摘要:目的]探讨孕期运动对自发性高血压大鼠(SHR)3月龄子代肾脏结构、功能及肾脏局部血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/转化生长因子β1(TGF-β1)/结缔组织生长因子(CTGF)信号通路的影响,旨为高血压生命早期干预和关键靶器官保护提供实验依据。 [方法]将SHR和WKY大鼠进行雌雄配种后的孕鼠随机分为孕期安静组(p-WKY-SED、p-SHR-SED)和孕期运动组(p-WKY-EX、p-SHR-EX)。选择3月龄子代大鼠为研究对象,采用尾动脉无创血压系统、比色法分别检测3月龄子代大鼠的血压、血清尿素氮和肌酐。HE染色、Masson染色、ELISA、Western blot分别检测3月龄子代大鼠的肾脏结构、胶原容积分数、AngⅡ浓度、肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)和致纤维化信号通路相关蛋白表达。 [结果](1)无论雌雄,p-SHR-SED组子代大鼠的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和平均动脉压(MAP)均显著高于p-WKY-SED组；孕期运动可显著降低雄性子代大鼠的SBP、DBP和MAP(P＜0.05),而对雌性子代大鼠无影响(P＞0.05)。(2)各组间血清尿素氮和肌酐无显著差异(P＞0.05)。(3)无论雌雄,p-SHR-SED组子代大鼠的肾小球体积、肾脏胶原容积分数显著高于p-WKY-SED组；孕期运动后,p-SHR-EX组子代大鼠的肾小球体积、肾脏胶原容积分数显著降低(P＜0.05)。(4)无论雌雄,p-SHR-SED组子代大鼠的肾脏AngⅡ显著高于p-WKY-SED组；孕期运动后,p-SHR-EX组子代大鼠的肾脏AngⅡ明显减少(P＜0.05)。(5)无论雌雄,p-SHR-SED组子代大鼠的血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)、TGF-β1、CTGF蛋白表达均显著高于p-WKY-SED组,而血管紧张素转换酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)、MasR蛋白表达显著低于p-WKY-SED(P＜0.05)；孕期运动后,p-SHR-EX组雄性子代大鼠的AT1R、TGF-β1、CTGF蛋白表达显著减少,ACE2、AT2R、MasR蛋白表达升高,雌性子代大鼠的AT1R、TGF-β1蛋白表达显著减少(P＜0.05)。 [结论](1)孕期运动可显著降低高血压大鼠3月龄雄性子代大鼠的血压,而对雌性子代大鼠的血压无显著影响。(2)孕期运动可能通过调节RAAS平衡、抑制AngⅡ/TGF-β1/CTGF信号通路降低高血压大鼠3月龄雌/雄子代大鼠的肾脏纤维化。

摘要:目的]探讨β受体阻滞剂在自发性高血压大鼠(SHR)血管老化中的防治作用及其潜在机制。 [方法]将24只3月龄雄性SHR随机分为安慰剂组、硝苯地平组、硝苯地平＋美托洛尔组、美托洛尔组,分别以食用淀粉、硝苯地平缓释片60 mg、硝苯地平缓释片40 mg＋美托洛尔缓释片75 mg、美托洛尔缓释片150 mg灌胃治疗,普通饲料喂养9个月,动态观察大鼠血压、心率及一般情况。HE染色观察大鼠股动脉形态学特征,离体股动脉血管环灌流实验检测血管舒缩功能,免疫荧光组织学染色和实时聚合酶链反应(RT-PCR)测定衰老相关基因p53、p21及内质网应激相关基因CHOP、XBP1的表达。 [结果]与安慰剂组相比,硝苯地平组、硝苯地平＋美托洛尔组、美托洛尔组收缩压下降约30%,舒张压下降约20%,心率分别下降了9%、36%、41%(均P＜0.01)。与安慰剂组相比,硝苯地平组、硝苯地平＋美托洛尔组、美托洛尔组舒缩功能显著改善,内膜中膜厚度分别下降了24%、14%、37%(均P＜0.01)；与硝苯地平组、硝苯地平＋美托洛尔组相比,美托洛尔组舒缩功能显著改善,内膜中膜厚度分别下降了18%、27%(均P＜0.01)。与安慰剂组相比,硝苯地平组p53蛋白、p53 mRNA、p21蛋白、p21 mRNA、CHOP蛋白、CHOP mRNA、XBP1蛋白、XBP1 mRNA的表达水平分别下降了35%(P＜0.01)、23%(P＜0.05)、25%(P＜0.01)、3%(P＞0.05)、51%(P＜0.01)、24%(P＞0.05)、21%(P＜0.01)、23%(P＞0.05),硝苯地平＋美托洛尔组分别下降了36%(P＜0.01)、42%(P＜0.01)、4%(P＞0.05)、24%(P＜0.05)、32%(P＜0.01)、44%(P＜0.05)、13%(P＜0.01)、42%(P＜0.05),美托洛尔组分别下降了47%(P＜0.01)、43%(P＜0.01)、42%(P＜0.01)、49%(P＜0.01)、78%(P＜0.01)、56%(P＜0.01)、32%(P＜0.01)、81%(P＜0.01)。与硝苯地平组、硝苯地平＋美托洛尔组相比,美托洛尔组进一步抑制衰老和内质网应激相关基因的表达。 [结论]SHR的动脉存在明显老化,β受体阻断剂在抑制SHR血管老化方面优于钙通道阻断剂,且高剂量β受体阻断剂改善血管老化程度优于联合用药,其机制可能与抑制内质网应激有关。

摘要:目的 用RNA干扰下调血管紧张素转换酶(ACE)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R),观察其对自发性高血压大鼠(SHR)血压及脑组织损伤的影响。 方法 SHR随机分为5组:空白对照组、病毒对照组、Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组,同时设WKY正常血压对照组。各组大鼠均于实验第1、17天各注射1次,干预前后检测血压、心率的变化。于首次注射后第3天,酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织中ACE、AngⅡ含量,实时荧光定量PCR检测脑组织ACE mRNA、AT1R mRNA表达,Western blot检测脑组织ACE、AT1R蛋白表达。实验结束时做脑组织光镜病理检查观察脑结构。 结果 于首次注射后第3天,Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组尾动脉压分别下降25.2±5.3 mmHg、23.5±4.8 mmHg、27.1±6.4 mmHg,第14天分别下降24.4±5.6 mmHg、23.6±4.9 mmHg、26.3±6.9 mmHg,第17天时血压有所回升；第2次注射后Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组尾动脉压再次明显下降,第23天时较首次注射前分别下降40.2±4.5 mmHg、37.8±3.9 mmHg、43.7±7.3 mmHg,第37天时血压有所回升,第40天时血压上升至第2次注射前水平；空白对照组和病毒对照组血压则持续升高26 mmHg,两组比较差异无统计学意义；正常血压对照组尾动脉压无明显变化。Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组脑组织ACE、AngⅡ显著低于空白对照组和病毒对照组(P＜0.05),而与正常血压对照组比较差异无统计学意义。Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组脑组织ACE mRNA和Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组脑组织AT1R mRNA的表达明显低于空白对照组、病毒对照组(P＜0.05),而与正常血压对照组比较差异无统计学意义。Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组脑组织AT1R蛋白表达显著低于空白对照组、病毒对照组(P＜0.05)。光镜显示Ad5-ACE-shRNA治疗组、Ad5-AT1R-shRNA治疗组、Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组脑组织结构明显改善。 结论 RNA干扰下调ACE和AT1R表达,降低SHR血压并改善脑损伤,尤以Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组效果明显且副作用少。RNA干扰对高血压的基因治疗具有良好应用前景。

摘要:目的 探讨赤芍总苷(TPG)对自发性高血压大鼠(SHR)血管重构基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)和血管壁氧化应激的干预作用。 方法 30只8周龄雄性SHR大鼠随机分为3组:低剂量TPG组(低剂量组,n＝10)、高剂量TPG组(高剂量组,n＝10)、对照组(n＝10)；另外以Wistar大鼠作为空白组(n＝8)。低剂量组、高剂量组分别以100、200 mg/(kg·d)的TPG灌胃,对照组、空白组以2 mL生理盐水灌胃。8周后,酶联免疫吸附测定法测定血清MMP-9、TIMP-1水平；活性氧(ROS)荧光探针检测胸主动脉壁细胞氧化应激水平；免疫组织化学染色检测主动脉MMP-9、TIMP-1蛋白表达。 结果 与空白组比较,对照组MMP-9、TIMP-1血清水平及血管壁MMP-9、TIMP-1蛋白表达均明显升高(P＜0.05)。TPG治疗后,MMP-9有所下降,高剂量组与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；但TIMP-1在低剂量组、高剂量组、对照组间差异无统计学意义(P＞0.05)。对照组胸主动脉ROS水平明显高于空白组,而低剂量组、高剂量组ROS水平较对照组下降。 结论 高血压血管重构存在血管氧化应激和MMP-9水平升高；TPG能够抑制动脉氧化应激和MMP-9水平,改善高血压血管重构,可作为高血压治疗的辅助药物。

摘要:目的 研究间歇有氧运动(IAE) 对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉肾上腺髓质素(ADM)的影响,探讨运动降低血压的大血管因素及其机制。 方法 SHR 30只,随机分为间歇有氧运动组(IAE组)和对照组。IAE组进行8周间歇跑台有氧运动。采用尾压法测血压,酶联免疫吸附法(ELISA)测运动前后血清中ADM的含量,免疫组织化学法显示SHR主动脉ADM的表达,蛋白质印迹实验检测主动脉ADM的特异性受体——受体活性修饰蛋白2(RAMP2)和降钙素受体样受体(CRLR)定量水平。 结果 IAE组血压明显低于对照组(P<0.05)；IAE组血清中ADM的含量明显高于对照组(P<0.05)；主动脉ADM表达明显强于对照组(P＜0.05)；主动脉RAMP2和CRLR定量均明显高于对照组(P<0.05)。 结论 间歇有氧运动可能通过增强血管ADM及其特异性受体表达使SHR大鼠血压下降。

摘要:目的 分析当归对自发性高血压大鼠心肌miR-122的影响及其生物信息学分析。方法 将自发性高血压大鼠分为当归组、模型组、卡托普利组、当归＋卡托普利组,同周龄的 Wistar大鼠作为正常对照组,测定用药前后不同组别鼠尾动脉收缩压。分组给药4周后,取大鼠心肌组织进行miRNA表达谱的测定。结果 当归可降低自发性高血压大鼠的血压水平。当归组表达上调的miRNA有13个,表达下调的miRNA有16个；卡托普利组表达上调的miRNA有15个,表达下调的miRNA有13个；当归＋卡托普利组表达上调的miRNA有4个,表达下调的miRNA有21个。对在三组中都表达上调的miR-122进行生物学过程富集分析,发现与氨基酸转运相关的基因Slc7a1。通过对差异表达的miRNA进行靶基因预测,当归组有8个miRNA含有靶基因Slc7a1,卡托普利组有11个miRNA含有靶基因Slc7a1,当归＋卡托普利组有6个miRNA含有靶基因Slc7a1。结论 当归对自发性高血压大鼠miR-122表达产生影响,可能通过其靶基因Slc7a1影响内皮功能,进而调节血压,为进一步的研究提供了依据。

摘要:目的　观察高饱和脂肪酸及富含鱼油（n-3多不饱和脂肪酸）饮食对自发性高血压大鼠（SHR）大动脉弹性的影响。方法　选择8周龄雄性SHR　30只，适应性喂养至14周龄后，按体重随机分为3组，每组10只，分别给予普通饲料、高脂饲料、高脂加鱼油饲料，持续喂养至36周龄，共干预22周。同龄对照大鼠（WKY）30只同前分组。干预后测定血压、体重、血浆游离脂肪酸谱、生化指标，喂养结束后，应用组织多普勒超声法测定中心动脉脉搏波传导速度（APWV），应用组织化学和免疫组织化学法测定中心动脉管壁的病理改变和基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达水平。结果　SHR高脂饮食组血压较普食组和高脂加鱼油组升高（160.5±5.5　mmHg比153.1±1.0　mmHg、155.1±6.7　mmHg，P<0.01）；HE染色显示高脂饮食组动脉管壁中膜横截面积（MCSA）较普食组增加（35500±8536　μm2比28348±3956　μm2，P<0.05），高脂加鱼油组胸主动脉MCSA较高脂饮食组减小（16865±7235　μm2，P<0.05）。WKY大鼠MCSA无明显变化。SHR大鼠高脂饮食组主动脉弹力纤维占中膜面积百分比较普食组减少（21.1%±2.3%比30.7%±2.3%，P<0.05），高脂加鱼油组较高脂饮食组升高（34.5%±4.1%，P<0.05）。SHR大鼠高脂饮食组中心动脉APWV较普食组增加，而高脂加鱼油组APWV较高脂饮食组减小（P<0.05）。SHR大鼠高脂饮食组的主动脉壁中MMP-9表达较普食组、高脂加鱼油组升高。结论　高饱和脂肪酸饮食具有刺激SHR大鼠大动脉血管壁增厚、上调MMP-9在动脉壁表达及增加动脉僵硬度的作用，而富含n-3多不饱和脂肪酸的饮食可能通过逆转这一作用发挥预防及控制血压的作用。

摘要:目的　探讨自发性高血压大鼠（SHR）主动脉血管重构细胞外基质蛋白和胶原蛋白的改变以及血脂康干预后的效果分析。方法　30只8周龄雄性SHR大鼠随机分为血脂康低剂量组［20　mg/（kg·d），n10］、血脂康高剂量组［200　mg/（kg·d），n10］和安慰剂组（n10），同周龄雄性Wistar大鼠作为对照组（n10），所有大鼠喂养至16周龄，静脉抽血后离心，分离血清采用酶联免疫吸附法测定血清基质金属蛋白酶9（MMP-9）、组织型基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP-1）水平；同时取胸主动脉，HE染色分析血管壁厚度和管壁/腔比值；Masson三色染色分析血管胶原纤维变化；免疫组织化学染色分析胸主动脉MMP-9、TIMP-1蛋白表达，运用Image-Pro　Plus　6.0软件对免疫组织化学染色切片进行灰度定量。结果　16周龄大鼠血清MMP-9水平在安慰剂组明显高于对照组（124.60±30.01　μg/L比66.00±22.67　μg/L，P<0.01）；经血脂康治疗后，血脂康高剂量组血清MMP-9水平明显低于安慰剂组（67.96±8.80　μg/L比124.60±30.01　μg/L，P<0.05）。血清TIMP-1水平在SHR大鼠明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.01）；但高血压大鼠组间差异无统计学意义　（P>0.05）。16周龄的SHR大鼠（安慰剂组）胸主动脉与Wistar大鼠（对照组）比较，可见血管壁明显增厚，管壁/腔比值增大（P<0.05），弹性纤维排列紊乱，管壁胶原成分显著增多；经血脂康治疗后，血脂康高剂量组管壁/腔比值明显低于安慰剂组（6.8%±0.9%比7.8%±0.7%，P<0.05），两个治疗组胶原均有所减少，血脂康高剂量组胶原数量接近于对照组。胸主动脉免疫组织化学染色显示安慰剂组MMP-9表达明显强于对照组和血脂康治疗组；经灰度定量后，安慰剂组MMP-9灰度值明显高于血脂康高剂量组和对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。TIMP-1在各组表达中并不明显，灰度定量差异无统计学意义。结论　高血压大鼠出现血管重构，表现为MMP-9水平升高和主动脉壁胶原蛋白沉积增加，血脂康能抑制MMP-9水平和胶原蛋白沉积，减轻血管重构的程度。

摘要:目的　减阻剂（DRP）是一种可以减少流体阻力、增加流体剪切应力的线性高分子化合物，本实验观察静脉应用DRP对自发性高血压大鼠（SHR）主动脉重塑的影响。方法　24只8周龄雄性SHR随机分为3组：SHR＋生理盐水组（SHR＋NS组）、SHR＋10　mg/L　DRP组、SHR＋20　mg/L　DRP组，隔日给予静脉注射NS或不同剂量的DRP；8只年龄匹配的雄性Wistar大鼠（WR）作为对照组（WR＋NS组），给予静脉注射NS。实验开始前及每20天记录大鼠体重、尾动脉收缩压、心率。60天后大鼠麻醉后心脏取血，酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清内皮素（ET）水平。处死大鼠，分离大鼠升主动脉，石蜡包埋，HE染色观察主动脉形态结构，免疫组织化学法检测主动脉内皮素1（ET-1）表达。结果　SHR各组间体重、心率无显著差异。SHR＋20　mg/L　DRP组血压较SHR＋NS组明显降低（P<0.05），而SHR＋10　mg/L　DRP组与SHR＋NS组血压无统计学差异。与SHR＋NS组相比，SHR＋10　mg/L　DRP组及SHR＋20　mg/L　DRP组血清ET水平显著降低，差异具有统计学意义。主动脉HE染色显示，与WR＋NS组相比，SHR＋NS组主动脉中膜厚度明显增厚（P<0.05）；静脉应用DRP后，与SHR＋NS组相比，SHR＋10　mg/L　DRP组、SHR＋20　mg/L　DRP组主动脉中膜厚度均显著降低（P<0.05）；SHR＋10　mg/L　DRP组、SHR＋20　mg/L　DRP组与WR＋NS组之间主动脉中膜厚度无统计学差异。主动脉免疫组织化学染色显示，ET-1在血管内皮及中层平滑肌均有表达，SHR大鼠主动脉表达明显高于WR大鼠；经静脉应用DRP后，SHR＋10　mg/L　DRP组、SHR＋20　mg/L　DRP组主动脉ET-1较SHR＋NS组显著降低，SHR＋10　mg/L　DRP组与SHR＋20　mg/L　DRP组之间主动脉ET-1无显著差异。结论　静脉应用DRP可改善SHR主动脉重塑，其机制可能与DRP通过增加主动脉内血液剪切应力抑制了ET-1表达有关，减阻剂可能为治疗高血压引起的主动脉重塑提供新的思路。

摘要:目的　探讨褪黑素在有氧运动改善自发性高血压大鼠（SHR）血压和肠系膜动脉功能中的作用。方法　选用12周龄雄性SHR　54只和Wistar-Kyoto（WKY）大鼠（WKY组，即正常血压对照组）18只。SHR随机分为5个组，即安静空白对照组（SHR-SED组，n＝18）、安静生理盐水注射组（SHR-SED＋NS组，n＝6）、安静褪黑素受体阻断剂2-苯基-N-乙酰色胺（Luz）［1　mg/（kg·d）］注射组（SHR-SED＋Luz组，n＝6）、有氧运动组（SHR-EX组，n＝18）、有氧运动Luz注射组（SHR-EX＋Luz组，n＝6）。运动组进行8周有氧训练：坡度0°，18～20　m/min，每天60　min，每周5天。8周有氧运动后，采用尾动脉无创法测量大鼠血压与心率；WKY组、SHR-SED组、SHR-EX组采用ELISA竞争法测定血清褪黑素水平；离体微血管环实验测定二、三级肠系膜动脉的舒缩特性。结果　（1）8周有氧运动后，SHR-EX组的收缩压、舒张压、平均动脉压和心率与SHR-SED组相比显著降低。SHR-EX＋Luz组的收缩压、心率明显高于SHR-EX组，却低于SHR-SED＋Luz组；而SHR-SED组与SHR-SED＋NS组、SHR-SED＋Luz组比较无差异。（2）WKY组和SHR-SED组血清褪黑素浓度在21∶00～22∶00时最高，明显高于12∶00～13∶00和8∶00～9∶00；但SHR-EX组在8∶00～9∶00最高。在3个时间段内，WKY组血清褪黑素浓度始终显著高于SHR-SED组；但在8∶00～9∶00时间段，SHR-EX组明显高于WKY组、SHR-SED组。（3）微血管环在去甲肾上腺素（10－5　mol/L）预收缩后，对褪黑素（10－6～10－3　mol/L）呈浓度依赖性舒张反应，pIC50值：WKY组＞SHR-EX组＞SHR-SED组，且各组无Nω-硝基-L-精氨酸甲酯的内皮完整血管舒张幅度大于有Nω-硝基-L-精氨酸甲酯（10－4　mol/L）的内皮不完整血管；Luz（2×10－6　mol/L）预孵育微血管环20　min，可部分阻断褪黑素的舒张作用。结论　有氧运动可降低SHR的收缩压和心率，增强肠系膜动脉舒张作用，其中褪黑素发挥了重要作用。