摘要:目的 探讨泽泻白术配伍改善ApoE－/－小鼠动脉粥样硬化(As)及其与胆固醇逆转运的相关性。方法高脂饮食喂养ApoE－/－小鼠构建As动物模型,随后以泽泻白术配伍干预。超声测量颈总动脉管壁厚度和管腔直径,HE染色检测动脉形态学改变,油红O染色观察肝脏内脂质沉积情况,ELISA检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)含量,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平,Western blot检测肝脏内的胆固醇逆转运蛋白如沉默信息调节因子1(SIRT1)、肝X受体α(LXRα)、ATP结合盒转运体A1(ABCA1)和B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)的表达。结果 泽泻白术配伍显著改善模型鼠的颈总主动脉管壁厚度和管腔直径,抑制模型鼠血清炎症因子TNF-α、IL-1β、MMP-2和MMP-9的表达,降低TC、TG和LDL水平,增加HDL表达,促进肝脏内的胆固醇逆转运相关蛋白SIRT1、LXRα、ABCA1和SR-BⅠ表达,减轻脂质在肝脏的沉积。结论 泽泻白术配伍可能通过SIRT1-LXRα-ABCA1/SR-BⅠ通路促进胆固醇逆转运,减轻肝脏内脂质沉积,改善炎症反应,抑制血管壁增厚和血管狭窄,从而发挥抗As作用。

摘要:目的 观察荷叶碱(NF)对巨噬细胞源性泡沫细胞ATP结合盒转运体A1(ABCA1)表达和胆固醇流出的影响及机制。方法 体外培养人源性THP-1单核细胞,使用佛波酯(160 nmol/L)对其进行诱导,促进其分化为巨噬细胞,并在50 mg/L氧化低密度脂蛋白处理下,使其荷脂形成泡沫细胞,进行常规体外培养细胞。高效液相色谱检测泡沫细胞内脂质成分,液体闪烁计数仪检测泡沫细胞胆固醇流出的水平；实时荧光定量PCR和Western blot检测ABCA1表达情况。PPARγ抑制剂GW9662和LXRα抑制剂GGPP分别处理泡沫细胞,通过荧光定量PCR和Western blot检测荷叶碱对泡沫细胞PPARγ、LXRα和ABCA1表达的影响。结果 荷叶碱显著减少泡沫细胞内的脂质成分,增加ABCA1表达与胆固醇流出水平。PPARγ抑制剂GW9662处理细胞后,显著降低了PPARγ、LXRα和ABCA1的表达。泡沫细胞在LXRα抑制剂GGPP处理下,也明显降低了LXRα和ABCA1表达。结论 荷叶碱通过PPARγ/LXRα途径上调巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1的表达,促进胆固醇流出,减少细胞内脂质蓄积。

摘要:目的 探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)经由血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)受体对PPARγ-LXRα-ABCA1通路激活的作用。 方法 浓度梯度ox-LDL(0～40 mg/L,12 h)刺激J774A.1巨噬细胞,检测LXRα、ABCA1的表达。构建293T细胞LOX-1过表达的PPARγ双荧光素酶报告基因系统,激光共聚焦及Western blot检测LOX-1的分布与表达,双荧光素酶报告基因系统检测PPARγ的转录活化情况。对J774A.1巨噬细胞分别进行LOX-1 siRNA和PPARγ siRNA沉默,ox-LDL(30 mg/L,12 h)孵育后检测LXRα、ABCA1蛋白的表达。 结果 ox-LDL可显著上调J774A.1细胞LXRα和ABCA1的表达(P＜0.01,n＝3)。LOX-1过表达的PPARγ双荧光素酶报告基因系统检测显示ox-LDL能够通过LOX-1增加PPARγ的转录活性；对J774A.1巨噬细胞分别进行LOX-1 siRNA、PPARγ siRNA沉默后发现,LXRα和ABCA1的表达均显著降低(P＜0.01,n＝3)。 结论 ox-LDL可通过LOX-1受体激活PPARγ转录活性,从而上调LXRα、ABCA1蛋白表达,完成PPARγ-LXRα-ABCA1信号通路的激活。

摘要:目的 观察血管生成素1(Ang-1)通过LXRα调节THP-1源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、ABCG1表达和胆固醇流出。 方法 160 nmol/L佛波酯诱导人THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,50 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)共孵育,使其荷脂形成泡沫细胞,常规体外培养细胞；实验分为对照组和Ang-1处理组；液体闪烁计数仪检测细胞胆固醇流出水平,高效液相色谱检测细胞内脂质成分,实时荧光定量PCR和Western blot检测ABCA1、ABCG1表达；LXRα激动剂T0901317或抑制剂GGPP分别处理THP-1源性泡沫细胞。 结果 Ang-1显著抑制THP-1源性泡沫细胞胆固醇流出,下调ABCA1、ABCG1表达；LXRα激活剂拮抗Ang-1对ABCA1、ABCG1表达及胆固醇流出的抑制作用。 结论 Ang-1可能通过抑制LXRα表达,降低ABCA1和ABCG1表达水平,减少THP-1源性泡沫细胞内胆固醇流出。

摘要:目的 采用氧化型低密度脂白(ox-LDL)构建小鼠巨噬细胞泡沫化模型,探讨别嘌呤醇对泡沫化进程中脂质蓄积的影响及其机制。方法 体外培养小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7,用ox-LDL或Dil-ox-LDL孵育细胞构建泡沫化模型。用不同浓度别嘌呤醇处理细胞,MTT法筛选出合适的实验浓度。将合适浓度的别嘌呤醇作用于细胞,在共聚焦荧光显微镜下观察Dil-ox-LDL孵育后RAW264.7细胞内脂质蓄积情况；酶学终点法定量检测细胞内总胆固醇的变化；半定量﹑荧光定量RT-PCR法和蛋白免疫印迹法分别检测细胞中LXRα和ABCA1 mRNA和蛋白的表达水平。结果 与ox-LDL诱导的泡沫化模型组相比,别嘌呤醇组脂质蓄积显著下降,总胆固醇含量明显下调。别嘌呤醇在mRNA和蛋白水平上引起LXRα和ABCA1的高表达。结论 别嘌呤醇具有抑制ox-LDL诱导小鼠巨噬细胞泡沫化进程的作用,并通过上调LXRα-ABCA1途径来调节细胞内胆固醇的含量。

摘要:胆固醇逆转运(RCT)是体内清除胆固醇的重要机制,对维持体内胆固醇稳态,预防动脉粥样硬化有着重要意义。ATP结合盒转运体A1(ABCA1)是胆固醇逆转运过程中的关键因子,ABCA1的表达受到转录水平和转录后水平的多种因素调控,其中microRNA介导ABCA1表达的转录后水平调控备受重视。近年来的研究发现,多种microRNA能直接以ABCA1为靶基因调控ABCA1的表达,同时也发现一些microRNA通过作用于调控ABCA1基因的转录因子间接发挥效应,如肝X受体α(LXRα)、过氧化体增殖物激活型受体γ(PPARγ)、视黄醇类核内受体α(RXRα)等间接调控ABCA1的表达,从而达到影响胆固醇流出的目的。这些microRNA包括miR-33a/b、miR-19b、miR-27a/b、miR-302、miR-758及miR-106b等。本文主要综述已知microRNA对 ABCA1表达的影响。

摘要:目的　探讨白细胞介素4（IL-4）对人类单核细胞株THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）表达及细胞内胆固醇流出的影响及机制。方法　THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞加入不同浓度的IL-4，处理不同时间，以及加入肝X受体α（LXRα）激动剂T0901317处理后，采用半定量RT-PCR和Western　blot分别检测细胞ABCA1及LXRα　mRNA和蛋白质的表达，采用油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况，使用液体闪烁计法检测细胞内胆固醇流出，采用高效液相色谱法检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的量。结果　IL-4能呈浓度和时间依赖性地降低THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达（P＜0.05），并减少细胞内胆固醇流出。加入T0901317后能使IL-4对ABCA1的抑制作用减弱（P＜0.05）。结论　IL-4能抑制THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1的表达及胆固醇的流出。LXRα激活能逆转IL-4对ABCA1的抑制作用。

摘要:目的　观察丹红注射液对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的THP-1巨噬细胞脂质蓄积的影响，并探讨其机制。方法　160　nmol/L　PMA孵育THP-1巨噬细胞24　h后，细胞分为三组：对照组、ox-LDL组（100　mg/L）和丹红组（100　mg/L　ox-LDL+30　mL/L丹红注射液）。高效液相色谱分析法检测细胞内胆固醇水平，采用液体闪烁计数法观察细胞内胆固醇的流出，Western　blot检测细胞ATP结合盒转运体A1（ABCA1）和肝X受体α（LXRα）的蛋白表达，定量　PCR　检测细胞ABCA1和LXRα的mRNA　表达。结果　丹红注射液抑制ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞脂质蓄积，显著降低细胞总胆固醇（TC）、游离胆固醇（FC）和胆固醇酯（CE）的含量，增加载脂蛋白AⅠ（ApoAⅠ）介导的胆固醇流出，促进THP-1巨噬细胞ABCA1和LXRα的表达。结论　丹红注射液抑制ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞脂质蓄积，可能与其促进LXRα-ABCA1途径介导的胆固醇流出有关。

摘要:目的 探讨血管紧张素1-7［Ang（1-7）］对大鼠血脂及胆固醇逆转运相关因子ATP结合盒转运子A1（ABCA1）、过氧化体增殖物激活型受体γ（PPARγ）、肝X受体α（LXRα）和视黄酸X受体α（RXRα）表达的影响。方法 将40只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、高脂饲料组、Ang（1-7）组及Ang（1-7）＋A779组。通过植入式胶囊渗透压泵，经颈静脉插管持续给予Ang（1-7），28天后，检测各组大鼠血浆总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇及高密度脂蛋白胆固醇水平，定量实时聚合酶链反应及Western blot检测各组大鼠动脉组织中ABCA1、PPARγ、LXRα、RXRα基因表达的变化。结果 与正常对照组比较，高脂饲料组大鼠总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均有所升高（P<0.05），高密度脂蛋白胆固醇有所降低（P<0.05）;与高脂饲料组比较，Ang（1-7）组大鼠总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均有所降低（P<0.05），高密度脂蛋白胆固醇有所升高（P<0.05）;与Ang（1-7）组比较，Ang（1-7）＋A779组大鼠总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇均有所升高（P<0.05），高密度脂蛋白胆固醇有所降低（P<0.05）。与正常对照组比较，高脂饲料组大鼠ABCA1、PPARγ、LXRα、RXRα的mRNA和蛋白含量均有所降低（P<0.05）;与高脂饲料组比较，Ang（1-7）组大鼠ABCA1、PPARγ、LXRα、RXRα的mRNA和蛋白含量均有所升高（P<0.05）;与Ang（1-7）组比较，Ang（1-7）＋A779组大鼠ABCA1、PPARγ、LXRα、RXRα的mRNA和蛋白含量均有所降低（P<0.05）。结论 Ang（1-7）能够降低大鼠血浆中血脂水平，促进大鼠动脉组织中ABCA1、PPARγ、LXRα、RXRα的基因表达，对高脂血症有一定的治疗作用。

摘要:目的研究阿托伐他汀对炎症刺激物脂多糖干预后人脐静脉内皮细胞中肝X受体α及其靶基因腺苷三磷酸结合盒转运体A1、固醇调节元件结合蛋白1表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞，进行以下干预实验：对照组加入2 μL磷酸盐缓冲液；脂多糖干预组用终浓度为100 μg/L脂多糖溶液干预细胞24 h；(2)对照干预组和阿托伐他汀干预组先用二甲基亚砜或不同浓度（0.1、1.0及10.0 μmol/L）的阿托伐他汀预干预2 h，然后加入100 μg/L脂多糖溶液共同干预22 h。用实时定量聚合酶链反应测定肝X受体α及其靶基因腺苷三磷酸结合盒转运子A1、固醇调节元件结合蛋白1的mRNA表达量。结果与对照组相比，脂多糖干预组肝X受体α及其靶基因mRNA表达明显受到抑制(p<0.05)；与对照干预组相比，阿托伐他汀干预组随给药浓度增加肝X受体α及其靶基因mRNA表达逐步升高（p<0.05）。结论脂多糖可明显抑制人脐静脉内皮细胞中肝X受体α及其靶基因表达；阿托伐他汀在一定范围内可呈剂量依赖性上调肝X受体α及其靶基因表达，提示其抗动脉粥样硬化作用可能部分通过肝X受体信号通路发挥作用。