摘要:目的 探讨ghrelin对RAW264.7源性泡沫细胞迁移的影响及相关机制。方法 油红O检测泡沫细胞模型的构建,胆固醇氧化酶法检测泡沫细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)含量,transwell小室实验检测ghrelin对RAW264.7源性泡沫细胞迁移的影响,Western blot检测Akt、p-Akt和cleaved Caspase-3蛋白的表达,免疫荧光检测p-Akt和cleaved Caspase-3的表达,细胞骨架荧光探针检测细胞骨架的变化。观察PI3K特异性抑制剂LY294002是否影响RAW264.7源性泡沫细胞的迁移能力及相关蛋白的表达。结果 10-7 mol/L ghrelin处理RAW264.7源性泡沫细胞可以促进泡沫细胞迁移,此过程可以被LY294002逆转。Western blot结果显示10-7 mol/L ghrelin可显著升高RAW264.7源性泡沫细胞p-Akt的表达,降低cleaved Caspase-3的表达(P＜0.05),并明显改善RAW264.7源性泡沫细胞的迁移能力(P＜0.05),LY294002可逆转以上变化。免疫荧光检测显示Akt在RAW264.7细胞明显表达,ghrelin组表达增多,LY294002组明显降低。结论 ghrelin可促进RAW264.7源性泡沫细胞迁移,其分子机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。

摘要:目的　探讨酰基化Ghrelin是否可保护3T3-L1小鼠脂肪细胞免受肿瘤坏死因子α（TNF-α）所介导的炎症损伤。方法　成熟3T3-L1脂肪细胞分为对照组、TNF-α处理组、酰基化Ghrelin处理组、酰基化Ghrelin　+　TNF-α处理组。干预完成后，分别检测3T3-L1脂肪细胞上Toll样受体4（TLR-4）　mRNA及蛋白水平、核因子κB　p65（NF-κB　p65）磷酸化蛋白水平以及细胞上清液中脂联素和单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）的表达水平。结果　①与对照组比较，TNF-α处理组3T3-L1脂肪细胞TLR-4　mRNA和蛋白水平、NF-κB　p65磷酸化蛋白水平均上调，细胞分泌MCP-1增多，脂联素减少（P<0.05，n5）。②与对照组比较，酰基化Ghrelin处理组TLR-4　mRNA和蛋白水平以及NF-κB　p65磷酸化蛋白水平下降（P<0.05，n5），脂肪细胞分泌脂联素减少（P<0.05，n5），MCP-1仅有下降趋势（P>0.05，n5）。③与TNF-α（100　μg/L）处理组比较，酰基化Ghrelin预孵育4　h可下调TNF-α所致的3T3-L1脂肪细胞TLR-4　mRNA表达增多，其蛋白水平以及NF-κB　p65磷酸化蛋白水平亦有所下调（P<0.05，n5），且呈剂量依赖性；而脂肪细胞MCP-1及脂联素的分泌水平差异无显著性（P>0.05，n5）。结论　TNF-α导致3T3-L1细胞TLR-4、NF-κB　p65炎症通路活化，脂肪细胞分泌促炎因子（MCP-1）增加，而抗炎因子（脂联素）减少；酰基化Ghrelin可剂量依赖性抑制TNF-α介导的3T3-L1细胞TLR-4、NF-κB　p65炎症通路的活化，但不能完全改善脂肪细胞分泌促炎因子和抗炎因子的紊乱。

摘要:<正>动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)是一组主要累及全身大、中型弹力型动脉的血管硬化性疾病,以主动脉、冠状动脉和脑动脉多见,其特征是动脉内膜的脂质沉积和粥样斑块形成,且发病机制与高血压、血脂紊乱及血管内皮损伤等因素密切相关。近年来,各种细胞炎症因子与动脉粥样硬化的关系引起愈来愈多研究者的重视,现谨就择要作综述。

摘要:目的探讨Ghrelin能否抑制棕榈酸诱导的大鼠主动脉内皮细胞凋亡。方法大鼠主动脉内皮细胞分别在含0.3 mmol/L棕榈酸的脂性培养基中孵育24 h,培养基中加或不加Ghrelin,应用MTT法检测细胞活性,Ho-echst 33258及流式细胞仪AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,分光光度计检测Caspase-3活性,Western Blot检测Bcl-2和Bax表达。结果棕榈酸降低细胞活性,使细胞凋亡增加至30.03%,与对照组(5.01%)相比差异有统计学意义(P<0.01),棕榈酸增加Caspase-3活性,使Bcl-2/Bax比率下降。Ghrelin能够浓度依赖性增加细胞活性,10 nmol/L是最低有效浓度,100 nmol/L时作用最显著。Ghrelin能抑制棕榈酸诱导的内皮细胞凋亡,使凋亡率降至10.03%(P<0.05)。同时Ghrelin降低Caspase-3活性并增加Bcl-2/Bax比率。结论Ghrelin可以抑制棕榈酸诱导的血管内皮细胞凋亡,可能在棕榈酸诱导的内皮细胞损伤中发挥保护作用。

摘要:目的近年来研究证明高糖引起的血管内皮细胞凋亡可能加重糖尿病动脉粥样硬化,本研究旨在探讨酰基化ghrelin能否抑制高糖诱导的人血管内皮细胞凋亡。方法应用吖啶橙形态学染色及TUNEL、流式细胞分析仪、分光光度计研究高糖及ghrelin预处理后内皮细胞凋亡及caspase-3活性情况。结果内皮细胞暴露于高浓度葡萄糖(33.3mmol/L)72h与正常水平葡萄糖(5.5mmol/L)相比凋亡细胞数量显著增加,酰基化ghrelin(10-7mol/L)预处理24h后显著降低高糖诱导的凋亡。同时高糖环境下凋亡蛋白caspase-3活性增高,酰基化ghrelin预处理后明显降低caspase-3活性。结论酰基化ghrelin可以抑制高糖诱导的血管内皮细胞凋亡及凋亡蛋白caspase-3的表达,可能在防治糖尿病动脉粥样硬化的过程中起到一定作用。