模型组大鼠心肌组织病理损伤严重,血清中心肌损伤标志物LDH、CK和AST的活性,心肌梗死面积和心肌细胞凋亡率,TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、S1P水平及SphK1蛋白表达均升高,SOD活性降低(P＜0.05)；相较于模型组,阳性药物组和阿芬太尼低、高剂量组大鼠心肌组织损伤减轻,血清中心肌损伤标志物LDH、CK和AST的活性,心肌梗死面积和心肌细胞凋亡率,TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、S1P水平及SphK1蛋白表达均降低,SOD活性升高(P＜0.05)。SphK1激动剂可逆转高剂量阿芬太尼对上述指标的影响(P＜0.05)。 [结论]阿芬太尼对MIRI大鼠发挥保护作用,其机制可能与抑制SphK1/S1P信号通路有关。

摘要:心肌缺血再灌注损伤(MIRI)是急性心肌梗死患者介入术后死亡率高的原因之一,细胞凋亡、自噬、焦亡等多种细胞死亡方式参与其中。新近研究表明,一种独特的程序性细胞死亡方式——铁死亡可能是治疗MIRI的重要靶点,但其分子机制尚未完全明确。该综述系统总结了铁死亡参与MIRI的作用机制,包括线粒体功能障碍、内质网应激(ERS)、氧化应激、钙超载、表观遗传修饰、细胞凋亡、自噬等。此外,与MIRI相关的铁死亡信号通路被阐述,旨在为靶向抑制铁死亡治疗MIRI提供思路。

摘要:目的]探讨铁皮石斛多糖(DOP)对缺血性脑卒中大鼠脑组织Janus激酶(JAK)/信号转导子和转录激活子3(STAT3)信号通路的影响。 [方法]以线栓法建立大脑中动脉闭塞大鼠模型。SD大鼠随机分为模型组、DOP低剂量(25 μg/g)组、DOP中剂量(50 μg/g)组、DOP高剂量(100 μg/g)组、依达拉奉组,每组12只；另取12只SD大鼠设为假手术组。经药物干预后,以Longa分级法对各组大鼠进行神经功能缺损评分；通过三苯基氯化四氮唑染色检测大鼠脑梗死情况；苏木精-伊红染色观察大鼠海马神经组织病理形态变化；酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织炎性细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、环氧合酶2(COX-2)、白细胞介素6(IL-6)水平；Western blot检测大鼠脑组织JAK/STAT3信号通路相关蛋白表达水平。 [结果]与假手术组相比,模型组大鼠海马神经元皱缩、变小,变性坏死,结构破损,排列紊乱,且数目明显减少,海马神经组织整体呈现明显病理损伤,神经功能缺损评分、脑梗死面积、脑组织IFN-γ、COX-2及IL-6水平、p-JAK/JAK、p-STAT3/STAT3明显升高(P＜0.05)。与模型组相比,药物处理组大鼠海马神经组织病理损伤减轻,神经功能缺损评分、脑梗死面积、脑组织IFN-γ、COX-2及IL-6水平、p-JAK/JAK、p-STAT3/STAT3均降低,且DOP各组之间呈剂量依赖性(P＜0.05)。DOP高剂量组与依达拉奉组比较,大鼠各指标均无明显变化(P＞0.05)。 [结论]DOP可抑制缺血性脑卒中大鼠JAK/STAT3信号通路激活,减少炎性细胞因子合成分泌,减轻脑部炎症,修复神经功能。

摘要:目的]应用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及小分子药物靶点预测在线平台(Swiss Target Prediction)和疾病基因组数据库,结合分子对接技术,预测巴戟天抗动脉粥样硬化(As)的靶点及信号通路。 [方法]通过中药网络药理学数据库及小分子药物靶点预测在线平台挖掘巴戟天的有效成分及其所对应的靶点,利用GeneCards、OMIM、Disgenet、UniProt收集并筛选As相关的疾病基因靶点,获取交集基因,将其导入String 11.5数据库中,构建疾病-药物蛋白互作分析(String-PPI)网络图,利用Cytoscape 3.9.1软件对关键靶点网络进行可视化；此外,运用Metascape网络在线平台进行GO、KEGG富集挖掘出其抗As的分子靶点,并通过KEGG数据库绘制通路图。最后,使用Autodock vina 1.1.2软件对核心化合物及核心靶点基因进行分子对接验证。 [结果]通过以上数据库共收集得到包括β-谷甾醇和蒽醌在内的17个有效药物化合物、73个核心靶点和1 450个关键疾病基因；取交集后得到巴戟天治疗As的35个核心基因；经String-PPI得到基因间有相互作用的SRC、PGTS2、TGFβ1、REN、ESR1、CASP3等32个基因；KEGG富集到75条信号通路,涉及脂质-动脉粥样硬化、晚期糖基化终末产物及受体、PI3K-Akt信号通路等相关通路；其中脂质-动脉粥样硬化通路主要涉及SRC、BCL2、BAX、CASP3、GSK3B、RXRA等6个靶基因。分子对接结果显示,巴戟天的主要化学成分与核心基因之间有较强的结合活性。 [结论]巴戟天可能通过β-谷甾醇、蒽醌等主要有效化学成分调控SRC、PGTS2、TGFβ1、REN、RXRA、ESR1、CASP3等32个主要靶基因表达,减轻血管内皮炎症反应,抑制细胞增殖、迁移和凋亡,发挥抗As的作用。

摘要:目的]探讨苦参素注射液(OMT)对阿霉素所致慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能和心室重构的影响及可能机制。 [方法]采用腹腔注射(ip)阿霉素(1.5 mg/kg,2次/周,共6周)的方法构建CHF大鼠模型,设模型组、卡托普利注射液(CTP,6.5 mg/kg)组和OMT低(25 mg/kg)、中(50 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组；另设对照组,每组10只。各组分别每天1次腹腔注射给药4周后,通过小动物超声成像系统检测心功能指标[左心室收缩期末内径(LVESD)、左心室舒张期末内径(LVEDD)、短轴缩短率(LVFS)、射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)],酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、脑钠肽(BNP)、基质裂解素2(ST2)含量,计算左心室肥厚指数(LVHI),HE染色和Masson染色观察心肌组织形态变化和纤维化状况,Western blot法检测胶原蛋白Ⅰ(Coll-1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Smad7蛋白表达。 [结果]与模型组比较,CTP组和OMT低、中、高剂量组大鼠LVESD和LVEDD分别降低,LVFS、LVEF和SV分别升高(均P＜0.05),cTnI、BNP和ST2含量以及LVHI分别降低(均P＜0.05),心肌组织形态病理性改变和纤维化状况明显改善,胶原容积分数(CVF)分别降低(均P＜0.05),Coll-1、α-SMA和TGF-β1表达量分别降低,p-Smad2/Smad2比值和p-Smad3/Smad3比值分别下降,Smad7相对表达量分别升高(均P＜0.05)。OMT对CHF大鼠各指标的影响具有剂量依赖性,且OMT高剂量组对各指标的影响明显优于CTP组。 [结论]OMT具有改善CHF大鼠心功能、抑制心室重构的作用,其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smads信号通路有关。

摘要:目的 以生物信息学方法探讨颈动脉粥样硬化发病新的潜在机制,挖掘小檗碱干预颈动脉粥样硬化的潜在靶点和途径。方法 检索获取美国国家生物技术信息中心基因表达综合数据库并获取颈动脉粥样硬化斑块基因表达芯片GSE28829数据集,筛选样本差异表达基因数据并进行富集分析；检索获取小檗碱的潜在作用靶点,与颈动脉粥样硬化差异表达基因取交集,获得小檗碱干预颈动脉粥样硬化的潜在靶点,进行富集分析并筛选核心靶点。结果 共筛选获得颈动脉粥样硬化差异表达基因174个,涉及趋化因子、核因子κB、Toll样受体、脂肪酸降解等信号通路。筛选获得小檗碱干预颈动脉粥样硬化的潜在靶点5个,涉及流体剪切力与动脉硬化、白细胞介素17、肿瘤坏死因子等信号通路,经拓扑及富集分析,CCL2、HMOX1和MMP-9可能是小檗碱干预颈动脉粥样硬化的核心靶点。结论 颈动脉粥样硬化差异表达基因主要富集于炎性反应、脂质代谢等信号通路；小檗碱可能通过介导CCL2、HMOX1、MMP-9等靶点调控流体剪切力、白细胞介素17、肿瘤坏死因子等信号通路而干预颈动脉粥样硬化。

摘要:心血管疾病是威胁人类健康的头号疾病,心肌梗死通常发病急且死亡率高,给病人及其家属带来了巨大负担。如何减少心肌细胞死亡是治疗心肌梗死主要的方式。虽然冠状动脉介入治疗可以在心肌梗死后重建冠状动脉血流,但由血运重建带来的缺血再灌注损伤同样会损伤心肌细胞,导致心肌细胞死亡。Hippo信号通路具有多种作用,包括促进细胞增殖、调节细胞凋亡,因此能否通过调控Hippo信号通路以促进心肌梗死患者心肌细胞增殖、减轻心肌细胞凋亡、改善心功能成为研究的热点。本文综述了Hippo信号通路在心肌梗死中的作用及其研究进展,为临床治疗心肌梗死提供新的思路。