摘要:目的 建立慢性肾脏病(CKD)大鼠主动脉钙化模型,探讨血清骨形态发生蛋白2(BMP-2)、骨形态发生蛋白4(BMP-4)与主动脉钙化程度的相关性。方法 55只SD大鼠随机分为对照组(20只)和CKD组(35只,由于预实验中CKD组大鼠后期存在死亡现象,为保证实验过程每个时间的实验样本量充足,因此CKD组样本量较对照组多),分别于第2、4、6、8周收集血液、尿液、主动脉、肾脏；肾脏HE染色评估肾脏病理改变；茜素红染色法、钙含量测定评估主动脉钙化程度；ELISA测定大鼠血清BMP-2、BMP-4水平；免疫组织化学检测主动脉BMP-2、BMP-4蛋白表达。结果 与对照组各时间点相比,CKD组大鼠24 h尿蛋白定量、血清尿素氮、肌酐、胱抑素C水平明显增加(P＜0.05)。肾脏HE染色显示,自第2周起,肾小管出现扩张,小管内棕黄色物质沉积,随时间进展,逐渐出现间质纤维化,肾小球部分萎缩,血管减少,炎性细胞浸润。茜素红染色随时间进展,第8周出现大量橘红色颗粒物沉积伴钙结节形成。CKD组钙含量明显增加且与血清BMP-2 (r＝0.929,P＜0.01) 及BMP-4 (r＝0.702,P＜0.01)明显正相关。同时,自模型成功建立第4周,主动脉BMP-2、BMP-4蛋白表达即明显增加。结论 血清BMP-2、BMP-4表达增加可作为CKD血管钙化的血清标志物。

摘要:目的 研究P38MAPK信号通路在骨形态发生蛋白2（BMP-2）诱导骨髓间充质干细胞（BMSC）分化为心肌样细胞中的调控作用，探讨BMSC向心肌样细胞分化的可能信号机制。方法 BMSC分离与体外培养；分3组:对照组、BMP-2组（诱导剂组）和BMP-2+SB203580组（阻断剂组）。倒置相差显微镜观察细胞的形态学变化；免疫细胞化学检测诱导后BMSC 心肌特异性肌钙蛋白T（cTnT）和连接蛋白43（Cx43）的表达；Western blot检测诱导后细胞内p-P38MAPK/P38MAPK的变化。结果 BMP-2诱导15 min，p-P38MAPK蛋白呈弱表达，30 min达到高峰，60 min逐渐降低；用P38MAPK阻断剂SB203580预处理细胞后，p-P38MAPK表达明显降低；与诱导剂组比较，阻断剂组的p-P38MAPK蛋白表达减弱，差异有统计学意义（P<0.05）。诱导4周后，对照组cTnT、Cx43呈阴性表达；诱导剂组和阻断剂组呈阳性表达，且阻断剂组Cx43阳性细胞数多于诱导剂组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 BMP-2可诱导BMSC分化为心肌样细胞，P38MAPK信号通路在诱导过程中发挥负性调节作用。