摘要:目的探讨当归红芪超滤膜提取物对心肌细胞凋亡相关基因bc l-2、bax蛋白表达的影响。方法用高浓度的过氧化氢(400μmol/L)在W istar乳鼠原代培养的心肌细胞上建立细胞凋亡模型,用不同浓度的当归红芪超滤物(3.75、7.5、15 g/L)进行治疗。光镜下观察细胞形态;逆转录-多聚酶链反应和蛋白印迹法检测bc l-2、bax蛋白在心肌细胞中的表达情况。结果与正常对照组相比,高浓度过氧化氢损伤组bc l-2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);bax mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.05);bc l-2/bax比值显著降低(P<0.01),差异具有统计学意义。与损伤组比较,高浓度和中浓度药物治疗组bc l-2 mRNA及其蛋白表达显著增加(P<0.05);bax mRNA及其蛋白表达显著降低(P<0.05);bc l-2/bax比值显著增加(P<0.01),差异具有统计学意义。低浓度药物治疗组则对bc l-2、bax表达无显著改变。结论当归红芪超滤膜提取物可通过上调bc l-2/bax的比值抑制心肌细胞的凋亡,对心肌细胞具有抗凋亡的保护作用。

摘要:目的研究RNA干扰沉默生存素基因表达对移植静脉内膜增生的抑制作用。方法Wistar大鼠48只,建立自体静脉移植模型,术后随机分为对照组、空载体组s、hRNA对照组s、hRNA组,施加不同的处理因素,在移植12、周取材。比较内膜增生程度,半定量逆转录聚合酶链反应检测生存素基因的mRNA表达,Western blot检测生存素基因的蛋白产物表达,免疫组织化学法检测生存素及增殖细胞核抗原的表达,TUNEL法检测血管平滑肌细胞凋亡的变化。结果移植12、周内膜增生明显,局部转染靶向生存素基因的shRNA表达载体能够明显抑制内膜增生(p<0.05)。血管移植后,对照组及空载体组生存素的mRNA及蛋白产物表达显著增加,而shRNA组却显著减少(p<0.05),血管平滑肌细胞中增殖细胞核抗原表达减少,而TUNEL法阳性细胞明显增加。结论采用RNA干扰沉默生存素基因表达可显著抑制移植静脉的内膜增生,其作用机制可能是通过抑制生存素的基因及蛋白产物表达,从而抑制血管平滑肌细胞增殖,促进其凋亡而实现的。

摘要:为制备抗极低密度脂蛋白受体的多克隆抗体,以极低密度脂蛋白受体配体结合域上特定片段的合成肽免疫新西兰家兔,收集免疫前后动物的血清,通过酶联免疫吸附法及免疫印迹法对血清中抗体进行分析和鉴定。结果发现,已获得高效价的抗极低密度脂蛋白受体血清,可利用免疫印迹法检测人、鼠组织和细胞中的天然极低密度脂蛋白受体及其亚型的蛋白。此结果提示,抗极低密度脂蛋白受体多克隆抗体的制备为从蛋白水平研究极低密度脂蛋白受体提供了有效的工具。

摘要:为探讨粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子对人内皮细胞基质金属蛋白酶分泌及活性的影响,体外培养人脐静脉内皮细胞,分别应用蛋白印迹法和酶谱法检测基质金属蛋白酶2的含量和活性。结果发现,与对照组相比,不同浓度(5、2 5和5 0 μg/L)粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子可使人内皮细胞基质金属蛋白酶2的蛋白表达和活性增强,且随粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子剂量增加而增强。提示粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子可通过刺激人内皮细胞基质金属蛋白酶2蛋白的表达,并增强其活性,促进内皮细胞对细胞外基质的降解,从而易于动脉粥样硬化斑块内炎性细胞的渗入,内皮细胞的迁移及新血管的形成,从而对斑块的稳定性产生影响

摘要:为探讨福辛普利、卡托普利和缬沙坦对人血单核细胞受细菌脂多糖刺激时核转录因子c Rel p6 5活化的影响。从健康产妇脐带血分离出单核细胞,与脂多糖及脂多糖加不同药物培养,按不同时间点收集细胞,抽提蛋白。用WesternBiotting技术检测p5 0和p6 5在胞质和胞核中的变化。结果发现,福辛普利、卡托普利和缬沙坦可减弱IκBα的降解,抑制p6 5由胞浆转至核内。结果提示,部分血管紧张素转化酶抑制剂及血管紧张素受体拮抗剂对在受脂多糖刺激时人血单核细胞转录因子的活化可产生抑制作用。